HPLC法測定宮瘤消片中芍藥苷的含量

尤海丹

（遼寧省標準化體系建設工程技術研究中心遼寧省分析科學研究院，沈陽 110015）

宮瘤消片其處方是由牡丹皮、白術、香附、黨參、莪術等十一位中藥組成，具有活血化瘀，軟堅散結等功效，用于氣滯血瘀子宮肌瘤見有腹部疼痛者。多年的臨床應用表明其療效確切，為了規范藥品的使用，加強質量控制，保證產品的穩定性，本實驗對其質量標準進行了研究。

1　樣品與儀器

1.1　儀器

Agilent 1100液相色譜儀：Agilent 1100泵、Agilent1100 DAD檢測器、Agilent 1100色譜工作站。

1.2　試藥

甲醇為色譜純（天津康科德化學試劑），乙腈為色譜純（天津康科德化學試劑），水為重蒸水（娃哈哈純凈水），磷酸為分析純。對照品（自己制備）。宮瘤消片為自己制備。

2　方法與結果

2.1　對照品溶液的制備

取芍藥苷0.05g，定容于50ml的容量瓶中得0.1mg/ml的對照品溶液。進樣前用0.45 μm微孔濾膜濾過。

2.2　供試品溶液的制備

將宮瘤消片研細，精密稱定約1.163g，置50ml具塞錐形瓶中，加甲醇20ml，精密稱定重量，密塞，超聲提取20min，放置至室溫，補足減失的甲醇，搖勻，濾過，續濾液經0.45 μm微孔濾膜濾過，作為供試品溶液。

2.3　色譜條件

色譜柱：Agilent C18柱（150mm×4.6mm，5μm）；流動相：乙腈-0.1 %磷酸水溶液（15 : 85）；流速1.0ml/min；檢測波長230nm；柱溫27℃。

2.4　系統適用性試驗

2.4.1　線性關系的考察

精密吸取“2.1”項下對照品溶液2μl、4μl、6μl、8μl、10μl分別進樣，記錄色譜圖測定峰面積，以平均峰面積為縱坐標（Y），以對照品質量為橫坐標（X），繪制標準曲線，其回歸方程為Y = 1113.4X ? 4.92，R² = 0.9992。結果表明，芍藥苷含量在0.2～1μg范圍內，供試品含量與吸收峰面積線性關系良好。

2.4.2　精密度試驗

按“2.2”項制備供試品溶液，精密吸取供試品溶液10μl，連續進樣5次，記錄色譜圖，供試品峰面積的RSD為1.42%。結果表明，儀器整個檢測系統的精密度良好。

2.4.3　穩定性試驗

按2.2項制備供試品溶液，在上述色譜條件下，分別在制備樣品后的0h、2h、4h、8h、10h進行測定，記錄色譜圖，結果表明，樣品峰面積的RSD為1.42%，說明樣品于甲醇溶液中10h內穩定。

2.4.4　重復性試驗

按2.2項制備供試品溶液，平行制備5份，分別照含量測定方法測定，進樣量10μl，記錄色譜圖，結果顯示，供試品的分析結果穩定，供試品峰面積的RSD為1.29%，表明該方法的重復性良好。

2.4.5　回收率試驗

分別稱取已知含量的宮瘤消片5份，研細，加入對照品溶液1ml，參照2.2項制備供試溶液。進行測定，記錄色譜圖，結果表明，平均回收率為99.26%，RSD為1.65%，說明該方法可行。具體見表1。

2.5　樣品含量測定

取5批宮瘤消片樣品，按上述方法測定其含量，結果見表2。

3　討論

3.1　檢測波長的確定

取芍藥苷對照品適量，加甲醇溶解得到0.1mg/ml的對照品溶液，在200～400nm掃描，結果表明，芍藥苷在230nm處有一最大吸收峰，所以本實驗選定230nm為檢測波長^[1]。

3.2　流動相的選擇

為了得到良好的色譜圖形和適宜的保留時間，我們分別比較了甲醇-水、乙腈-水、乙腈-0.1 %磷酸水溶液，不同比例的分離效果，結果表明以乙腈-0.1%磷酸水溶液（15 : 85）為流動相時，保留時間適中，分離效果好，故選其為流動相^[2]。具體見圖1。

3.3　宮瘤消片中芍藥苷的含量

芍藥苷性質穩定，含量最高，是宮瘤消片中主要有效成分之一，因此以其作為對照品，通過測定其含量來進行質量標準研究。

由于提取方法不同，提取出的芍藥苷含量也不同，因而分別對供試品的溶液制備方法中提取溶劑、提取方法和提取時間進行考察 ^[3]，見表3～表5。結果表明甲醇超聲提取20min效果比較好。

參考文獻

[1] 吳巧鳳, 嚴云良. 中成藥, 2006, 28(9): 1379-1380.

[2] 李平, 魏琴. 中國藥師, 2006, 9(11): 1019-1021.

[3] 童榮生, 孫世明. 中國醫院藥學雜志, 2006, 26(11): 1370-1372.

作者簡介：尤海丹，女，助理研究員，主要從事分析測試工作，Tel：(024)24210497，E-mail：yhd517@163.com