2.2 器具滅菌

2.2.1 金屬器具滅菌

鑷子、剪刀、解剖刀、接種針（環）直接用酒精燈火焰灼燒，然后放在用70%～75%（V/V）酒精擦拭過的金屬架上；也可以用鋁箔（注意事先檢查，不用有小孔的鋁箔）包裹放入烤箱于160℃高溫干燥滅菌（干熱滅菌）4h，易燃品如紙、棉花等不可干熱滅菌。金屬器具也可以用紙包好在高壓滅菌鍋中用蒸汽滅菌（濕熱滅菌）1h，取出后如有必要可放入60℃恒溫箱中烘干。

2.2.2 玻璃器皿洗滌和滅菌

先用洗滌劑或洗液將玻璃器皿洗凈，至器皿的內、外壁（特別是內壁）不掛水珠后，用紙包好，放入高壓滅菌鍋中滅菌，在15lb/in2（或1.1kg/cm2,103kPa）,120℃下約1h。已經被污染的玻璃器皿，為防止孢子傳播污染環境，必須先經高壓滅菌，殺死微生物的孢子，然后再清洗，使用前再次高壓蒸汽滅菌。

思考與討論題

1．植物組織培養室需要具備哪些功能？

2．你所見過的超凈工作臺有哪幾種送風方式？無菌操作時應注意些什么？

3．為什么超凈工作臺在使用前要檢測污染率？

4．培養架上的熒光燈管為什么要根據它們發射光的波長（偏藍和偏紅）進行搭配？

5．培養室的溫度該如何控制？培養小麥、甘藍和水稻所需的最適溫度有無不同？

6．什么是干熱滅菌？什么是濕熱滅菌？二者有何區別？

參考文獻

[1] White P R. The cultivation of animal and plant cells. New York: The Ronald Press, 1954

[2] Dodds J H, Roberts L W. Experiments in plant tissue culture. Cambridge: Cambridge University Press, 1982:10—20.

[3] Reinert J, Yeoman M M．植物細胞和組織培養實驗手冊．尤瑞麟，王模善，譯．北京：北京大學出版社，1988.