第三節(jié)　草菇菌種的選擇和制作

一、菌種的選擇和優(yōu)質(zhì)菌種的標(biāo)準(zhǔn)

1．菌種的選擇

草菇品種較多，各地可根據(jù)生產(chǎn)實(shí)際，選用適于本地栽培、發(fā)菌出菇及轉(zhuǎn)潮快、抗逆性強(qiáng)、優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、商品性好，以及經(jīng)省級(jí)以上農(nóng)作物品種審定委員會(huì)登記的品種。應(yīng)從具有相應(yīng)資質(zhì)的供種單位引種，通過小面積試種后，再進(jìn)行大面積生產(chǎn)，避免盲目引進(jìn)新品種，一次性投入過多產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)損失。在選購草菇菌種時(shí)若發(fā)現(xiàn)袋內(nèi)菌絲已萎縮，出現(xiàn)水漬狀液體，有腥臭味者不能使用。袋內(nèi)菌絲過分濃密、潔白，或出現(xiàn)魚卵狀顆粒，也可能是混有雜菌，應(yīng)淘汰。

2．優(yōu)質(zhì)菌種的標(biāo)準(zhǔn)

（1）母種 優(yōu)質(zhì)母種為菌絲淡白色至黃白色、半透明、健壯、爬壁能力強(qiáng)，氣生菌絲旺盛，菌種表面允許有少量紅褐色的厚垣孢子。在32℃的條件下，5天長滿斜面。

（2）原種及栽培種 要求生活力強(qiáng)，菌絲生長旺盛、分布均勻，菌絲灰白有光澤，吃料快，不帶病、蟲螨和雜菌，無異味，無老化、退化及菌料干縮離壁現(xiàn)象；有草菇特有的清香味，無酸、臭、霉等異味。在30～32℃，菌種瓶、袋約20天即可發(fā)滿。

二、菌種制作

根據(jù)生產(chǎn)需要，草菇菌種要提前適時(shí)分批制備。一般在開始栽培前20天安排生產(chǎn)栽培種，在生產(chǎn)栽培種前20天生產(chǎn)原種，在生產(chǎn)原種前10天購買或生產(chǎn)母種。菌種生產(chǎn)時(shí)間非常重要，一定要按照菌種生產(chǎn)計(jì)劃嚴(yán)格執(zhí)行。

1．菌種分離

草菇菌種分離可采用組織分離法和孢子分離法，下面介紹組織分離法。選取新鮮、健壯蛋形期子實(shí)體，用75%的酒精棉球進(jìn)行表面消毒，再用無菌水沖洗2～3次，并用無菌紗布擦干后用手術(shù)刀把種菇縱剖為兩半，在菌蓋和菌柄連接處用手術(shù)刀切成5mm2厚3mm的組織塊接于培養(yǎng)基上，蓋好平皿，置于32℃的恒溫培養(yǎng)箱中暗光培養(yǎng)。待菌落長到2cm，選取菌絲潔白、細(xì)密、光滑，沿培養(yǎng)基平行生長的菌落，挑取菌落尖端的菌絲于試管PDA斜面上對(duì)菌種進(jìn)行純化培養(yǎng)。選擇生長速度快、菌絲健壯的菌株為第一代母種（圖2-10）。

2．菌種的制作

（1）母種的制作

① 配方。馬鈴薯200g、葡萄糖20g、蛋白胨3g、瓊脂18～20g、磷酸二氫鉀3g、硫酸鎂1.5g，水1000ml，pH7.5～8.0。

② 按常規(guī)制備、滅菌、接種后在32℃的恒溫條件下培養(yǎng)5天，菌絲長滿試管斜面。草菇母種經(jīng)一段時(shí)間培養(yǎng)后，其白色氣生菌絲會(huì)發(fā)黃并產(chǎn)生紅褐色的厚垣孢子，這是正常現(xiàn)象。

（2）原種、栽培種的制作

① 配方

原種配方：麥粒98%、石灰粉1%、石膏粉1%，含水量50%±2%，pH8.0～9.0。

栽培種配方：棉籽殼80%、麩皮15%、生石灰5%，含水量60%±2%，pH8.0～9.0。

② 菌種瓶、袋的選擇。原種常用750ml的標(biāo)準(zhǔn)菌種瓶（圖2-11），栽培種一般選用15cm長、28cm寬、0.004cm厚的聚丙烯袋（圖2-12）。

③ 拌料、裝瓶（袋）、滅菌、冷卻

a．拌料：按常規(guī)方法將料水混拌均勻。

b．裝瓶（袋）：按常規(guī)方法裝瓶（袋），裝好料后使用棉塞或蓋上能滿足濾菌和透氣要求的無棉蓋體。750ml菌種瓶，一般裝培養(yǎng)料濕重約為400g。規(guī)格為寬15cm、長28cm、厚0.004cm厚的聚丙烯袋，每袋裝料濕重約為600g。

c．滅菌、冷卻：裝瓶（袋）后及時(shí)滅菌，高壓滅菌1.5MPa維持2h（麥粒培養(yǎng)基），常壓滅菌100℃條件下10h（棉籽皮培養(yǎng)基）。滅菌后的培養(yǎng)瓶在冷卻時(shí)，注意要緩慢排氣進(jìn)行降溫，待滅菌罐內(nèi)溫度降至60℃，再移至冷卻室徹底降溫。

d．接種：在無菌條件下接種，每支試管母種接種5瓶（袋）原種，每瓶原種接種30袋栽培種。

④ 培養(yǎng)。培養(yǎng)室要求清潔、干燥、涼爽。室內(nèi)溫度保持30～32℃，室內(nèi)空氣相對(duì)濕度40%～50%，室內(nèi)空氣新鮮，暗光培養(yǎng)。在培育期間，要經(jīng)常檢查菌瓶有無雜菌感染，一旦發(fā)現(xiàn)雜菌要及時(shí)淘汰。原種、栽培種一般培育20天即可長滿。

（3）菌種貯存 草菇成品母種放置于室溫15～20℃避光保存，控制傳代次數(shù)在3代以內(nèi)；成品原種和栽培種可存放于清潔、干燥、避光處貯存，在28～32℃貯存不要超過5天，而在15～20℃貯存不要超過15天，應(yīng)及時(shí)使用。