十、鴨病毒性肝炎

鴨病毒性肝炎是由鴨肝炎病毒引起的小鴨的一種急性、接觸性、高度致死性的傳染病，臨床上以發病急、傳播快、病死率高、肝臟有明顯出血點和出血斑為特征。OIE將其列入B類傳染病，我國將其列為二類動物疫病。

本病于1949年首次由 Levine和 Fabricant在美國紐約長島鴨群流行中確診，之后英國、加拿大、意大利、法國、荷蘭、捷克、匈牙利、埃及、以色列、印度、日本等歐、亞、非洲許多國家相繼有本病的報道。我國在1958年曾報道有本病流行，1980年分離到病毒并開始進行診斷和免疫預防研究。

（一）病毒特征

鴨肝炎病毒（Duck hepatitis virus）屬微RNA病毒科腸病毒屬的成員。病毒粒子直徑20～40nm，無血凝活性。

引起鴨肝炎的病毒有3種，分別稱為1型、2型及3型，其中1型及3型均為微RNA病毒科腸病毒屬，2型為星狀病毒，稱為鴨星狀病毒。以1型鴨肝炎病毒最常見，呈世界性分布。美國還分離到1株1型肝炎病毒變異株，經雞胚交叉中和試驗表明與1型病毒有部分交叉反應，引起的肝炎稱為1a型鴨肝炎。2型鴨肝炎病毒僅見于英國，主要引起10日齡至6周齡鴨發病，其病理變化與1型肝炎類似。3型僅發生于美國，且致病力不如1型，經中和試驗和熒光抗體試驗證實3型肝炎病毒與1型病毒之間無共同抗原成分。因此一般所說的鴨肝炎病毒均指1型。我國流行的多為1型。

印度、埃及及我國還發現與1型肝炎病毒不同或有明顯血清學差異的毒株，這些毒株與其他型肝炎病毒的關系尚不完全清楚。

1型肝炎病毒可以在鴨胚、雞胚、鴨胚肝細胞和鴨胚腎細胞中繁殖，經尿囊腔途徑接種可致死鴨胚和雞胚，隨著傳代代次的增加，胚體致死時間縮短。通過在雞胚中連續傳代后，病毒對雛鴨的致病力逐漸減弱，傳至一定的代次后可失去對鴨的致病力，但仍然保留良好的免疫原性，通過這一途徑可選育出弱毒疫苗株。2型和3型肝炎病毒不能在雞胚中增殖，可采用鴨胚或鴨胚肝細胞進行分離培養。

病毒對外界的抵抗力較強，可耐受乙醚和氯仿，并具有一定的熱穩定性，在自然界能存活較長時間。在－20℃凍結狀態下可保存4年，在污染的育雛室內能生存75d，在潮濕的糞便中能存活1個多月，在37℃可活3周，但62℃ 30min可致死，病毒對常用的消毒劑亦有明顯的抵抗力，1%甲醛幾小時才能滅活。

（二）臨床癥狀

自然感染潛伏期通常為1～4d；人工感染易感雛鴨，其潛伏期可短至24h左右。鴨肝炎發病急，傳播快，病死率高，一般死亡多發生在3～4d內。雛鴨感染發病時表現精神委頓、縮頸、行動呆滯、伏臥、翅下垂、眼半閉，食欲不振或不采食。感染0.5～1d，鴨群中即有部分病鴨出現全身抽搐、身體側臥、兩腿痙性后踢，有時在地上旋轉、頭向后背呈“背牌”姿勢（圖1-37）。喙端和爪尖瘀血呈暗紫色，少數病鴨死前排黃白色和綠色稀糞。一般病鴨出現抽風后十幾分鐘迅速死亡，有的可持續5h左右才死亡。個別雛鴨不出現明顯癥狀突然死亡。

（三）病理變化

剖檢病變主要表現在肝臟腫大、質地發脆、色暗淡或發黃。肝臟表面呈斑駁狀，有大量出血點和出血斑（圖1-38），部分鴨肝臟有鋸狀出血帶。膽囊腫大、膽汁充盈。腎臟輕度充血、腫大，有時脾臟腫大有斑駁狀出血。但也有一些病死鴨無肉眼可見的變化。

組織學病變主要是肝細胞彌散性變性和壞死，部分肝細胞脂肪變性，血管周圍有不同程度的炎性細胞浸潤。

（四）流行病學特征

易感動物：自然情況下，本病主要感染鴨、雞、火雞和鵝，野生水禽可能成為帶毒者。主要引起5周齡以內的小鴨發病和死亡，1周內的雛鴨發病率可達100%、病死率可達95%；1～3周齡的雛鴨病死率為50%或更低。隨著日齡的增大，發病率和病死率明顯降低，4周齡以上小鴨感染發病較少。成年鴨即使在病毒嚴重污染的環境中也無臨診表現，并且對種鴨產蛋率無影響。3型肝炎病毒的致病性稍低，臨診上病死率往往不超過30%，人工感染的病死率更低。據報道，棕色大鼠（Rattus norvegicus）可作為1型鴨肝炎病毒的貯存宿主，這對于該病的流行病學分析有重要意義。

傳染源：病鴨和帶毒鴨是本病的主要傳染源。感染鴨康復后8周仍可能從便中排毒。

傳播途徑：本病主要通過與病鴨直接接觸感染，病鴨糞便所污染的飼料和飲水經消化道、呼吸道感染，也能通過人員的參觀、飼養人員的串舍以及污染的用具、墊料和車輛等傳播。1型鴨肝炎病毒具有極強的傳染性，在易感鴨群中可迅速傳播。通過皮下和肌內注射等途徑人工感染易感雛鴨，其潛伏期可短至24h左右，發病和死亡主要集中于感染后24～96h。

流行形式及因素：本病一年四季均可發生，但主要在孵化季節。飼養密度過大、鴨舍過于潮濕、衛生條件差、飼料內缺乏維生素和礦物質等可促使本病的發生。

（五）預防及治療

堅持嚴格防疫、檢疫和消毒制度，堅持自繁自養、全進全出，防止本病傳入鴨群是該病防控的首要措施。疫區及受該病威脅地區的鴨群進行定期的疫苗免疫預防是防止本病發生的有效措施。

對于無母源抗體的雛鴨，1～3日齡時可用鴨肝炎弱毒疫苗進行免疫，能有效地防止本病的發生。如果種鴨在開產前間隔15d左右接種2次鴨肝炎疫苗，之后隔3～4個月加強免疫1次，其后代可獲得較高的母源抗體，從而能夠得到良好的免疫保護作用。但是對于病毒污染比較嚴重的鴨場，部分雛鴨在10日齡以后仍有可能被感染，應考慮避開母源抗體的高峰期接種疫苗或注射高免卵黃或血清。

（六）實驗室檢測

參照標準：NY/T 554-2002。

1.雛鴨接種/保護試驗

（1）材料準備

1）研缽或平皿，玻璃勻漿器，10ml帶膠塞玻璃瓶。

2）1ml和5ml注射器及針頭。

3）0.22μm微孔濾膜及濾頭。

4）離心管、手術剪刀及手術鑷子。

5）0.85%生理鹽水：在使用前加入青霉素和鏈霉素，使其最終濃度為2000IU/ml和2000μg/ml。

6）DHV高免血清。

7）雛鴨：1～5日齡75只易感健康雛鴨。

（2）操作方法

1）病料處理　在無菌室內超凈工作臺上無菌采取數例病鴨的肝臟組織10g，于研缽或平皿中剪碎，用玻璃勻漿器制備組織勻漿，按1∶10（W/V）加入生理鹽水。將勻漿液轉至離心管中，3000r/min離心10min。棄去上層脂肪，抽取中間清亮的液體，再經過0.22μm滅菌微孔濾膜過濾，收集濾過的液體，作為病料樣品直接接種；或裝入10ml玻璃瓶中，蓋上膠塞，置專用的密閉鐵盒里，于－20℃保存待檢，保存期不超過1年。

2）試驗　選取75只健康雛鴨，分為A、B、C三組，每組25只，做如下處理。

A組（攻毒保護組）：每只鴨頸背部皮下注射1ml DHV高免血清。24h后，每只鴨皮下注射0.2ml的待檢樣品。

B組（攻毒組）：每只鴨頸背部皮下注射0.2ml待檢樣品。

C組（對照組）：每只鴨頸背部皮下注射0.2ml生理鹽水。

將上述三組鴨置于相同的管理條件下，隔離飼養，連續觀察。

（3）結果判定　當C組沒有任何一只雛鴨死亡時，試驗才能成立，可進行如下判定，否則應重檢。

陽性（+）：B組特征性死亡的鴨的比例達30%以上（含30%），而A組死亡鴨只比例低于10%（含10%）。

陰性（－）：B組的鴨只均不死亡。

可疑（±）：B組特征性死亡的鴨的比例低于30%，而A組鴨只不死亡。此可疑結果應重檢，仍為可疑則判為陽性。

2.鴨（雞）胚接種/中和試驗

（1）材料準備

1）1ml注射器及針頭4套。

2）生理鹽水在使用前加入青霉素和鏈霉素，使其最終濃度分別為2000IU/ml和2000μg/ml。

3）DHV高免血清。

4）鴨（雞）胚：75枚12～14日齡的易感健康鴨胚：也可選用9～10日齡的無特定病原（SPF）雞胚。

（2）操作方法

1）取0.5ml病料樣品，加入4.5ml生理鹽水，制備成100倍稀釋的待檢病毒液。

2）選取75只鴨胚或雞胚，分為A、B和C共三組，每組25只胚，處理如下。

A組（中和試驗組）：取2ml高免血清和2ml的待檢病毒液，混合均勻。置于37℃溫箱中作用30min后，每胚經尿囊腔接0.2ml。

B組（接種試驗組）：取2ml生理鹽水，加入2ml待檢病毒液，混勻，每只胚經尿囊腔接種0.2ml。

C組（對照組）：每只胚經尿囊腔接種0.2ml生理鹽水。

將上述三組接種的鴨（雞）胚用石蠟或無菌膠布封口后，置于37℃孵化箱內繼續孵化，每天照蛋2次，剔除接種后24h內A、B、C三組因細菌污染而死亡的胚，分組記錄其死亡情況及胚胎剖檢病變。觀察至第7天（如用雞胚，則為10d）。

（3）結果判定

當C組中沒有任何胚胎死亡，才可進行如下判定，否則應重檢。

陽性（+）：B組特征性死亡的鴨（雞）胚比例達20%以上（20%），而A組的胚不死亡。

可疑（±）：B組特征性死亡的鴨（雞）胚比例低于20%，面A組的胚不死亡。此可疑結果應重檢，仍為可疑時則判為陽性。

陰性（－）：B組和A組的胚均不死亡。