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第二節 工程菌種的質量控制

基因工程產品的生產應建立三級菌種庫,即原始菌種庫、主代菌種庫和工作菌種庫。含表達載體的宿主細胞經克隆、鑒定后,冷凍干燥放低溫或冷凍保存,建立原始菌種庫。原始菌種庫要求無污染、遺傳穩定、質粒穩定、表達穩定、結構穩定,有效期5~10年。從原始菌種庫傳出,經擴大后凍干保存,作為主代菌種庫,但每次只限傳3代,有效期5年。從主代菌種庫傳出,經擴大后制備成甘油菌,放-80℃保存,有效期1年。主代種子批和工作種子批菌種均應進行相應的生化反應、質粒檢查、核苷酸序列測定等檢定。菌種檢測合格入庫保藏時要進行入庫登記,包括菌種編號、入庫時間、保護劑、保藏份數等。菌種發放也應建立出庫登記,包括出庫時間、目的、數量等,并簽名。入庫后的菌種應由專人進行定期檢查復核及轉管,發現有污染或退化跡象時,要及時分離純化、復壯,每次檢查要有詳細記錄。不同類別的菌種和不同方法保藏的菌種的轉管周期不同。轉管時最好選用兩種以上培養基觀察培養特征,以備下次轉管時參考。
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