改革開(kāi)放后的這一時(shí)期，是我國(guó)生物制品發(fā)展的第三個(gè)高峰期，也是三座高峰中最高的一座山峰。解脫了“左”的桎梏的生物制品行業(yè)的科學(xué)家和工程師們，長(zhǎng)期被壓抑的正能量像火山一樣噴發(fā)出來(lái)，在追趕和超越的路上向前奔跑，甚至拼著老命奉獻(xiàn)著自己的力量。

令人窒息的“文革”終于結(jié)束，冬天過(guò)去，春天來(lái)了。這是打倒“四人幫”帶來(lái)的春天，是黨的十一屆三中全會(huì)帶來(lái)的春天。在這個(gè)春天里，黨和國(guó)家的工作重點(diǎn)轉(zhuǎn)移到經(jīng)濟(jì)建設(shè)上來(lái)了，實(shí)事求是的思想路線恢復(fù)了。隨著撥亂反正，肅清“左”的影響的鼓點(diǎn)，知識(shí)分子政策一步步落實(shí)，被錯(cuò)劃成“右派”的人平反了，檔案中的錯(cuò)誤結(jié)論被清理出來(lái)，一風(fēng)吹了，戴在他們身上的枷鎖被砸得粉碎。在“文革”中被廢棄的學(xué)術(shù)和專業(yè)技術(shù)職稱制度、學(xué)術(shù)委員會(huì)制度、獎(jiǎng)金制度等得以恢復(fù)。很久沒(méi)有像現(xiàn)在這樣心情舒暢、揚(yáng)眉吐氣了，該挺起腰板，抖擻精神，伸開(kāi)雙臂擁抱科學(xué)的春天了！

生物制品行業(yè)是所謂“知識(shí)分子成堆”的地方，特別是高級(jí)知識(shí)分子比較集中。曾幾何時(shí)，這條戰(zhàn)線是“思想改造”的重點(diǎn)，如今成為思想解放的前哨陣地之一，是率先走向世界的行業(yè)之一。

“山中才七日，世上已千年。”改革開(kāi)放，國(guó)門打開(kāi)，睜眼看世界。很多人是第一次出國(guó)，就像《紅樓夢(mèng)》中的劉姥姥進(jìn)了大觀園一樣。第一眼看到的是什么呢？是發(fā)達(dá)國(guó)家的富有和繁華，是街道上多如過(guò)江之鯽的小汽車，是城市鱗次櫛比的高樓大廈和郊區(qū)環(huán)境優(yōu)雅的小別墅……賓館的房間里，居然還有冰箱。冰箱里放著什么呢？打開(kāi)看看，哦！里面裝著洋酒、可樂(lè)等各種飲料和小吃，但這不是為中國(guó)人準(zhǔn)備的，因?yàn)檫@是要付費(fèi)的，中國(guó)人口袋里沒(méi)錢，連一杯咖啡也喝不起。上海所研究員童葵塘在《回憶錄》（手寫(xiě)本）中寫(xiě)道：“1988年赴日本京都參加國(guó)際干擾素年會(huì)……由于代表團(tuán)的大多數(shù)人都是第一次出國(guó)，都很興奮……日本人表面上對(duì)客人很禮貌，像賓館里面的服務(wù)員見(jiàn)你出入就鞠躬問(wèn)好，但一有利害沖突就很兇狠。譬如我住的客房?jī)?nèi)有一只冰箱，當(dāng)時(shí)國(guó)內(nèi)賓館房間里還很少見(jiàn)，我好奇地打開(kāi)冰箱門，見(jiàn)里面有可口可樂(lè)就拿出一瓶看了看，我知道這是要花錢買的，就放回冰箱。開(kāi)完會(huì)準(zhǔn)備回國(guó)，在辦理退房交費(fèi)手續(xù)時(shí)，硬說(shuō)我用了一瓶可樂(lè)，要收費(fèi)。我堅(jiān)決否認(rèn)，說(shuō)‘根本沒(méi)有喝過(guò)可樂(lè)’。那個(gè)服務(wù)員就沉下臉，兇狠狠地說(shuō)：‘我們有記錄！’我怎么否認(rèn)他們也不相信，態(tài)度十分惡劣。我要他們一起去房間的冰箱中查，結(jié)果證明我確實(shí)沒(méi)有消費(fèi)過(guò)，錢不收了，但他們沒(méi)有道歉。”受此等冤枉氣的事多了，且不去管它，我們要看的是科技。發(fā)達(dá)國(guó)家生物制品的科研、生產(chǎn)單位的儀器、設(shè)備之先進(jìn)，許多東西是我們過(guò)去見(jiàn)所未見(jiàn)、甚至聞所未聞的。比如，他們的疫苗生產(chǎn)用的是工業(yè)化的生產(chǎn)線，從原料到產(chǎn)品直到接種的全過(guò)程都必須符合GMP（生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范）標(biāo)準(zhǔn)，而我國(guó)當(dāng)時(shí)還基本停留手工作業(yè)的水平上，生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)還沒(méi)有與國(guó)際接軌，所以WHO的專家說(shuō)：“中國(guó)生產(chǎn)的疫苗只能在中國(guó)銷售”……面對(duì)我國(guó)與發(fā)達(dá)國(guó)家在經(jīng)濟(jì)上、科技上的巨大差距和各方面的誘惑，有的人迷茫了，“黃鶴一去不復(fù)返”了，有的人卻反而被激發(fā)出更大的雄心壯志。

這種雄心壯志是建立在實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度上的，而不是像“大躍進(jìn)”時(shí)那樣關(guān)門喊出的“超英趕美”的盲目口號(hào)。正視差距、承認(rèn)差距是實(shí)事求是，通過(guò)努力奮斗縮短差距，迎頭趕上，爭(zhēng)取超越也是實(shí)事求是。

回想我國(guó)生物制品行業(yè)發(fā)展進(jìn)程，應(yīng)該說(shuō)在20世紀(jì)五六十年代與西方國(guó)家的差距并不太大，在科技含量上甚至可以說(shuō)基本是同步的。那時(shí)的疫苗制作大都用的是天然培養(yǎng)基，世界如此，我國(guó)也如此；細(xì)胞組織培養(yǎng)基、傳代細(xì)胞培養(yǎng)基在國(guó)外剛出現(xiàn)，我們就緊跟上來(lái)了，差距也不過(guò)3—5年。真正把差距拉大是在“文革”期間，這一期間正是世界科學(xué)技術(shù)蓬勃發(fā)展的時(shí)期，而我們卻在搞內(nèi)亂，耽誤了，如70年代中期國(guó)外就有了單克隆抗體、人工重組干擾素，正在研究基因重組疫苗，我們只能在遲到的外刊中眼睜睜地看著人家往前走，眼看著差距越來(lái)越大，我們卻只能干著急，想學(xué)沒(méi)法學(xué)，想趕沒(méi)法趕。改革開(kāi)放后，我們想學(xué)可以出國(guó)去學(xué)了，想趕知道怎么趕了。

許多生物制品外國(guó)有我們也有，差距在哪里？在產(chǎn)品質(zhì)量上，在生產(chǎn)工藝上。對(duì)這類生物制品，通過(guò)產(chǎn)品升級(jí)和引進(jìn)先進(jìn)的生產(chǎn)工藝及管理系統(tǒng)，使之符合WHO的標(biāo)準(zhǔn)。比如，脊髓灰質(zhì)炎糖丸疫苗曾經(jīng)是我國(guó)疫苗中的一張“王牌”，為在我國(guó)消滅脊灰起到了至關(guān)重要的作用，但是糖丸疫苗卻不能出口。北京生研所進(jìn)行產(chǎn)品升級(jí)換代，研發(fā)出替代糖丸疫苗的雙價(jià)口服脊灰疫苗（bOPV），并嚴(yán)格按照WHO的GMP規(guī)程進(jìn)行生產(chǎn)，終于取得WHO的預(yù)認(rèn)證，獲得聯(lián)合國(guó)兒童基金會(huì)采購(gòu)訂單，名正言順地走向了世界。但bOPV也只能算是一種過(guò)渡產(chǎn)品，2015—2016年，我國(guó)疫苗專家又研制生產(chǎn)出賽賓株脊灰滅活疫苗（sIPV），這是最新產(chǎn)品，終將全部代替減毒活疫苗。

差距的第二種表現(xiàn)是，外國(guó)有了，我們沒(méi)有。已經(jīng)輸在了起跑線上，要從零開(kāi)始，望其項(xiàng)背努力追趕。比如單克隆抗體、治療用重組人工干擾素、基因工程疫苗等，在“文革”結(jié)束時(shí)，我們大多還是一張白紙。改革開(kāi)放后，我國(guó)生物制品工作者迅速起步，夜以繼日，三步并作兩步地玩命追趕，較快地縮短了差距，有些制品甚至后來(lái)居上，能與發(fā)達(dá)國(guó)家并駕齊驅(qū)了。如武漢所謝毓晉領(lǐng)導(dǎo)研制成功的治療用重組人工干擾素制品，全家嫵博士用基因技術(shù)研究出的“抗癌1號(hào)”，單克隆抗體研究中心研發(fā)的系列診斷制品和部分治療新藥；北京所劉雋湘領(lǐng)導(dǎo)研制成功的抗乙肝、抗破傷風(fēng)免疫球蛋白；上海所童葵塘等研制成功的基因工程干擾素α1b，等等。其中不少是中國(guó)首創(chuàng)，達(dá)到世界先進(jìn)水平。

改革開(kāi)放后的這一時(shí)期，是我國(guó)生物制品發(fā)展的第三個(gè)高峰期，也是三座高峰中最高的一座山峰。解脫了“左”的桎梏的生物制品行業(yè)的科學(xué)家和工程師們，長(zhǎng)期被壓抑的正能量像火山一樣噴發(fā)出來(lái)，在追趕和超越的路上向前奔跑，甚至拼著老命奉獻(xiàn)著自己的力量。

然而，生物制品行業(yè)和全國(guó)科、教、文等各條戰(zhàn)線的情況一樣，面臨的最大危機(jī)是“文革”造成的人才斷層。“文革”結(jié)束時(shí)，老一代的科學(xué)家都已年過(guò)古稀了，50年代畢業(yè)的大學(xué)生，大的已到“耳順”之年，小的也已經(jīng)“知天命”了。面對(duì)人才斷層，為使我國(guó)生物制品行業(yè)后繼有人，老一輩的科學(xué)家挑起了培育人才的重?fù)?dān)。繼武漢所率先取得博士、碩士學(xué)位授予權(quán)之后，其他各所也相繼取得了碩士學(xué)位授予權(quán)，開(kāi)始招收研究生；各生研所都辦起了各種文化補(bǔ)習(xí)班，尤以上海所開(kāi)辦的上海生物制品學(xué)校最為著名。這雖然是一所中專，但必須通過(guò)高考錄取，錄取分?jǐn)?shù)線不僅遠(yuǎn)超大專線而且高于許多二本院校。因?yàn)檫@所學(xué)校的師資力量雄厚，教員都是教授、研究員一級(jí)的，教學(xué)要求嚴(yán)格，而且教學(xué)與實(shí)踐相結(jié)合，所以培養(yǎng)出來(lái)的人才拿來(lái)就能用，成為各生研所的“搶手貨”。如現(xiàn)中國(guó)生物長(zhǎng)春公司的鄒勇、武漢公司的段凱、天壇生物的付道興等所級(jí)領(lǐng)導(dǎo)，都是從這所生物制品學(xué)校畢業(yè)的。至于在各單位成為生產(chǎn)、科研、管理部門領(lǐng)導(dǎo)的更是多達(dá)數(shù)百人。

在人才建設(shè)上，除了立足自身培養(yǎng)之外，還走出了一條中外聯(lián)合培養(yǎng)的路子。北京所與丹麥合作舉辦“中丹醫(yī)學(xué)生物學(xué)進(jìn)修生培訓(xùn)中心”，連續(xù)舉辦了近400期，共培訓(xùn)學(xué)員近2萬(wàn)人。“中丹”被稱為中國(guó)生物制品行業(yè)的“黃埔軍校”。

在加強(qiáng)培訓(xùn)的同時(shí)，各生研所乘國(guó)門打開(kāi)的東風(fēng)，大量向國(guó)外派遣留學(xué)生。改革開(kāi)放初期，上海所派遣了38人，中檢所派遣了60人，其他所也至少派遣了20人以上。在介紹出國(guó)留學(xué)和在國(guó)際交流上，老一代的專家起到了牽線搭橋的關(guān)鍵作用。他們?cè)缒暝趪?guó)外留學(xué)，并且大多在國(guó)際學(xué)術(shù)界有一定影響，他們的推薦信就是“通行證”。通過(guò)他們推薦出國(guó)學(xué)習(xí)的人遍及歐、美、日、澳。如朱既明是30年代留學(xué)英國(guó)的，到90年代中國(guó)學(xué)者訪英，英國(guó)人還問(wèn)起他，說(shuō)這個(gè)人很聰明很優(yōu)秀。蘭州所原所長(zhǎng)王成懷在學(xué)術(shù)上與日本有淵源，因有這一優(yōu)勢(shì)，他沒(méi)有少往日本推薦留學(xué)生。原武漢所總技師謝毓晉是留德的，改革開(kāi)放時(shí)他當(dāng)年的導(dǎo)師還健在，武漢所前往德國(guó)留學(xué)的人比較多，都是他介紹去的。原北京所的專家劉雋湘是留美的，也運(yùn)用自己在美國(guó)的人脈，把助手和學(xué)生推薦到美國(guó)留學(xué)。這些留學(xué)生回國(guó)后都成為各生研所的科研生產(chǎn)骨干，即使留在了海外也不忘“娘家”。如原武漢所的史良如留在德國(guó)當(dāng)了教授，但他每年都回武漢所作學(xué)術(shù)報(bào)告，并把國(guó)外新的單克隆細(xì)胞株和相關(guān)技術(shù)帶回來(lái)。后來(lái)他到美國(guó)當(dāng)教授，仍然堅(jiān)持這樣做。武漢所的單克隆技術(shù)在全國(guó)處于領(lǐng)先水平，國(guó)際交流頻繁是其中一個(gè)原因。

“工欲善其事，必先利其器。”科研設(shè)備的落后是制約我國(guó)生物制品行業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要原因。隨著國(guó)家經(jīng)濟(jì)實(shí)力的增強(qiáng)，各種先進(jìn)的儀器設(shè)備逐漸進(jìn)口，各生研所的硬件開(kāi)始更新?lián)Q代。1984年，上海所啟動(dòng)了“血液制劑生產(chǎn)線”的引進(jìn)工作，1986年與日本臟器制藥株式會(huì)社簽訂了引進(jìn)血液制劑成套設(shè)備的合同，1988年5月開(kāi)工建設(shè)，1990年11月建成，設(shè)計(jì)年投料30萬(wàn)升血漿（最高可達(dá)90萬(wàn)升），成為當(dāng)時(shí)亞洲規(guī)模最大的血液制劑生產(chǎn)線。1980年，衛(wèi)生部就提出了利用世界銀行貸款在蘭州所、上海所和昆明所新建7條大規(guī)模的工業(yè)化疫苗生產(chǎn)線的計(jì)劃，幾經(jīng)周折，這7條生產(chǎn)線于1999年通過(guò)驗(yàn)收。

在引進(jìn)國(guó)外成套先進(jìn)設(shè)備的過(guò)程中，往往是專家提建議，領(lǐng)導(dǎo)下決心。如上海所引進(jìn)日本的年產(chǎn)血漿30萬(wàn)升的血液制品生產(chǎn)線，是由時(shí)任衛(wèi)生部部長(zhǎng)錢信忠親自牽線搭橋的。北京所引進(jìn)的美國(guó)默克公司酵母基因工程乙肝疫苗工業(yè)化生產(chǎn)技術(shù)項(xiàng)目，原北京所所長(zhǎng)、中國(guó)工程院院士趙鎧功不可沒(méi)。

在利用國(guó)外資金進(jìn)行技術(shù)改造的同時(shí)，1988—1993年期間，北京、長(zhǎng)春、武漢、成都4個(gè)所還利用國(guó)內(nèi)資金對(duì)脊髓灰質(zhì)炎、卡介苗、乙型腦炎疫苗、森林腦炎疫苗、流腦多糖疫苗、狂犬病疫苗和乙型肝炎診斷試劑共11條生產(chǎn)線及配套設(shè)施進(jìn)行了技術(shù)改造，生產(chǎn)條件得到了極大的改善。

早在1975年11月，世衛(wèi)組織就公布了GMP標(biāo)準(zhǔn)（藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范），但因種種原因，我國(guó)的生物制品與GMP要求存在一定差距。1985年6月，衛(wèi)生部提出了生物制品技術(shù)改造方針，改造的目標(biāo)是使生產(chǎn)條件符合GMP要求，各生研所開(kāi)始了有計(jì)劃地進(jìn)行技術(shù)改造，把通過(guò)世衛(wèi)組織預(yù)認(rèn)證作為自己的產(chǎn)品質(zhì)量目標(biāo)。第一個(gè)通過(guò)預(yù)認(rèn)證的是成都所的地鼠腎細(xì)胞乙腦活疫苗。

春光明媚，萬(wàn)紫千紅，孔雀展翅，燕子呢喃，一派生機(jī)勃勃的景象。本編百里挑一，給大家講幾個(gè)春天的故事。

第十九節(jié) 春風(fēng)第一枝

“春風(fēng)又綠江南岸”，“紅杏枝頭春意鬧”，王安石的一個(gè)“綠”字，宋祁的一個(gè)“鬧”字，寫(xiě)出了大自然春天的勃勃生機(jī)。生物制品行業(yè)的春天也是如此，在繁花似錦的五彩繽紛中，有不少是我國(guó)生物制品史上第一次出現(xiàn)的花朵。它們或是一項(xiàng)技術(shù)，或是一條生產(chǎn)線，或是人才培育模式。本章只寫(xiě)了三個(gè)“第一次”的故事，但透出了濃厚的春天氣息。

第一個(gè)引進(jìn)的單克隆抗體

“竹外桃花三兩枝，春江水暖鴨先知。”1977年，對(duì)“文革”的影響剛剛開(kāi)始清算，被“文革”破壞得千瘡百孔的體制和制度剛剛開(kāi)始恢復(fù)。曾經(jīng)被下放給所在省領(lǐng)導(dǎo)的各生研所又重新收回國(guó)家衛(wèi)生部領(lǐng)導(dǎo)。剛恢復(fù)職務(wù)的衛(wèi)生部長(zhǎng)錢信忠敏銳地意識(shí)到：如果關(guān)起門來(lái)喊“把被‘四人幫’耽誤的時(shí)間奪回來(lái)”的口號(hào)，那是奪不回來(lái)的。醫(yī)藥特別是主要用于防疫的生物制品是具有世界屬性的，離不開(kāi)世界各國(guó)的通力合作。我國(guó)的生物制品與先進(jìn)國(guó)家相比落后了，首先要搞清別人先進(jìn)在哪里，才能真正清楚究竟落后在哪里。要走出去看一看，有條件引進(jìn)的應(yīng)爭(zhēng)取引進(jìn)，不能什么都自己從頭做起。于是，衛(wèi)生部與WHO（世界衛(wèi)生組織）達(dá)成了一個(gè)協(xié)議：我國(guó)派5個(gè)考察組去WHO總部考察，同時(shí)由他們安排考察相關(guān)國(guó)家的生物制品機(jī)構(gòu)。5個(gè)組中，其中一個(gè)叫免疫學(xué)考察組，由時(shí)任長(zhǎng)春生研所所長(zhǎng)的張權(quán)一帶隊(duì)，組員有本所的李才、劉東升以及白求恩醫(yī)科大學(xué)的一位教員。頭一個(gè)月，他們住在日內(nèi)瓦WHO總部，每天坐火車去洛桑一個(gè)由WHO舉辦的免疫學(xué)培訓(xùn)班聽(tīng)課。國(guó)外免疫學(xué)的發(fā)展大大超出了他們?cè)瓉?lái)的想象，課堂上他們瘋狂地記筆記，回到賓館再一起討論，深感要追趕世界先進(jìn)水平任重道遠(yuǎn)。緊接著，WHO安排他們到英國(guó)去考察。在英國(guó)，他們先后考察了英國(guó)生物制品檢定所，著名的生物制品生產(chǎn)廠家Wellcome，還有劍橋、牛津等大學(xué)的研究機(jī)構(gòu)。人家的各種先進(jìn)技術(shù)和儀器、設(shè)備，真有點(diǎn)讓人眼花繚亂，很多東西是第一次見(jiàn)到。這么多好東西，不可能一口全吞下去，生吞活剝也消化不了，得挑重點(diǎn)來(lái)學(xué)。當(dāng)時(shí)，劍橋大學(xué)的分子生物學(xué)研究室正在用雜交瘤技術(shù)做單克隆抗體。這是他們第一次見(jiàn)到單抗，感到特別興奮。為學(xué)習(xí)這項(xiàng)技術(shù)，他們?cè)谶@個(gè)研究室整整待了一周。張權(quán)一回憶說(shuō)：

他們實(shí)驗(yàn)室的頭是一個(gè)智利人，名字叫密爾斯丁。這個(gè)老頭對(duì)我們很友好，教我們?cè)趺醋觥Ｄ菚r(shí)候，單抗技術(shù)剛開(kāi)始，就是由這個(gè)實(shí)驗(yàn)室搞出來(lái)的，從頭到尾，他都給我們演示了一遍。我們?cè)谀抢锎似甙颂臁Ｎ乙豢春臀覀冋莆盏募夹g(shù)比較接近，我們搞病毒，都是用細(xì)胞培養(yǎng)病毒、檢定病毒，他也是細(xì)胞培養(yǎng)。和我們一般培養(yǎng)不一樣的地方，他是用二氧化碳孵箱來(lái)培養(yǎng)，有二氧化碳這個(gè)細(xì)胞才長(zhǎng)得好，這我們過(guò)去沒(méi)有聽(tīng)說(shuō)過(guò)。按他說(shuō)的道理，我們感到我們能夠做出來(lái)。雜交瘤技術(shù)把兩個(gè)獨(dú)立的細(xì)胞融合在一起，變成一個(gè)細(xì)胞，里面的基因就交融了，融合在一起了，所以叫雜交。在技術(shù)上這是一個(gè)很大的進(jìn)步，我們之前聞所未聞。十年“文化大革命”，我是燒鍋爐的，脫離了原來(lái)的實(shí)驗(yàn)室，對(duì)外面的事啥都不知道。到外國(guó)一考察，知道了外國(guó)這幾年的新進(jìn)展、看到了新東西。這個(gè)雜交瘤單克隆抗體，我們感到可以引進(jìn)來(lái)。還有好多新東西，很先進(jìn)，但我們還沒(méi)法搞，沒(méi)有設(shè)備，最起碼的電子顯微鏡就不容易得到……但是雜交瘤單抗我們可以跟上去，學(xué)回來(lái)。

張權(quán)一想要學(xué)他的技術(shù)，還想要他的單抗，便問(wèn)密爾斯丁：“你能不能給我？”未想到密爾斯丁非常爽快地答應(yīng)了：“可以給你。我用一個(gè)小瓶子裝上細(xì)胞，你現(xiàn)在就可以帶走。”可當(dāng)時(shí)張權(quán)一沒(méi)法帶，因?yàn)榘碬HO的安排，他們還要去其他國(guó)家考察。單抗細(xì)胞是活的，不給它加營(yíng)養(yǎng)就會(huì)死，死了就沒(méi)用了，而在旅途中又無(wú)法給它加營(yíng)養(yǎng)。張權(quán)一只好與他約定，等下次有機(jī)會(huì)再給。

這次考察回國(guó)后，張權(quán)一受衛(wèi)生部委托在長(zhǎng)春辦了一期免疫學(xué)學(xué)習(xí)班，主要是介紹這次考察的內(nèi)容和收獲，原定40人參加，結(jié)果卻來(lái)了400人，全國(guó)得到消息的單位都派人來(lái)了。當(dāng)時(shí)國(guó)內(nèi)對(duì)學(xué)習(xí)國(guó)外先進(jìn)技術(shù)的渴求和熱情，由此可見(jiàn)一斑。張權(quán)一辦完學(xué)習(xí)班，就在長(zhǎng)春所成立了一個(gè)單克隆抗體研究室，帶著大家先搞理論研究，一直在找從密爾斯丁那里取回單抗細(xì)胞的機(jī)會(huì)。快遞不就行了嗎？說(shuō)得輕巧，那會(huì)哪有什么快遞呀！如果讓他把細(xì)胞寄到中國(guó)來(lái)，路上要超過(guò)一周時(shí)間，不等寄到細(xì)胞就死了。那就飛到英國(guó)去取唄！不好意思，連買機(jī)票的錢都沒(méi)有。怎么辦？只好耐心找機(jī)會(huì)。

三年后，他終于逮住了一個(gè)機(jī)會(huì)。WHO要召開(kāi)一次免疫快速診斷學(xué)術(shù)會(huì)議，他寫(xiě)了一篇文章寄去當(dāng)“投名狀”，結(jié)果這篇文章被選中了，他又可以去日內(nèi)瓦了，會(huì)議秘書(shū)處會(huì)給他訂好來(lái)往機(jī)票。出國(guó)前，張權(quán)一就給密爾斯丁寫(xiě)信告訴他的行程，希望在他離開(kāi)日內(nèi)瓦的前一天把單抗細(xì)胞株寄到日內(nèi)瓦WHO總部，然后由他帶回國(guó)。密爾斯丁履行了諾言。從劍橋郵寄到日內(nèi)瓦只需一天時(shí)間，張權(quán)一拿到細(xì)胞株之后坐半夜起飛的飛機(jī)飛回了北京。在北京海關(guān)，檢查人員發(fā)現(xiàn)了他帶的這個(gè)小瓶子，要打開(kāi)查驗(yàn)。張權(quán)一回憶說(shuō)：“當(dāng)時(shí)，我趕緊出示了我的工作證件，告訴他們這個(gè)東西是用于科研的，從外表來(lái)看它就是一管液體，但里面的東西是活的，打開(kāi)就全完了，好在那位檢查人員十分通情達(dá)理，了解清楚情況后就放行了。”單抗細(xì)胞株隔一段時(shí)間就要更換一次培養(yǎng)液，必須在無(wú)菌的環(huán)境下更換，張權(quán)一一出海關(guān)立即趕往事先聯(lián)系好了的一個(gè)單位，在無(wú)菌實(shí)驗(yàn)室更換了培養(yǎng)液，再馬不停蹄地趕回北京首都機(jī)場(chǎng)，飛回長(zhǎng)春，開(kāi)始了單克隆抗體的研制。

單克隆抗體是1975年由瑞士科學(xué)家喬治·奎勒和英國(guó)科學(xué)家凱撒·米爾斯坦發(fā)明的。他們把可產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞進(jìn)行雜交，雜交出來(lái)的細(xì)胞兼具這兩個(gè)親代細(xì)胞的特點(diǎn)，既有B淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗體的功能，又有骨髓瘤無(wú)限生長(zhǎng)的能力，在細(xì)胞培養(yǎng)中能產(chǎn)生大量的單一類型的高純度抗體，故有單克隆抗體之名。單克隆抗體對(duì)疾病的診斷、預(yù)防和治療具有很大的作用。張權(quán)一從密爾斯丁那里得到的單抗被命名為“NS—1”小鼠骨髓瘤細(xì)胞株，把這個(gè)細(xì)胞株當(dāng)作母細(xì)胞與別的細(xì)胞通過(guò)特別的技術(shù)手段融合，便產(chǎn)生有針對(duì)特異目標(biāo)的單克隆抗體。他們決定先從診斷試劑做起，首先就遇到一個(gè)大難題，試驗(yàn)過(guò)程中需要一個(gè)必不可少的裝備就是二氧化碳孵箱，因?yàn)榧?xì)胞要在二氧化碳中繁殖。這個(gè)東西國(guó)內(nèi)沒(méi)有，要從國(guó)外進(jìn)口非常麻煩，要層層報(bào)批而且價(jià)格昂貴。長(zhǎng)春所拿不出錢來(lái)，逼得沒(méi)辦法了，只好土法上馬。張權(quán)一說(shuō)：“我找了一個(gè)密封較好的玻璃罐子，為了獲得二氧化碳環(huán)境，我在罐子里點(diǎn)了一根蠟燭，等蠟燭燃燒盡了，二氧化碳就產(chǎn)生了。”就用這個(gè)土孵箱，他們經(jīng)一年多的探索試驗(yàn)于1982年搞出了第一批單克隆抗體；1983年用乙肝表面抗原單克隆抗體研制出反向被動(dòng)血凝診斷試劑；1984年通過(guò)成果鑒定投入批量生產(chǎn)。這在當(dāng)時(shí)被認(rèn)為是一項(xiàng)重大科研成果。它的意義不在于搞出了一兩個(gè)診斷試劑產(chǎn)品，而在于開(kāi)啟了生物制品研究的一個(gè)新階段。張權(quán)一說(shuō)：“現(xiàn)在我們國(guó)家已經(jīng)到了啥程度，就是我們用的診斷試劑，過(guò)去都不是單克隆抗體的，現(xiàn)在幾乎都被這個(gè)取代了。它容易、簡(jiǎn)單、省錢。所以現(xiàn)在市面上好多診斷試劑都是單克隆抗體。所以我時(shí)常說(shuō)技術(shù)的進(jìn)步是最重要的，比產(chǎn)品更重要，產(chǎn)品多開(kāi)發(fā)一個(gè)又咋的？而開(kāi)發(fā)出一項(xiàng)技術(shù)就能帶動(dòng)一大片，用這個(gè)技術(shù)能做很多很多產(chǎn)品，很多很多事情。雜交瘤單克隆抗體就把原來(lái)的診斷試劑全部改變了。比如我們每個(gè)人都有一個(gè)血型，原來(lái)的試劑是抽健康人的血做的，全國(guó)用量很大，用了單克隆抗體就不用了，而且特別準(zhǔn)，這樣就節(jié)約了很多健康人的血。所以說(shuō)這個(gè)技術(shù)還是一個(gè)很有用的技術(shù)。”

在長(zhǎng)春所引進(jìn)NS—1細(xì)胞株進(jìn)行單抗研究時(shí)，武漢生研所從1981年開(kāi)始就承擔(dān)著國(guó)家“七五”“八五”以“抗人體T淋巴細(xì)胞及其亞群?jiǎn)慰乖噭┭芯俊睘橹鞯膰?guó)家重點(diǎn)攻關(guān)課題，在史良如教授的主持下成功研制成出“武”字頭的國(guó)產(chǎn)系列單抗，主要包括WuT1、WuT3、WuT4、WuT6、WuT8、WuT9、WuT1—1、WuTac等單抗。1988年3月通過(guò)了衛(wèi)生部組織的科研成果鑒定，評(píng)價(jià)為國(guó)內(nèi)領(lǐng)先，接近國(guó)際先進(jìn)水平。這是國(guó)內(nèi)自行研制的最為完善的一套單抗，這套診斷試劑投產(chǎn)后提高了我國(guó)對(duì)免疫性疾病的診斷水平和免疫學(xué)基礎(chǔ)研究的水平，用于評(píng)價(jià)機(jī)體免疫功能狀況。1990年，武漢所成立了“衛(wèi)生部單克隆中試實(shí)驗(yàn)室”，成為我國(guó)第一個(gè)治療用單克隆抗體國(guó)家二類新藥研制單位和最大的生產(chǎn)廠家。用WuT3單抗制作的治療用品于1999年6月獲新藥證書(shū)和生產(chǎn)文號(hào)，為國(guó)家Ⅱ類新藥，也是國(guó)內(nèi)第一個(gè)獲準(zhǔn)生產(chǎn)的治療用單抗產(chǎn)品。

第一批用世行貸款建成的工業(yè)化疫苗生產(chǎn)線

“中國(guó)生產(chǎn)的疫苗只能在中國(guó)銷售”，WHO官員曾經(jīng)說(shuō)過(guò)的這句話，成為中國(guó)生物人心中無(wú)法忘卻的痛。在改革開(kāi)放初，國(guó)際上有的疫苗絕大多數(shù)中國(guó)也有。特別是當(dāng)時(shí)WHO規(guī)定的兒童計(jì)劃免疫制品百白破、麻疹、脊灰這三種疫苗，我國(guó)甚至可以說(shuō)是世界領(lǐng)先的，經(jīng)受住了時(shí)間的考驗(yàn)，我國(guó)提前消除了小兒麻痹癥就是鐵證。疫苗接種的效果這么好，為什么WHO還不讓到世界上銷售呢？一句話：不符合GMP標(biāo)準(zhǔn)。

GMP標(biāo)準(zhǔn)即藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范，類似于法律上的程序法，但更加復(fù)雜。簡(jiǎn)單地說(shuō)，即既要規(guī)范結(jié)果也要規(guī)范過(guò)程。對(duì)疫苗生產(chǎn)，從毒株、培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)液、佐劑的選擇一直到整個(gè)生產(chǎn)過(guò)程的每一道工序都有非常嚴(yán)格的規(guī)定。一個(gè)地方不符合規(guī)定，就判你產(chǎn)品的“死刑”，一點(diǎn)沒(méi)商量。我國(guó)以往生產(chǎn)疫苗，非常重視結(jié)果，對(duì)產(chǎn)品的檢定是一絲不茍、不放過(guò)一點(diǎn)問(wèn)題的，但因?yàn)槲镔|(zhì)條件太差，硬件還沒(méi)法達(dá)到WHO的要求，不得不進(jìn)行手工作業(yè)，對(duì)生產(chǎn)過(guò)程的考核就不像產(chǎn)品的檢定那么嚴(yán)格。比如，動(dòng)物房就沒(méi)能做到無(wú)菌化，要用動(dòng)物時(shí)，就去挑選健康的動(dòng)物，這個(gè)搞法就不符合GMP標(biāo)準(zhǔn)。

改革開(kāi)放后，我們心中的這個(gè)痛，該想辦法解除了。

1980年，衛(wèi)生部提出在蘭州所、上海所各建百白破、破傷風(fēng)、麻疹3條工業(yè)化的生產(chǎn)線，在昆明所建一條脊灰生產(chǎn)線，一共7條。要建就要建世界一流的。衛(wèi)生部提出了3條標(biāo)準(zhǔn)：規(guī)模要達(dá)到大規(guī)模的工業(yè)化的生產(chǎn)水平；生產(chǎn)條件要完全符合歐共體的GMP標(biāo)準(zhǔn)（世界上最嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)）；制品質(zhì)量要達(dá)到或超過(guò)WHO的要求。要求這么高，錢從何來(lái)？怎么建設(shè)？衛(wèi)生部決定爭(zhēng)取世界銀行貸款，通過(guò)國(guó)際招標(biāo)，引進(jìn)世界上最先進(jìn)的生產(chǎn)線，采取“交鑰匙”的工程建設(shè)方式。所謂“交鑰匙”，就是由中標(biāo)公司按標(biāo)書(shū)要求獨(dú)立建成全部工程，驗(yàn)收合格后，把鑰匙交給招標(biāo)方，妥了。

但是夢(mèng)做得越美，要夢(mèng)想成真就越難。很多困難等在那里，我們還不知道。世行貸款不是你想貸就能貸到、想要多少就給多少的，它先要派人來(lái)考察，還要征求WHO的意見(jiàn)，看你究竟是不是需要？值不值得發(fā)放貸款？確認(rèn)后，它要跟你一起造預(yù)算，多一分也不會(huì)給你。世行貸款終于批下來(lái)了，接下來(lái)就是國(guó)際招標(biāo)。這是我國(guó)生物制品行業(yè)第一次申請(qǐng)世界銀行貸款，第一次進(jìn)行國(guó)際招標(biāo)。招標(biāo)文件怎么寫(xiě)誰(shuí)也不知道，便把相關(guān)人員集中到北京學(xué)習(xí)研究。上海所項(xiàng)目辦主任、研究員李亦德回憶說(shuō)：“那時(shí)4個(gè)人住一個(gè)房間，一住就是幾個(gè)月，研究怎么招標(biāo)。因用的是世行貸款，世行要管；生研所當(dāng)時(shí)由衛(wèi)生部領(lǐng)導(dǎo)，衛(wèi)生部當(dāng)然也要管，專門成立一個(gè)項(xiàng)目辦。學(xué)習(xí)、研究、溝通，花了很長(zhǎng)時(shí)間，費(fèi)了很大的勁，才起草完標(biāo)書(shū)。”直到1985年5月31日，衛(wèi)生部向世界發(fā)出公告，對(duì)疫苗生產(chǎn)引進(jìn)項(xiàng)目進(jìn)行國(guó)際招標(biāo)。于是，世界上有意投標(biāo)的名牌疫苗生產(chǎn)企業(yè)和設(shè)備制造商紛至沓來(lái)，其中有法國(guó)的梅里厄，美國(guó)的史克，還有澳大利亞、日本、加拿大、荷蘭、丹麥等國(guó)家的大廠商。

看起來(lái)熱熱鬧鬧，可結(jié)果呢？流標(biāo)了！原因是他們的開(kāi)價(jià)太高，而我們的投資有限，兩者差距太大。一家一家分開(kāi)談，馬拉松式地談了4年，還是一家也沒(méi)有談成。檢討流標(biāo)的原因，是我們的心太大了，想用這點(diǎn)錢要人家建“交鑰匙”工程，有點(diǎn)像掏買豆腐的錢割肉，不現(xiàn)實(shí)。因此決定退一步，把“交鑰匙”工程變成“半交鑰匙”工程。“半交鑰匙”，項(xiàng)目仍然由中標(biāo)公司負(fù)責(zé)，但中方派人一起工作，這最起碼讓對(duì)方省下了一大筆勞務(wù)費(fèi)。這樣又按“半交鑰匙”的要求進(jìn)行第二次招標(biāo)。這一次，投標(biāo)的公司也很踴躍，最后荷蘭的DHV工程公司和他的兩個(gè)合作伙伴聯(lián)合中標(biāo)。DHV工程公司也是世界上比較著名的大公司，它的兩個(gè)合作伙伴，一個(gè)是RIVM（荷蘭國(guó)立衛(wèi)生環(huán)境保護(hù)研究所），一個(gè)是APPLIKON（一家做大型設(shè)備的公司）。1990年1月，雙方簽訂了項(xiàng)目合同。上海所項(xiàng)目辦主任李亦德說(shuō)：“大家都沒(méi)有想到從發(fā)布招標(biāo)公告到最后正式簽訂合同，竟花了5年多的時(shí)間。”這也許就是鄧小平同志所說(shuō)的“摸著石頭過(guò)河”吧。

在這個(gè)馬拉松式的談判期間，上海所的另一個(gè)血液制劑生產(chǎn)線引進(jìn)項(xiàng)目卻后來(lái)居上，建成投產(chǎn)了。上海所原所長(zhǎng)、研究員貢文耀說(shuō)：“血液項(xiàng)目1984年啟動(dòng)（上述疫苗生產(chǎn)線項(xiàng)目啟動(dòng)于1980年），1985年報(bào)批，1986年就與日本臟器制藥株式會(huì)社簽訂了合同，1988年5月開(kāi)工建設(shè)，1990年11月建成，設(shè)計(jì)年投料30萬(wàn)升血漿，成為當(dāng)時(shí)亞洲規(guī)模最大的血液制劑生產(chǎn)線。”

這兩個(gè)項(xiàng)目固然技術(shù)復(fù)雜程度不一樣，但造成建設(shè)速度差距甚大的原因，最主要的是：血液生產(chǎn)線是日本臟器制藥株式會(huì)社的小西社長(zhǎng)主動(dòng)向衛(wèi)生部錢信忠部長(zhǎng)提出來(lái)的，“我愿意提供資金、提供技術(shù)”。小西是中日友好人士，又只是雙方打交道，資金、技術(shù)都是他們給，故進(jìn)展順利。而疫苗項(xiàng)目用的是世行貸款，又是3個(gè)生研所捆綁在一起引進(jìn)7條生產(chǎn)線，“婆婆”太多，上下、左右、中外之間的協(xié)調(diào)相當(dāng)復(fù)雜，耗費(fèi)了不少時(shí)間。

下面我們先撇開(kāi)蘭州所和昆明所不談，專講上海所的疫苗生產(chǎn)線。兩年后的1992年，DHV公司交出了它的設(shè)計(jì)施工圖，完全是按照歐共體的GMP要求設(shè)計(jì)的。上海所的人看了，一下眼界大開(kāi)，發(fā)出了“確實(shí)先進(jìn)”的贊嘆。你看：生活區(qū)和生產(chǎn)區(qū)是嚴(yán)格分開(kāi)的。生產(chǎn)區(qū)的廠房是一個(gè)完整的獨(dú)立體。在一棟廠房里，囊括了原材料儲(chǔ)存、培養(yǎng)基配制、清洗滅菌、半成品生產(chǎn)、精制檢定、分包裝、自控以及成品的儲(chǔ)存等全部工序。在工作區(qū)，人流和物流是嚴(yán)格分開(kāi)的，有毒的和沒(méi)毒的部分也是嚴(yán)格分開(kāi)的。工作室根據(jù)不同的凈化級(jí)別來(lái)設(shè)計(jì)，還有強(qiáng)大的服務(wù)設(shè)施以保證生產(chǎn)區(qū)的恒溫、恒濕，以保證各種生產(chǎn)用的液、氣體如蒸汽、蒸餾水、純水、氧氣、氮?dú)猓鹊鹊募皶r(shí)供給。這與我們過(guò)去分散的手工作業(yè)情況相比，形同霄壤。在設(shè)計(jì)圖上，每個(gè)工作間都安裝一部電話。有人疑惑了，“我們又不是賓館，一個(gè)房間裝一部電話有啥用？”對(duì)方解釋說(shuō)，這是按GMP要求設(shè)計(jì)的，因?yàn)楦鱾€(gè)工作間的凈化標(biāo)準(zhǔn)不同，人員是不能互相竄動(dòng)的，更是不允許外人進(jìn)入的，必須靠電話溝通。哦！原來(lái)是自己的觀念落伍了，沒(méi)有進(jìn)入GMP思維。

面對(duì)設(shè)計(jì)圖紙，上海所的相關(guān)人員反復(fù)理解、認(rèn)真消化，徒弟發(fā)現(xiàn)師傅的設(shè)計(jì)也不是沒(méi)有問(wèn)題。比如，廠房基建先要打樁。按他們的設(shè)計(jì)要打843根樁，是根據(jù)本國(guó)的地質(zhì)結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)的。荷蘭是一個(gè)填海國(guó)家，地基松軟，打這么多樁是必須的。上海雖然也是軟土地結(jié)構(gòu)，但是經(jīng)長(zhǎng)江千萬(wàn)年淤積形成的，與荷蘭人工填海的情況不同。上海建筑界素有“老八噸”之說(shuō)，即每平方米的承載能力為8噸。建寶鋼時(shí)，“老八噸”也是一個(gè)依據(jù)。在請(qǐng)教同濟(jì)大學(xué)的專家和一些建筑單位的工程師后，上海所正式與荷蘭承包商進(jìn)行交涉，因有科學(xué)數(shù)據(jù)，他們也同意減少打樁，最后一共減少了282根。當(dāng)時(shí)打一根樁的價(jià)格是1萬(wàn)多元，僅此一項(xiàng)為國(guó)家節(jié)約資金300多萬(wàn)元。再如純水系統(tǒng)，生產(chǎn)疫苗用的是蒸餾水而不是純水，另搞一套純水系統(tǒng)沒(méi)有必要，這一點(diǎn)承包商也認(rèn)可了。此外，荷方的設(shè)計(jì)有的地方管道打架，有的地方布局不合理，中國(guó)工程技術(shù)人員一一指出，一共寫(xiě)了350份修改通知，全部被對(duì)方接受，并與中方一起修改了設(shè)計(jì)圖紙。

在廠房建設(shè)上，雙方的溝通還算順暢，而在生產(chǎn)工藝上，遇到的問(wèn)題頗讓人感到意外。照理說(shuō)，DHV公司和他的兩個(gè)合作伙伴在世界上是先進(jìn)的，他們應(yīng)該按合同要求給我們提供完整的生產(chǎn)工藝。但我們要建的是大規(guī)模生產(chǎn)線，而他們因?yàn)閲?guó)家小，不需要那么多疫苗，故只有小規(guī)模生產(chǎn)的工藝和經(jīng)驗(yàn)，要把小規(guī)模變成大規(guī)模，需要重新開(kāi)發(fā)。按設(shè)計(jì)，百白破疫苗要在1200升的發(fā)酵罐里進(jìn)行培養(yǎng)。這么一個(gè)大家伙，他們沒(méi)有駕馭過(guò)。看了他們的開(kāi)發(fā)計(jì)劃，上海所覺(jué)得這不僅很耗時(shí)、耗工、耗錢，而且他們也不一定能開(kāi)發(fā)成功。怎么辦？相關(guān)專家集體討論后認(rèn)為，我國(guó)有大規(guī)模生產(chǎn)疫苗的經(jīng)驗(yàn)，只是設(shè)備落后，可以利用荷蘭提供的設(shè)備自己開(kāi)發(fā)工藝。荷方因在開(kāi)發(fā)中接連受挫，只好同意中方的意見(jiàn)。這樣，上海所和蘭州所兩家技術(shù)人員聯(lián)合攻關(guān)，成功開(kāi)發(fā)出大規(guī)模生產(chǎn)的整套工藝。這不僅為國(guó)家節(jié)約了大筆資金，更主要的是長(zhǎng)了中國(guó)技術(shù)人員的志氣。

麻疹疫苗的大規(guī)模生產(chǎn)工藝的開(kāi)發(fā)，遇到的問(wèn)題比百白破更大。按合同規(guī)定，承包商1994年底應(yīng)提供麻疹疫苗的生產(chǎn)工藝，但直到1996年他們的開(kāi)發(fā)還沒(méi)有起色。他們?cè)O(shè)計(jì)的技術(shù)路線是很先進(jìn)的，用雞胚細(xì)胞為載體培養(yǎng)病毒，當(dāng)時(shí)世界上還沒(méi)有第二家這么干。在荷蘭，他們的小規(guī)模試驗(yàn)非常成功，可要變成大規(guī)模生產(chǎn)就抓瞎了。根據(jù)合同，他們違約了，經(jīng)過(guò)談判，承包商賠償了中方20萬(wàn)荷蘭盾（當(dāng)時(shí)尚無(wú)歐元），另外再免費(fèi)提供轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)工藝及所需設(shè)備作為賠償?shù)囊徊糠帧Ｋ麄兏悴怀鰜?lái)，那就自己來(lái)。中國(guó)技術(shù)人員用他們提供的新設(shè)施，成功開(kāi)發(fā)出麻疹疫苗大規(guī)模生產(chǎn)的工藝，試制出3批合格的疫苗，這讓荷蘭人也不得不佩服。

設(shè)備的采購(gòu)是引進(jìn)項(xiàng)目中的一個(gè)大頭。世行貸款有一條規(guī)定，采購(gòu)必須全球招標(biāo)。那么多的設(shè)備，沒(méi)有一家廠商能獨(dú)立提供。一件一件都要寫(xiě)出標(biāo)書(shū)并經(jīng)世行審查，取得一致意見(jiàn)后才能發(fā)標(biāo)。外商投標(biāo)后，然后是開(kāi)標(biāo)、評(píng)標(biāo)、定標(biāo)，定標(biāo)之后再和中標(biāo)廠商談判。這是一個(gè)很復(fù)雜、很熬人的過(guò)程，一個(gè)項(xiàng)目至少要談3—4個(gè)月，多的要談半年以上。上海所一共采購(gòu)了83類大型設(shè)備，包括大型發(fā)酵罐、大型過(guò)濾器、大型離心機(jī)、凍干機(jī)、自動(dòng)化分裝機(jī)、包裝機(jī)，等等，還有很多做驗(yàn)證和檢定用的精密儀器，光設(shè)備采購(gòu)就花了1.73億元人民幣。這在當(dāng)時(shí)是一個(gè)很大的數(shù)字。做這項(xiàng)工作的人從來(lái)沒(méi)有星期天。你過(guò)春節(jié)，外國(guó)人不過(guò)春節(jié)，他春節(jié)來(lái)了，你就得跟他談。談判都是在北京進(jìn)行，去北京沒(méi)錢坐飛機(jī)，只能坐火車，那時(shí)一票難求，能買到硬座就不錯(cuò)了，偶爾坐一次臥鋪，就謝天謝地了。李亦德回憶說(shuō)：

在這個(gè)項(xiàng)目建設(shè)當(dāng)中，我母親不小心從樓梯上摔下來(lái)了，頸枕骨折，非常危險(xiǎn)，馬上就開(kāi)病危通知。就在這個(gè)時(shí)候，在北京跟外國(guó)人要有一次談判。因?yàn)檫@個(gè)情況只有我比較熟悉，這就讓我兩難了：我到底是留下來(lái)陪母親，還是去北京參加談判？我思想斗爭(zhēng)很厲害。后來(lái)我想到，我媽媽如果知道了，她會(huì)贊成我去北京談判的。我離開(kāi)了病危的媽媽，到北京去了。到北京不久，我母親就過(guò)世了。這讓我心里非常難過(guò)，現(xiàn)在想起來(lái)我也覺(jué)得對(duì)不起我媽媽，很內(nèi)疚。

再先進(jìn)的設(shè)備也是要由人來(lái)掌握的，沒(méi)有合格的人才，先進(jìn)設(shè)備也只是一種擺設(shè)。上海所采取了邊建設(shè)邊培訓(xùn)人才的辦法，先后派遣60多人去荷蘭學(xué)習(xí)，同時(shí)請(qǐng)荷蘭人當(dāng)老師在所內(nèi)進(jìn)行培訓(xùn)。這樣，工廠建成之日，也是人才顯能之時(shí)，做到了建成即投產(chǎn)。1999年9月，這個(gè)項(xiàng)目通過(guò)了國(guó)家藥品監(jiān)督局的GMP認(rèn)證。

蘭州所的生產(chǎn)線也與上海所一樣通過(guò)驗(yàn)收。原所長(zhǎng)、研究員殷綏亞說(shuō)：“合同到1990年正式簽訂，歷時(shí)8年多才建成，這個(gè)項(xiàng)目確實(shí)進(jìn)行得很艱苦很艱苦，能夠搞成是很不容易的。”

這個(gè)項(xiàng)目，是我國(guó)第一批運(yùn)用世行貸款通過(guò)國(guó)際合作，建成的大規(guī)模工業(yè)化疫苗生產(chǎn)線，前后歷時(shí)八年多。建設(shè)周期拖這么長(zhǎng)，有種種經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以總結(jié)，但無(wú)論是經(jīng)驗(yàn)還是教訓(xùn)，都是一筆非常寶貴的財(cái)富。這個(gè)項(xiàng)目的意義遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了這7條先進(jìn)的生產(chǎn)線，最大的意義是觀念上的突破。

投石沖破井底天。曾幾何時(shí)，我國(guó)生物制品的研制不能說(shuō)沒(méi)有放眼世界，但一般都是自己和自己比，今年比去年增長(zhǎng)了多少，甲比乙超過(guò)了多少，比來(lái)比去，還是在同層次上爭(zhēng)高低，在一個(gè)“檔”上比速度。這個(gè)項(xiàng)目的引進(jìn)讓大家眼前一亮，啊！原來(lái)世界上還有這么先進(jìn)的東西，尤其是在思想觀念、管理理念上產(chǎn)生了一個(gè)大的飛躍。什么叫GMP？這就是GMP。GMP中有一項(xiàng)叫驗(yàn)證，過(guò)去我們就沒(méi)搞過(guò)，也沒(méi)有這個(gè)概念。啥叫驗(yàn)證？簡(jiǎn)言之，就是你認(rèn)為你用的生產(chǎn)原料及操作方法合格了，那還不行，得由另一個(gè)人驗(yàn)證合格了才算數(shù)。驗(yàn)證要求是全方位的，對(duì)每一種生產(chǎn)原料，對(duì)生產(chǎn)中的每一環(huán)節(jié)，都要進(jìn)行驗(yàn)證，貫穿于生產(chǎn)全過(guò)程。僅從工藝驗(yàn)證來(lái)說(shuō)，因生物制品來(lái)源于細(xì)胞基質(zhì)，制備工藝復(fù)雜，具備結(jié)構(gòu)表征不完全等特點(diǎn)，所以對(duì)細(xì)胞基質(zhì)、發(fā)酵、純化過(guò)程、病毒安全性、層析介質(zhì)壽命與一次性反應(yīng)性耗材以及中間穩(wěn)定性等，都必須進(jìn)行驗(yàn)證。比如用于生產(chǎn)的毒種，過(guò)去我們從冷庫(kù)里取出來(lái)，自己檢定合格了就可以用，按GMP要求就不行，必須通過(guò)他人驗(yàn)證，證明它是合格的才可以用；生產(chǎn)用的動(dòng)物，必須驗(yàn)證合格才可以用；生產(chǎn)用的蒸餾水應(yīng)該是沒(méi)問(wèn)題的，用就是了，不行！也得要驗(yàn)證。這是否太煩瑣、太折騰人了啊！但就是這種煩瑣的程序，保證了疫苗的質(zhì)量。GMP標(biāo)準(zhǔn)逼著我們老老實(shí)實(shí)地檢查在全面質(zhì)量管理上的差距。甫得道，即行可矣。我國(guó)生物制品的GMP建設(shè)，就是從這個(gè)項(xiàng)目引進(jìn)之后才產(chǎn)生質(zhì)的飛躍的。不止在上海所、蘭州所，整個(gè)生物制品的“國(guó)家隊(duì)”都全面推行了GMP標(biāo)準(zhǔn)。

有句俗話，叫是騾子是馬，拉出來(lái)遛遛。千里馬是在廣闊天地中遛出來(lái)的。世行項(xiàng)目只是讓中國(guó)生物人在世界上小遛了一下，遛出了國(guó)際合作的初步經(jīng)驗(yàn)，遛出了參加“國(guó)際競(jìng)賽”的信心。由于“文革”的耽誤，我國(guó)的生物制品從總體上說(shuō)是落后了，于是在一些人中產(chǎn)生了一種事事不如人的悲觀情緒，談起外國(guó)的先進(jìn)來(lái)眉飛色舞，說(shuō)起中國(guó)的落后來(lái)一聲嘆息，甚至得出了“沒(méi)法比”的結(jié)論，誰(shuí)要說(shuō)點(diǎn)有志氣的話，就被斥之為講大話。在這個(gè)項(xiàng)目的建設(shè)中，大家發(fā)現(xiàn)被我們仰視的洋人也并非無(wú)所不能的神明，你等著他的生產(chǎn)工藝，他卻拖了兩年也沒(méi)有搞出來(lái)，這未免讓很多人驚詫不已。本來(lái)以為引進(jìn)設(shè)備和工藝，就像買一部進(jìn)口汽車一樣，拿來(lái)就能開(kāi)，結(jié)果卻不是這樣。上海所的百白破、麻疹疫苗的大規(guī)模生產(chǎn)工藝最后是自己搞出來(lái)的。這說(shuō)明，一方面我們需要謙虛，要甘當(dāng)小學(xué)生；另一方面，我們絕不可妄自菲薄，把自己看扁了。趕超世界先進(jìn)水平，我們也有我們的優(yōu)勢(shì)，必須走一條有中國(guó)特色的生物制品發(fā)展之路。

此外，這個(gè)項(xiàng)目也讓我們積累了對(duì)外交往的經(jīng)驗(yàn)，如何談判？如何采購(gòu)？如何招標(biāo)？如何聯(lián)合培養(yǎng)人才？與洋人打交道如何做到不卑不亢？這些都初步摸出了一點(diǎn)門道。后續(xù)我國(guó)引進(jìn)了數(shù)十條生產(chǎn)線，因?yàn)橛辛诉@次的經(jīng)驗(yàn)進(jìn)展都比較順利。

第一個(gè)中外合辦的培訓(xùn)中心

“山不在高，有仙則名，水不在深，有龍則靈。”丹麥國(guó)家不大，但在生物制品上卻居于世界領(lǐng)先行列。比如，生物制品上很重要的一個(gè)東西叫標(biāo)準(zhǔn)品，是同類制品的參照系。世衛(wèi)組織有專門給各國(guó)發(fā)放標(biāo)準(zhǔn)品的機(jī)構(gòu)，一個(gè)在英國(guó)，一個(gè)在丹麥。英國(guó)和丹麥可以說(shuō)是世衛(wèi)組織指導(dǎo)生物制品研制的兩個(gè)中心。丹麥的國(guó)立血清研究所至今已有一百四五十年的歷史，不僅為世衛(wèi)組織發(fā)放標(biāo)準(zhǔn)品，而且還做培訓(xùn)人才的工作。我國(guó)老一代的微生物學(xué)和疫苗專家陳廷祚等就是20世紀(jì)40年代去那里留學(xué)的。在生物制品行業(yè)，留學(xué)丹麥的這塊牌子是很硬的。改革開(kāi)放后，我國(guó)加強(qiáng)了對(duì)外交流，在生物制品行業(yè)，丹麥?zhǔn)俏覈?guó)專家首訪的國(guó)家之一，丹麥國(guó)立血清研究所是第一個(gè)接收中國(guó)留學(xué)生的研究機(jī)構(gòu)。第一個(gè)留學(xué)生是去學(xué)單克隆抗體技術(shù)的。1979年，時(shí)任衛(wèi)生部部長(zhǎng)錢信忠?guī)ьI(lǐng)中國(guó)衛(wèi)生代表團(tuán)訪問(wèn)丹麥，丹麥國(guó)立血清研究所是重點(diǎn)考察對(duì)象。代表團(tuán)成員、上海所原科學(xué)技術(shù)咨詢委員會(huì)主任向建之說(shuō)：“我們到那里一看，發(fā)現(xiàn)他們與我國(guó)的生研所在功能上、技術(shù)人員的構(gòu)成上差不多，但是他們的儀器設(shè)備和管理理念非常先進(jìn)，很值得我們學(xué)習(xí)。”從此后，我國(guó)與這個(gè)研究所的交往越來(lái)越多，他們也派人到中國(guó)回訪。衛(wèi)生部原部長(zhǎng)錢信忠與丹麥血清研究所所長(zhǎng)西姆（Sim）博士建立了良好的關(guān)系。1982年12月，由他們兩位倡議，促成中丹兩國(guó)政府簽訂了一個(gè)合作協(xié)議，決定在中國(guó)建立中國(guó)—丹麥醫(yī)學(xué)生物學(xué)進(jìn)修生培訓(xùn)中心。

開(kāi)始時(shí)，培訓(xùn)中心沒(méi)有建房子，借在北京天壇的中檢所的房舍和設(shè)施來(lái)辦班。從1983年8月起，中檢所與丹麥方面先后共同舉辦了5期培訓(xùn)班，其中2期為免疫學(xué)培訓(xùn)班，每期20人，為期27天；2期抗微生物化學(xué)治療培訓(xùn)班，每期30人，為期27天；還有1期是病毒檢測(cè)新方法培訓(xùn)班。由于全國(guó)要求來(lái)上學(xué)習(xí)班的人很多，而中檢所地方狹窄，沒(méi)法征地?cái)U(kuò)建，衛(wèi)生部決定將中丹醫(yī)學(xué)生物學(xué)進(jìn)修生培訓(xùn)中心改由北京所來(lái)負(fù)責(zé)，在北京所新建培訓(xùn)中心。1984年，經(jīng)國(guó)務(wù)院批準(zhǔn)，培訓(xùn)中心正式落戶北京所。8月20日舉行了隆重的奠基典禮，時(shí)任衛(wèi)生部部長(zhǎng)崔月犁、丹麥內(nèi)政大臣布列塔·霍爾貝亞女士、北京市副市長(zhǎng)張百發(fā)等出席，并為培訓(xùn)中心開(kāi)工建設(shè)奠基。中國(guó)工程院院士趙鎧回憶說(shuō)：“中丹培訓(xùn)中心由雙方共建。怎么共建呢？房屋基建由中國(guó)負(fù)責(zé)，室內(nèi)所有的設(shè)備包括門、窗，辦公室的桌、椅，都是從丹麥運(yùn)來(lái)的，丹麥的木料好。當(dāng)時(shí)還在院子外面種了一棵象征中丹友誼的松樹(shù)。”培訓(xùn)中心建筑面積4430㎡，建有教學(xué)樓和宿舍樓。教學(xué)樓中設(shè)有報(bào)告廳、各種實(shí)驗(yàn)室、儀器室等，所有教學(xué)、試驗(yàn)設(shè)備全部由丹麥政府無(wú)償提供。這些設(shè)備在當(dāng)時(shí)世界上是相當(dāng)先進(jìn)的，許多設(shè)備是我國(guó)沒(méi)有的。1985年11月11日中丹醫(yī)學(xué)生物學(xué)進(jìn)修生培訓(xùn)中心建成，衛(wèi)生部部長(zhǎng)崔月犁、丹麥駐華大使何高澤、北京市副市長(zhǎng)白介夫以及專程趕來(lái)的丹麥國(guó)立血清研究所所長(zhǎng)西姆博士等參加了落成典禮。

培訓(xùn)班的班主任由丹麥專家擔(dān)任，中方配一名副主任負(fù)責(zé)行政管理，另外由中方配一批助教和實(shí)驗(yàn)輔導(dǎo)員。

授課老師基本都來(lái)自丹麥，有時(shí)丹麥還聘請(qǐng)其他國(guó)家有關(guān)專家來(lái)講課。培訓(xùn)班每期三個(gè)來(lái)月，有時(shí)同時(shí)舉辦幾個(gè)班，每個(gè)班學(xué)員50人左右。從第一期腸道感染診斷班開(kāi)始，在20多年的時(shí)間里，共辦了近400期各種培訓(xùn)班，涉及免疫學(xué)、微生物學(xué)、分子生物學(xué)、單克隆抗體技術(shù)、酶標(biāo)技術(shù)、生物制品的研發(fā)與質(zhì)控、流行病學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域，先后來(lái)講課的專家近千人。

因?yàn)楫?dāng)時(shí)出國(guó)留學(xué)的名額受到限制，很多不能出國(guó)的人都希望來(lái)中丹接受培訓(xùn)，等于“半留學(xué)”。參加學(xué)習(xí)的學(xué)員大大超出了六大生研所的范圍，包括各級(jí)疾病控制中心、各大醫(yī)院還有許多大專院校的老師。他們?cè)谶@里學(xué)到了當(dāng)時(shí)世界上最先進(jìn)的醫(yī)學(xué)生物學(xué)理念和先進(jìn)的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，還有一個(gè)副產(chǎn)品就是英語(yǔ)的聽(tīng)力和溝通能力大大加強(qiáng)了。因此，他們把中丹培訓(xùn)中心稱之為生物制品行業(yè)的“黃埔軍校”。在這里參加培訓(xùn)的時(shí)間雖然只有三個(gè)來(lái)月，但很多人都把這段歷史填寫(xiě)在自己的履歷表中。

中丹培訓(xùn)中心開(kāi)了一個(gè)中外聯(lián)合在中國(guó)培養(yǎng)人才的好頭，在不可能把所有的人都派往國(guó)外學(xué)習(xí)的情況下，這不失為一個(gè)人才培養(yǎng)的好模式。繼中丹之后，各生研所開(kāi)始常態(tài)化地舉辦中外合作的短訓(xùn)班，請(qǐng)一個(gè)幾個(gè)專家過(guò)來(lái)辦一個(gè)短訓(xùn)班，長(zhǎng)的十來(lái)天，短的三五天，一次就可以培訓(xùn)數(shù)十上百人。參加一次學(xué)習(xí)班，就可以了解一項(xiàng)新技術(shù)，就可以開(kāi)闊眼界打開(kāi)思路。學(xué)習(xí)班往往都會(huì)就某一個(gè)前沿問(wèn)題，與外國(guó)專家展開(kāi)探討，對(duì)生物制品的研發(fā)和生產(chǎn)起到了不可低估的作用。科學(xué)上的新事物、新技術(shù)層出不窮，這種中外合辦的短訓(xùn)班是棵常青樹(shù)。

第二十節(jié) 全球最好的乙腦疫苗在中國(guó)

一看本章的標(biāo)題，有人也許會(huì)下意思地產(chǎn)生疑問(wèn)：“有根據(jù)嗎？不是吹牛吧？”負(fù)責(zé)任地告訴你，根據(jù)有兩個(gè)：一，世界上第一個(gè)也是唯一通過(guò)WHO預(yù)認(rèn)證的乙腦疫苗是中國(guó)的地鼠腎乙腦活疫苗；二，世界上第一個(gè)非洲綠猴腎細(xì)胞（VERO）純化乙腦滅活疫苗誕生在中國(guó)。

一個(gè)疫苗要想讓世界兒童基金會(huì)采購(gòu)，必須拿到世衛(wèi)組織的預(yù)認(rèn)證，這是一道非跨過(guò)去不可的“鐵門檻”。目前，全球乙腦疫苗通過(guò)預(yù)認(rèn)證、被世界兒童基金會(huì)列入采購(gòu)名單的唯有中國(guó)的地鼠腎乙腦活疫苗，外銷已超過(guò)內(nèi)銷，占總產(chǎn)量的60%。此外，我國(guó)在世界上第一個(gè)研制成功的VERO細(xì)胞純化乙腦滅活疫苗，在疫苗研制史上有重要意義。同時(shí)因其為純化滅活疫苗，讓接種者可根據(jù)自身情況選擇接種，特別是對(duì)不適合接種活疫苗的人是一個(gè)福音。

我國(guó)的乙腦疫苗研制走了一條曲折的道路，從仿制國(guó)外的鼠腦乙腦死疫苗開(kāi)始，兩代疫苗科學(xué)家和工程師接力攻堅(jiān)克難，終使我國(guó)成為世界乙腦疫苗強(qiáng)國(guó)。

原北京生物制品所是我國(guó)腦炎研究的重鎮(zhèn)。據(jù)原腦炎室主任、研究員丁志芬說(shuō)：“這個(gè)研究室是1950年周恩來(lái)總理提議成立的。”周總理親自提議成立一個(gè)研究室，足可以說(shuō)明腦炎的危害之大，疫苗的需要之迫切。腦炎一般就是指乙型腦炎，而流腦是指流行性腦脊髓膜炎，簡(jiǎn)稱腦膜炎，與乙腦完全不是一碼事。流腦是由細(xì)菌引起的，而乙腦是由病毒引起的。

乙腦又稱日本腦炎，其死亡率雖比流腦稍遜一籌，卻更大比例地“制造”殘疾人。乙腦患者絕大多數(shù)為10歲以下兒童，約有30%的病人會(huì)留下癡呆、半身不遂、智力障礙等神經(jīng)性后遺癥。在20世紀(jì)50年代，我國(guó)的乙腦年發(fā)病率為20/10萬(wàn)，全國(guó)累計(jì)起來(lái)這個(gè)數(shù)字突破10萬(wàn)，10年加起來(lái)是多少？難怪周總理要親自關(guān)心了。

乙腦是一種人畜共患病，主要自然宿主是人、豬、馬，在我國(guó)，一般傳播媒介是三帶喙庫(kù)蚊，傳播途徑為蚊—豬（馬）—蚊—人。乙腦讓人受不了，讓豬也受不了，得了乙腦的懷孕母豬會(huì)流產(chǎn)，公豬會(huì)得睪丸炎。為不負(fù)周總理的重托，我國(guó)的兩代免疫學(xué)家和疫苗專家進(jìn)行了艱苦的探索，先后制造出4代乙腦疫苗，終于控制了乙腦在我國(guó)流行，并為世界消滅乙腦做出了貢獻(xiàn)。乙腦地鼠腎減毒活疫苗是我國(guó)第一個(gè)也是全球唯一通過(guò)世衛(wèi)組織預(yù)認(rèn)證的疫苗，被列入世界兒童基金會(huì)采購(gòu)清單，出口到十多個(gè)國(guó)家。新型的乙腦非洲綠猴腎（VERO）傳代細(xì)胞滅活疫苗也已加入乙腦免疫的行列，滿足不同接種對(duì)象的需要。

一波三折的乙腦疫苗研制之路

研制疫苗前提是要有毒種。20世紀(jì)50年代初，我國(guó)只有一個(gè)乙腦毒種，叫P3株，是當(dāng)時(shí)的衛(wèi)生研究院教授黃禎祥于1949年在北京分離出來(lái)的。那時(shí)，生產(chǎn)乙腦疫苗普遍采用的是Sabin（賽賓）1945年的方法。北京所王用楫參考Sabin法，將P3株的第64代毒種注射到小鼠腦中，待小鼠感染后取出鼠腦，用甲醛消毒滅活，制成鼠腦滅活疫苗。在北京接種了20萬(wàn)人，證明確有預(yù)防乙腦發(fā)病的作用。據(jù)在東北運(yùn)用后的效果調(diào)查：鞍山市使用鼠腦疫苗后發(fā)病率為13.67/10萬(wàn)，而未注射疫苗的發(fā)病率為59.27/10萬(wàn)，后者是前者的4.3倍；沈陽(yáng)比鞍山的效果更好，免疫者發(fā)病率為2/10萬(wàn)，未免疫者發(fā)病率為26.3/10萬(wàn)，后者是前者的13.15倍。應(yīng)該說(shuō)免疫效果還是可以的，但因?yàn)檫@種疫苗中含有比較多的異體蛋白，注射后引起包括變態(tài)反應(yīng)在內(nèi)的不良后果，不得不停止生產(chǎn)。

鼠腦滅活疫苗失敗后，北京所和上海所又研制出雞胚滅活疫苗，但試驗(yàn)證明，雞胚疫苗的免疫效果還不如鼠腦疫苗，也被“叫停”。

1954年全面學(xué)習(xí)蘇聯(lián)，乙腦疫苗生產(chǎn)也照搬蘇聯(lián)。但蘇聯(lián)用的其實(shí)也是Sabin的方法，只不過(guò)用的是幼齡鼠罷了，同樣不能解決疫苗中殘存鼠腦組織的問(wèn)題。蘇式疫苗1956—1957年在華北地區(qū)使用后，發(fā)生了數(shù)十例異常反應(yīng)，包括變態(tài)反應(yīng)性腦脊髓炎，嚴(yán)重者或殘疾或死亡。那個(gè)時(shí)候，“蘇聯(lián)老大哥”被某些人奉若神明，蘇式疫苗怎么會(huì)有問(wèn)題？于是一時(shí)謠言四起，說(shuō)什么的都有。北京所的王用楫、盧錦漢等通過(guò)精心調(diào)查檢定，證明不良反應(yīng)就是由殘存鼠腦組織引起的。蘇聯(lián)方法的神話被打破了！為去除疫苗中殘存的鼠腦組織，各生研所先后采取了增加過(guò)濾次數(shù)、離心沉淀、乙醚處理等工藝，結(jié)果去掉了疫苗中的雜質(zhì)，但疫苗的免疫原性卻降低了。武漢所參考日本的生產(chǎn)工藝，用魚(yú)精蛋白和差速離心的辦法對(duì)鼠腦疫苗進(jìn)行精制，雖然效果不錯(cuò)但工藝相當(dāng)煩瑣困難，在實(shí)驗(yàn)室做出來(lái)可以，在生產(chǎn)中卻沒(méi)法推廣。這樣，鼠腦疫苗就走進(jìn)了“死胡同”，加上雞胚疫苗的研制失敗，我國(guó)面臨著無(wú)乙腦疫苗可用的尷尬狀態(tài)。

20世紀(jì)50年代末到60年代初，世界上已開(kāi)始用細(xì)胞組織研制和生產(chǎn)疫苗，我國(guó)唯有拋棄蘇聯(lián)的方法，一步跨入組織培養(yǎng)這一先進(jìn)的疫苗生產(chǎn)工藝，才能打通乙腦疫苗的“死胡同”。

帶應(yīng)急性質(zhì)的地鼠腎乙腦滅活疫苗

所謂組織培養(yǎng)，就是用細(xì)胞組織來(lái)培育病毒，制作疫苗。由于地鼠腎細(xì)胞對(duì)病毒比較敏感，所以不少疫苗都用它做培養(yǎng)基。我國(guó)最早用地鼠腎細(xì)胞研究乙腦疫苗的人，是中檢所的李河民和俞永新。李河民是來(lái)自寶島臺(tái)灣的病毒學(xué)家，原名蔡川燕，畢業(yè)于日本東京醫(yī)學(xué)專門學(xué)校。因受魯迅先生思想影響，抗戰(zhàn)時(shí)期幾經(jīng)輾轉(zhuǎn)來(lái)到北平，改名為李河民，1946年參加解放軍，成為一名軍醫(yī)，在極其艱難的情況下制作出牛痘苗、破傷風(fēng)類毒素和抗毒素。新中國(guó)成立后曾任衛(wèi)生部防疫總隊(duì)大隊(duì)長(zhǎng)，1951年赴蘇留學(xué)，獲醫(yī)學(xué)副博士（碩士）學(xué)位，1955年歸國(guó)后到中檢所工作。俞永新1953年畢業(yè)于福建協(xié)和大學(xué)（福建師大前身），是我國(guó)自己培養(yǎng)的病毒學(xué)和疫苗專家，后來(lái)成為中國(guó)工程院院士。且說(shuō)當(dāng)年，他倆從1956年就開(kāi)始對(duì)我國(guó)各地分離出來(lái)的70多個(gè)乙腦毒株進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)其中SA14和SA4這兩個(gè)毒株來(lái)歷清楚，免疫原性強(qiáng)，可作為生產(chǎn)乙腦疫苗的備選株。

說(shuō)到這兩個(gè)毒株，我們不能忘記我國(guó)老一代的微生物學(xué)家汪美先。他曾任原西北防疫處技正（相當(dāng)于研究員），新中國(guó)成立后到第四軍醫(yī)大學(xué)當(dāng)教授。SA14株是他從蚊子幼蟲(chóng)中分離出來(lái)的，因?qū)π“资蟮闹虏⌒员容^溫和，具有潛伏期長(zhǎng)、病程緩慢的特點(diǎn)，便被李河民、俞永新作為實(shí)驗(yàn)研究的病毒株。他倆經(jīng)過(guò)挑選病毒蝕斑和經(jīng)小動(dòng)物的特殊傳代，于1965年取得SA14—5—3株（簡(jiǎn)稱5—3株），對(duì)12克重的小白鼠腦內(nèi)接種均無(wú)致死性，經(jīng)地鼠腎細(xì)胞和小鼠腦內(nèi)傳代，殘余毒力比較穩(wěn)定，經(jīng)衛(wèi)生部批準(zhǔn)制作出滅活疫苗進(jìn)行臨床研究。他們及研究室的全體人員首先在本人和自己小于6歲的孩子身上接種，發(fā)現(xiàn)接種后均嚴(yán)重?zé)o副反應(yīng)；接著又進(jìn)行小人群接種觀察，也未發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重副反應(yīng)。這種疫苗的免疫原性還不是最理想，但當(dāng)時(shí)全世界還沒(méi)有比這更好的疫苗。

美國(guó)曾生產(chǎn)鼠腦滅活疫苗在部隊(duì)中使用，因接種后出現(xiàn)了嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)變態(tài)反應(yīng)，不得不停用了。日本先后研制雞胚疫苗和鼠腦疫苗，也因副反應(yīng)大，停產(chǎn)了，后來(lái)日本生產(chǎn)鼠腦提純疫苗，副反應(yīng)降下來(lái)了，但免疫效果也不理想。

在我國(guó)乙腦疫苗的空白期，世界上特別是亞洲國(guó)家的乙腦疫情加劇。1957年我國(guó)發(fā)生乙腦3萬(wàn)余例，1965—1966年上升為15萬(wàn)例，1971—1972年上升為17萬(wàn)例。在國(guó)外，死亡率高達(dá)20%—40%，我國(guó)因用中西醫(yī)結(jié)合的辦法治療，死亡率為10%左右。如果等研究出至善至美的疫苗來(lái)，疫情就難以控制，為了應(yīng)急，我國(guó)開(kāi)始用5—3株生產(chǎn)地鼠腎滅活疫苗，后來(lái)又研制出地鼠腎活疫苗。因疫情嚴(yán)重，六大生研所都投入生產(chǎn)。

1971年，由北京所牽頭，組織北京、上海、武漢、成都四所會(huì)戰(zhàn)，對(duì)5—3株生產(chǎn)乙腦活疫苗進(jìn)行全方位的綜合研究，以進(jìn)一步規(guī)范生產(chǎn)工藝和檢定方法，確定活疫苗是否值得推廣應(yīng)用，共制備了100萬(wàn)份活疫苗在山東、江西、廣西、浙江四省的15個(gè)縣市觀察人體接種反應(yīng)、血清學(xué)反應(yīng)及流行病學(xué)效果，1972—1973年北京所又制備了40萬(wàn)人份的活疫苗在不同地區(qū)繼續(xù)擴(kuò)大觀察。丁志芬參加了這項(xiàng)工作量浩繁的觀察研究。沒(méi)想到就是她在這項(xiàng)工作中的免疫效果研究，在乙腦疫苗研制和接種上導(dǎo)致產(chǎn)生了兩個(gè)重要決策：第一，讓5—3株乙腦活疫苗停產(chǎn)了；第二，改變了乙腦死疫苗的免疫程序，讓孩子少挨針了。

說(shuō)起來(lái)，這還是丁志芬“多管閑事”的結(jié)果。1973年，她奉命去當(dāng)時(shí)的乙腦非流行區(qū)延吉市進(jìn)行5—3株地鼠腎乙腦活疫苗的免疫持久性研究，與死疫苗無(wú)關(guān)。但她想到，當(dāng)時(shí)地鼠腎乙腦疫苗對(duì)1歲兒童初次免疫后，每年還要加強(qiáng)注射1次，直到10歲，盡管六大生研所都在生產(chǎn)疫苗，仍舊供不應(yīng)求，便主動(dòng)提出，何不加一組乙腦滅活疫苗同時(shí)進(jìn)行研究？得到批準(zhǔn)。對(duì)照研究的結(jié)果表明，免疫一年后，活疫苗組抗體陽(yáng)性率0%，滅活疫苗組13%；分別進(jìn)行一針加強(qiáng)注射后，活疫苗陽(yáng)轉(zhuǎn)率達(dá)到100%，滅活疫苗為93%。以后每年采血，測(cè)定抗體，證實(shí)活疫苗組的免疫持久性不及滅活疫苗好，滅活疫苗加強(qiáng)1針后，相當(dāng)于免疫后1個(gè)月的抗體陽(yáng)性率至少可維持4年以上，而免疫后1個(gè)月的抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率可以有85%以上的流行病學(xué)保護(hù)率。她這個(gè)結(jié)論導(dǎo)致了活疫苗的停產(chǎn)和原有的免疫程序的改變：從原來(lái)的10歲前需要年年注射，共11針，減少到1、2、4、7、10歲注射共5—6針（現(xiàn)在已進(jìn)一步減少）。

這次在延吉的觀察研究還有一個(gè)被逼出來(lái)的附帶發(fā)明。當(dāng)時(shí)國(guó)內(nèi)外測(cè)定乙腦中和抗體的金標(biāo)準(zhǔn)是小鼠腦腔中和試驗(yàn)。小鼠腦腔中和試驗(yàn)做一次，至少需要用血清0.3—0.4毫升，因此必須靜脈采血1毫升左右才能滿足要求，而要求一個(gè)孩子多次靜脈采血是比較困難的。在對(duì)免疫兒童第四次采血時(shí)，不僅家長(zhǎng)不愿意，當(dāng)?shù)赜嘘P(guān)部門也不同意了，質(zhì)疑說(shuō)：“麻疹能夠用微量血，為什么乙腦必須用靜脈血？”丁志芬給他們講理由：“因?yàn)槁檎钍菧y(cè)血凝抑制抗體，而乙腦是測(cè)中和抗體。”但當(dāng)?shù)卦趺匆膊辉附邮堋Ｗ詈笏麄兘o兒童每人買一樣文具，并保證明年只采微量耳垂血才算完成任務(wù)。既然向人家承諾了明年只采微量血，承諾要兌現(xiàn)，就必須拿出相應(yīng)的檢測(cè)方法來(lái)。丁志芬課題組回到北京后，馬上開(kāi)展了微量血蝕斑中和試驗(yàn)和原來(lái)的小鼠中和試驗(yàn)的比較研究，終于在國(guó)內(nèi)首先建立了微量血蝕斑測(cè)定乙腦抗體的方法。醫(yī)科院病毒所聞?dòng)嵑笈扇藖?lái)學(xué)習(xí)，經(jīng)過(guò)試驗(yàn)證明確實(shí)可行，最后還發(fā)表了論文。自此以后，每年都只采耳垂微量血（0.5毫升），從而減少了孩子抽血的痛苦，使觀察研究得以繼續(xù)順利進(jìn)行。丁志芬笑稱這項(xiàng)發(fā)明是“有心栽花花不發(fā)，無(wú)意插柳柳成蔭”。

其實(shí)所謂“無(wú)意插柳”也是“有心栽花”的一種結(jié)果。北京所開(kāi)始生產(chǎn)地鼠腎乙腦疫苗時(shí)，不知什么原因細(xì)胞生長(zhǎng)不理想，不是偏薄就是活力不好，甚至長(zhǎng)成一塊一塊，或者一圈好一圈壞。大家想盡了辦法，總不能徹底解決問(wèn)題。時(shí)任乙腦室副主任的丁志芬每天進(jìn)到無(wú)菌室和大家一起找原因，有一天她突然覺(jué)得有可能的因?yàn)橐鹊鞍酌敢簆H偏低，便讓補(bǔ)加7.5%的NaHCO3（碳酸氫鈉），直到搖勻后pH呈7.8—8.0的顏色為止，這一次細(xì)胞長(zhǎng)的又均勻又厚實(shí)，從此細(xì)胞就長(zhǎng)好了。他戲稱“這真是踏破鐵鞋無(wú)覓處，得來(lái)全不費(fèi)工夫。”

北京所是5—3株生產(chǎn)乙腦疫苗的主力，在所領(lǐng)導(dǎo)和乙腦室主任劉培生的領(lǐng)導(dǎo)下，建立一套完整的生產(chǎn)工藝，生產(chǎn)順風(fēng)順?biāo)耍瑸槲覈?guó)控制乙腦流行做出了歷史性貢獻(xiàn)。但是用5—3株生產(chǎn)死疫苗接種后的陽(yáng)轉(zhuǎn)率只有60%多，作為應(yīng)急接種可以，但并非長(zhǎng)久之計(jì)，因此乙腦疫苗的研制之路還遠(yuǎn)沒(méi)有到頭。

全球第一個(gè)通過(guò)WHO預(yù)認(rèn)證的乙腦活疫苗

從免疫學(xué)的角度講，死疫苗不是一個(gè)完全的抗原，只能通過(guò)體液免疫而不能通過(guò)T細(xì)胞免疫，因而需要大量的抗原刺激，這是注射針數(shù)多的主要原因。解決的根本辦法還是得研究出免疫性能好副作用小的活疫苗。而用5—3株制作的活疫苗臨床試驗(yàn)結(jié)果不理想，所以毒種的優(yōu)化是一個(gè)關(guān)鍵。

俞永新在培育出5—3株后，沒(méi)有停止研究的步伐，對(duì)5—3株繼續(xù)進(jìn)行傳代優(yōu)化，在實(shí)驗(yàn)室一干又是8年，終于選育出免疫原性最好的14—2株。1983年，用此株試生產(chǎn)的疫苗在齊齊哈爾試種，證明抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率為92.3%（5—3株為61.5%）。1986年在張家口試種5—12歲兒童1000余名，陽(yáng)轉(zhuǎn)率達(dá)100%，且反應(yīng)輕微，于是被批準(zhǔn)用于試生產(chǎn)。

在實(shí)驗(yàn)室試制疫苗和在車間大量生產(chǎn)疫苗，原理是一樣的，但絕非像把幻燈片上的文字和圖形放大到銀幕上那么簡(jiǎn)單，得有工藝大師才行。俞永新相中了成都所的王壽貴。

王壽貴是從原大連所調(diào)到成都所的，曾師從日本技師學(xué)習(xí)疫苗制作。他愛(ài)動(dòng)腦筋，工作特別嚴(yán)謹(jǐn)，帶出了一個(gè)能打硬仗的技師團(tuán)隊(duì)。在用5—3株生產(chǎn)時(shí)，俞永新曾到成都來(lái)看生產(chǎn)過(guò)程，發(fā)現(xiàn)王壽貴培養(yǎng)的細(xì)胞長(zhǎng)得比較完美，表面光滑均勻，細(xì)胞層次高。那時(shí)進(jìn)口培養(yǎng)基不容易，王壽貴帶著大家想辦法，搞出了自己的培養(yǎng)基，使細(xì)胞長(zhǎng)得更好。俞永新因此決定把14—2株交給王壽貴去開(kāi)發(fā)生產(chǎn)，于是有了“一個(gè)優(yōu)秀技師引來(lái)了一種新型疫苗”的佳話。

王壽貴的“放大”工作一開(kāi)始很不順利，在培養(yǎng)基配方和細(xì)胞培養(yǎng)液配方上，經(jīng)歷了無(wú)數(shù)次的失敗，歷經(jīng)兩年探索，才找到了科學(xué)的配方。用于生產(chǎn)，病毒繁殖高，滴度穩(wěn)定，血清學(xué)檢測(cè)效果好，經(jīng)中檢所檢定后，衛(wèi)生部批準(zhǔn)大面積上臨床。

俞永新在實(shí)驗(yàn)室制作的疫苗在齊齊哈爾和張家口試種，是小面積，接種了800—1000人。現(xiàn)在要大面積，是多少人？80萬(wàn)！在世界疫苗試種史上，這是一個(gè)罕見(jiàn)的數(shù)字，浩大的工程，1987—1988年在云南、貴州兩省的鼎力相助下展開(kāi)。成都所流行病學(xué)研究室主任周本立自始至終參加了這項(xiàng)工作，他回憶說(shuō)：“在云南試種了50萬(wàn)兒童（另30萬(wàn)在貴州），結(jié)果證明陽(yáng)轉(zhuǎn)率高達(dá)90%—100%，與俞永新小面積試種的結(jié)果是一致的，而且沒(méi)有發(fā)生與疫苗相關(guān)的副反應(yīng)，只有少數(shù)短暫發(fā)燒到38℃。地鼠腎乙腦活疫苗能達(dá)到這么好的效果，當(dāng)時(shí)在世界上沒(méi)有第二家。”

14—2株地鼠腎乙腦活疫苗1988年拿到新藥證書(shū)，隨后開(kāi)始大量生產(chǎn)，當(dāng)時(shí)成都所是唯一的生產(chǎn)單位，地鼠腎乙腦活疫苗研制成功被列為1989年全國(guó)十大科技成就之一，這項(xiàng)研究1990年獲得國(guó)家科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)。

在新世紀(jì)，地鼠腎乙腦活疫苗被列入國(guó)家計(jì)劃免疫產(chǎn)品。說(shuō)起它通過(guò)世衛(wèi)組織預(yù)認(rèn)證，也許還得感謝美國(guó)人。此話怎講？美國(guó)在亞洲包括日本、韓國(guó)和東南亞的駐軍中，經(jīng)常發(fā)生乙腦疫情，而美國(guó)沒(méi)有乙腦疫苗，選用的是日本的鼠腦純化疫苗，給官兵接種后屢屢發(fā)生中樞神經(jīng)系統(tǒng)的變態(tài)反應(yīng)。美軍苦于采購(gòu)不到好的乙腦疫苗，聽(tīng)說(shuō)中國(guó)研制出來(lái)了地鼠腎乙腦活疫苗，效果不錯(cuò)，1991年就派人到成都所考察。他們看得很仔細(xì)，感到疫苗不錯(cuò)，但覺(jué)得生產(chǎn)設(shè)備土不拉幾的，動(dòng)物飼養(yǎng)室也不符合GMP規(guī)范，不敢貿(mào)然采購(gòu)。所以又請(qǐng)世衛(wèi)組織派專家組來(lái)再次考察。專家組看完以后，主動(dòng)提出資助成都所10萬(wàn)美元用于添置一些小型設(shè)備，同時(shí)要求把用于生產(chǎn)的14—2株送國(guó)際菌苗實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行生物學(xué)特性和安全性方面的全面檢定。

真金不怕火煉。國(guó)際菌苗實(shí)驗(yàn)室的檢定結(jié)果與俞永新教授所做的結(jié)果完全一致。毒株沒(méi)問(wèn)題了，他們還要看臨床試驗(yàn)情況。美國(guó)人戴著有色眼鏡，總認(rèn)為中國(guó)的試驗(yàn)數(shù)據(jù)有水分，于是組成了一個(gè)有美國(guó)專家與華西醫(yī)科大學(xué)（現(xiàn)四川大學(xué)醫(yī)學(xué)院）臨床流行病教研室專家參加的協(xié)作組，在成都做疫苗的安全性考察。疫苗接種了1萬(wàn)人份，空白對(duì)照也選了1萬(wàn)多人。每天派人到接種兒童家里去觀察，測(cè)量體溫，看小孩的精神狀態(tài)如何。這樣觀察了一個(gè)多月，最后證明這種疫苗是有效的、安全的。就這還沒(méi)完，他們?cè)谒拇ㄟx了一個(gè)片區(qū)，在乙腦流行的七八月份進(jìn)行調(diào)查對(duì)比。如果一名兒童沒(méi)有感染乙腦，就要查他打沒(méi)打過(guò)疫苗，打的什么疫苗，同時(shí)選4個(gè)與他年齡和生活條件相似但沒(méi)有打疫苗的兒童來(lái)進(jìn)行對(duì)照，如果其中有人得了乙腦，就把他接到醫(yī)院進(jìn)行治療和調(diào)查。繼美國(guó)之后，韓國(guó)、印度、尼泊爾等國(guó)也派人來(lái)參與考察。韓國(guó)人還把14—2毒株帶回國(guó)內(nèi)進(jìn)行了檢定。如此這般之后，韓國(guó)、印度、尼泊爾等國(guó)決定進(jìn)口成都所生產(chǎn)的地鼠腎乙腦活疫苗。唯獨(dú)美國(guó)沒(méi)有立即采購(gòu)，它要等你通過(guò)世衛(wèi)組織的預(yù)認(rèn)證后再做決定。

通過(guò)世衛(wèi)組織預(yù)認(rèn)證的路程走了上10年。成都所原所長(zhǎng)吳永林力排眾議投巨資來(lái)進(jìn)行這項(xiàng)工作，他調(diào)中國(guó)生物任副總裁（現(xiàn)總裁）后，新任所長(zhǎng)葛永紅接著做。說(shuō)起這10年，成都所乙腦室主任鄭慶紋感慨萬(wàn)千，認(rèn)為簡(jiǎn)直是一次脫胎換骨。一切要按WHO的GMP標(biāo)準(zhǔn)建設(shè)，WHO派了一個(gè)專家來(lái)講課，是按小時(shí)收費(fèi)的，那時(shí)很多人的英文還不太行，聽(tīng)得半懂非懂，咋辦？鄭慶紋帶著白家峰、楊文杰、廖丹等人，把他的講課錄音和英文版的GMP標(biāo)準(zhǔn)沒(méi)日沒(méi)夜地翻譯了7個(gè)月，編成一本用中國(guó)方式表達(dá)的教材。她說(shuō)：“建設(shè)過(guò)程的艱難我就不講了，只說(shuō)觀念上的改變。生產(chǎn)車間的空氣也必須經(jīng)過(guò)三層過(guò)濾消毒，以防空氣把細(xì)菌帶進(jìn)車間，影響產(chǎn)品質(zhì)量。過(guò)去我們進(jìn)車間，隨便套上工作服就行了。現(xiàn)在要按‘七步法’嚴(yán)格消毒。第一步，先把衣服脫得只剩下內(nèi)衣，嚴(yán)格按規(guī)定洗手，烘干；第二步，穿上滅菌的衣、褲、襪子，戴上口罩；第三步，酒精消毒，戴手套，只準(zhǔn)摸內(nèi)層，不得摸外層，手套外層消毒后，翻過(guò)來(lái)再消毒，重新戴上……全程均有人監(jiān)督，在確認(rèn)消毒合格后，再戴上披肩帽，穿上連體服，戴上護(hù)目鏡，方可進(jìn)入車間。過(guò)去對(duì)操作人員的學(xué)歷無(wú)要求，現(xiàn)在我手下全部是本科生、研究生……GMP標(biāo)準(zhǔn)體現(xiàn)在每一個(gè)細(xì)節(jié)上。”就這么一個(gè)細(xì)節(jié)一個(gè)細(xì)節(jié)地落實(shí)后，2013年成都所的地鼠腎乙腦活疫苗終于通過(guò)WHO的預(yù)認(rèn)證，疫苗可以在世界暢行無(wú)阻了。這是改革開(kāi)放的一個(gè)重要成果，在全國(guó)起到了“領(lǐng)頭羊”的作用。現(xiàn)在，成都所已經(jīng)按GMP標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn)乙腦疫苗10億人份，每年2000萬(wàn)人份供應(yīng)國(guó)內(nèi)，3000萬(wàn)人份出口國(guó)外。

世界上第一個(gè)VERO細(xì)胞純化乙腦滅活疫苗

5—3株地鼠腎細(xì)胞乙腦滅活疫苗使用20多年來(lái)，對(duì)降低我國(guó)的乙腦發(fā)病率和病死率功不可沒(méi)。但是，存在的三個(gè)問(wèn)題必須解決。一，抗原含量較少，兒童免疫后抗體反應(yīng)不夠理想；二，因是用原代地鼠腎細(xì)胞生產(chǎn)，殘存的雜蛋白引起的過(guò)敏反應(yīng)時(shí)有發(fā)生；三，生產(chǎn)一次就需要數(shù)百只甚至成千只地鼠，地鼠用得多，工序復(fù)雜煩瑣，而且容易造成污染使工藝中斷或疫苗廢棄。

上述三個(gè)要解決的問(wèn)題，都與用原代動(dòng)物細(xì)胞生產(chǎn)疫苗有關(guān)，如果拋開(kāi)原代細(xì)胞，用傳代細(xì)胞生產(chǎn)，三個(gè)問(wèn)題都可迎刃而解。丁志芬通過(guò)廣泛閱讀國(guó)內(nèi)外專業(yè)文獻(xiàn)，決心在這方面一試身手。她說(shuō)：“感謝北京所的領(lǐng)導(dǎo)們，在當(dāng)時(shí)經(jīng)濟(jì)困難的情況下還堅(jiān)持訂閱了很多高價(jià)的國(guó)外雜志，使我們能夠在那個(gè)消息不怎么暢通的年代及時(shí)了解到國(guó)際上的生物制品發(fā)展動(dòng)態(tài)。”

早在20世紀(jì)60年代，Hayflick和Yasumura分別建立了人二倍體細(xì)胞株和非洲綠猴腎細(xì)胞系（VERO），人的類淋巴細(xì)胞系（Namalwa），世界各國(guó)先后采用傳代細(xì)胞代替原代細(xì)胞進(jìn)行試驗(yàn)研究和人用生物制品生產(chǎn)的嘗試，顯示出了明顯的優(yōu)勢(shì)。1979年英國(guó)用1000L罐懸浮培養(yǎng)BHK（倉(cāng)鼠腎）細(xì)胞生產(chǎn)了動(dòng)物用口蹄疫疫苗，用Namalwa細(xì)胞制備了人用類淋巴細(xì)胞干擾素，70年代末80年代初法國(guó)巴斯德梅里厄研究所用微載體反應(yīng)器系統(tǒng)培養(yǎng)VERO細(xì)胞生產(chǎn)小兒麻痹滅活疫苗和人用狂犬病疫苗首先獲得成功。1984年和1987年，WHO分別制定了VERO細(xì)胞生產(chǎn)小兒麻痹滅活疫苗和人用狂犬病疫苗規(guī)程。

傳代細(xì)胞是一種經(jīng)過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化的，無(wú)細(xì)菌、病毒、支原體污染的，可以不斷傳代的細(xì)胞，凍存在液氮中可以保留其全部生物學(xué)活性，取出來(lái)可以不斷擴(kuò)增而用于生產(chǎn)，這樣不僅省去了煩瑣的原代細(xì)胞操作工藝而且也保證了細(xì)胞的質(zhì)量，減少了原代細(xì)胞的可能污染，無(wú)疑是疫苗基質(zhì)的最好選擇。

認(rèn)準(zhǔn)了的路就要走下去。起初，丁志芬?guī)ьI(lǐng)乙腦室嘗試自己建立地鼠腎細(xì)胞的傳代細(xì)胞系，以代替原代地鼠腎細(xì)胞。她們從動(dòng)物室取回懷孕的地鼠，把胚胎的肺、腎、肌肉、皮膚組織取下來(lái)分別進(jìn)行消化培養(yǎng)，待成片后再消化傳代，發(fā)現(xiàn)肌皮和肺細(xì)胞生長(zhǎng)良好，腎細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢，肌皮和肺細(xì)胞能傳10余代，而腎細(xì)胞只能傳3—5代，重復(fù)幾次結(jié)果相似，最后不得不終止。

要說(shuō)傳代細(xì)胞，北京所不是有現(xiàn)存的嗎？何苦還要自己去建立。聞仲權(quán)建立的2BS人二倍體細(xì)胞株，在北京所已經(jīng)用于生產(chǎn)脊髓灰質(zhì)炎活疫苗。1975年，丁志芬也開(kāi)始了人二倍體細(xì)胞乙腦疫苗的研究，可惜又失敗了。他們?cè)?BS細(xì)胞上將乙腦病毒連續(xù)傳了57代，將早、中、晚代毒種進(jìn)行免疫原性的比較，發(fā)現(xiàn)傳代后免疫原性逐漸降低，不能用于生產(chǎn)，不得不放棄。

看來(lái)用傳代細(xì)胞制作乙腦疫苗的這條路暫時(shí)走不通了，因當(dāng)時(shí)拿不到國(guó)外的BHK和VERO細(xì)胞。轉(zhuǎn)了一圈不得已又轉(zhuǎn)了回來(lái)，想用濃縮的辦法解決乙腦死疫苗抗原偏低的問(wèn)題。要濃縮，離不開(kāi)超濾器，而當(dāng)時(shí)國(guó)內(nèi)沒(méi)有。打聽(tīng)到天津紡織工學(xué)院制備的中空纖維超濾柱正在進(jìn)行試驗(yàn)，拿來(lái)一用，證明超過(guò)濾是濃縮疫苗的好方法。于是，他們用鼠腦毒種做了出了6批疫苗，腦炎室的14人首先接種，每人皮下注射2毫升，沒(méi)有發(fā)燒和不良反應(yīng)，接著又按照基礎(chǔ)免疫2針注射托兒所2—5歲兒童54人，也沒(méi)有局部和全身的不良反應(yīng)，于是擴(kuò)大試生產(chǎn)，制備了95000毫升疫苗，在湖北接種1—3歲兒童（二針間隔1周），免疫后血清中和抗體陽(yáng)轉(zhuǎn)率71%—100%。濃縮疫苗將陽(yáng)轉(zhuǎn)率提升了，但是用于細(xì)胞培養(yǎng)和病毒培養(yǎng)的營(yíng)養(yǎng)液價(jià)格昂貴，需要進(jìn)口，而且毒種甩不掉鼠腦，只好作罷，又回到傳代細(xì)胞疫苗的研制上來(lái)。

這次回頭多少有些被逼的性質(zhì)。改革開(kāi)放后，國(guó)家計(jì)委和衛(wèi)生部計(jì)劃對(duì)全國(guó)六大生研所的18條生產(chǎn)線進(jìn)行整合改造，確定乙腦疫苗將由北京、長(zhǎng)春兩所生產(chǎn)7000萬(wàn)人份（當(dāng)時(shí)全國(guó)的供應(yīng)量，俞永新研制的活疫苗還未出世），其他四個(gè)生研所將不再生產(chǎn)。當(dāng)時(shí)北京所的乙腦疫苗生產(chǎn)能力還不到1000萬(wàn)人份，等于生產(chǎn)規(guī)模要擴(kuò)大3—4倍，如果還用地鼠腎原代細(xì)胞生產(chǎn)，必須建立一個(gè)龐大的地鼠繁殖種群，擴(kuò)建動(dòng)物房和生產(chǎn)車間，如能用傳代細(xì)胞生產(chǎn)乙腦疫苗就會(huì)省掉這許多工程和麻煩。而且，此時(shí)的國(guó)際環(huán)境已非彼時(shí)，從國(guó)際上要傳代細(xì)胞不太困難了。

1985年丁志芬考慮用BHK21（乳倉(cāng)鼠腎細(xì)胞）傳代細(xì)胞來(lái)生產(chǎn)疫苗，指導(dǎo)兩位武漢大學(xué)學(xué)生做畢業(yè)論文，研究結(jié)果證明：1、在BHK21傳代細(xì)胞上乙腦病毒生長(zhǎng)良好；2、可以用B—丙內(nèi)酯取代甲醛用來(lái)滅活乙腦病毒，也就是說(shuō)用BHK21傳代細(xì)胞可以生產(chǎn)乙腦滅活疫苗，但是這條路徑是最好的嗎？

丁志芬又帶領(lǐng)大家進(jìn)行傳代細(xì)胞BHK21和VERO（非洲綠猴腎細(xì)胞）對(duì)比研究。BHK21細(xì)胞看似很有希望，如能懸浮培養(yǎng)，就可以用大罐像培養(yǎng)細(xì)菌一樣培養(yǎng)疫苗了。但是他們手頭的BHK21細(xì)胞是貼壁細(xì)胞，能否通過(guò)馴化改變其貼壁特性，使之成為可以懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞呢？在這里，他們又遭遇了滑鐵盧，多次試驗(yàn)都沒(méi)有成功。再看VERO細(xì)胞，其產(chǎn)生的病毒滴度和BHK21細(xì)胞一樣都很理想，而且WHO已經(jīng)制定了相應(yīng)的規(guī)程，法國(guó)已經(jīng)用VERO細(xì)胞成功制備出其他疫苗。因此，丁志芬決定放棄BHK21細(xì)胞的研究，改為研制VERO細(xì)胞疫苗。1988年3月，丁志芬團(tuán)隊(duì)的傳代細(xì)胞制備乙腦滅活疫苗的研究，被批準(zhǔn)為國(guó)家醫(yī)學(xué)重點(diǎn)科技項(xiàng)目。

這一年，成都所的地鼠腎乙腦活疫苗已經(jīng)拿到新藥證書(shū)，為什么還要把傳代細(xì)胞死疫苗作為重點(diǎn)科技項(xiàng)目？因?yàn)榛钜呙绾退酪呙绺饔星铮瑹o(wú)絕對(duì)優(yōu)劣之別，有些身體條件不適合用活疫苗的可用死疫苗。這年底，通過(guò)WHO生物制品處的幫助，北京所得到了ATCC（美國(guó)菌種保藏中心，是世界上最大的生物資源中心）的118代VERO細(xì)胞方瓶?jī)蓚€(gè)。乙腦室在聞仲權(quán)的指導(dǎo)下，通過(guò)培養(yǎng)、擴(kuò)增建起了細(xì)胞種子庫(kù)。他們前期失敗的教訓(xùn)，現(xiàn)在成了成功的墊腳石。根據(jù)在二倍體細(xì)胞疫苗研究中的經(jīng)驗(yàn)，很快制備了早代的VERO乙腦病毒毒種庫(kù)。接著進(jìn)行細(xì)胞培育和病毒培養(yǎng)的工藝研究，北京所為他們改建了一間實(shí)驗(yàn)室，給了一個(gè)裝有轉(zhuǎn)瓶機(jī)的培育房，一間洗刷室和一個(gè)辦公室，并且將課題組的6人團(tuán)隊(duì)從腦炎疫苗室剝離出來(lái)，專門成立了中試二室。但是所里只能給房子沒(méi)法給設(shè)備，怎么辦？丁志芬橫下一條心：“沒(méi)有條件創(chuàng)造條件上。”國(guó)外培養(yǎng)細(xì)胞用的是微載體反應(yīng)器系統(tǒng)，當(dāng)時(shí)在中國(guó)見(jiàn)也沒(méi)見(jiàn)過(guò)，要進(jìn)口又沒(méi)有外匯，他們決定用15L轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)代替發(fā)酵罐來(lái)培養(yǎng)，設(shè)計(jì)了自己的技術(shù)路線：從細(xì)胞庫(kù)取細(xì)胞—復(fù)蘇擴(kuò)增細(xì)胞—接種培養(yǎng)病毒—多次收獲病毒—濃縮病毒—純化病毒（去除雜蛋白和DNA）—稀釋分裝并凍干疫苗。每一步工作都遇到很多難題，除了一臺(tái)轉(zhuǎn)瓶機(jī)，沒(méi)有任何機(jī)器設(shè)備，所里其他研究室有的就借來(lái)用。正好所里有一臺(tái)WHO的 CVI支援脊灰室的中空纖維超濾器系統(tǒng)，借來(lái)后解決了疫苗濃縮問(wèn)題；純化，又沒(méi)有設(shè)備，當(dāng)時(shí)乙肝疫苗室有超速離心機(jī)，他們借來(lái)一臺(tái)，用于純化研究；純化后要脫糖，他們借用血漿研究室的MINI超濾器也解決了問(wèn)題。就這樣，沒(méi)有買一件設(shè)備，他們完成了VERO細(xì)胞乙腦疫苗的臨床前研究。經(jīng)用當(dāng)時(shí)最先進(jìn)的FPLC儀器分析，證明疫苗純度很高，在電鏡下可看到了清晰而完整的病毒。

疫苗中細(xì)胞殘余DNA的去除曾經(jīng)是一個(gè)重大難題，國(guó)內(nèi)還從來(lái)沒(méi)有人做過(guò)。丁志芬參考Amosenko·Fa用硫酸魚(yú)精蛋白的去除方法，設(shè)計(jì)了方案，讓助手石慧穎去做。相關(guān)論文發(fā)表在《疫苗》（VACCINE）期刊上。石慧穎想看看原文，不巧的是這期雜志被人借走了，等他們借到手時(shí)，見(jiàn)鬼！這篇文章卻不知道被什么人撕掉了，只好到處去找，協(xié)和醫(yī)學(xué)院圖書(shū)館沒(méi)有，醫(yī)科院的圖書(shū)館也沒(méi)有……最后是中檢所的一位朋友幫助復(fù)印回來(lái)一份。VERO細(xì)胞殘余DNA檢定，當(dāng)時(shí)國(guó)內(nèi)也沒(méi)有現(xiàn)成的經(jīng)驗(yàn)，恰在這時(shí)得知軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院要舉辦“光敏生物素標(biāo)記法檢測(cè)DNA”學(xué)習(xí)班，丁志芬立即派助手石慧穎去學(xué)習(xí)，學(xué)會(huì)了做DNA檢定。至此，VERO傳代細(xì)胞乙腦疫苗的所有工藝和檢定問(wèn)題全部解決。

這中間一個(gè)有趣的插曲。北京所所長(zhǎng)顧佩韋到美國(guó)去參加1988年WHO召開(kāi)的傳代細(xì)胞會(huì)議，在會(huì)上報(bào)告了丁志芬曾經(jīng)用Namalva細(xì)胞研制人用干擾素和用BHK21細(xì)胞研制乙腦疫苗的進(jìn)展，引起世界某知名疫苗研究所的注意，提出要求合作研究VERO乙腦疫苗。好事啊！幾經(jīng)周折，直到1992年丁志芬才應(yīng)邀前往，去那兒一看，讓她大失所望。原以為去了可以學(xué)到許多東西，可一去就給你“約法三章”，這個(gè)不能看，那個(gè)不能拍照……除了讓看了一眼反應(yīng)器系統(tǒng)和二倍體細(xì)胞狂犬疫苗的生產(chǎn)外，什么都對(duì)你保密，卻要你詳細(xì)介紹你的研究結(jié)果，包括每一個(gè)細(xì)節(jié)，這哪是合作啊？丁志芬憋著一口氣回國(guó)后，對(duì)研究室的同事說(shuō)：“×國(guó)人除了設(shè)備比我們先進(jìn)之外，沒(méi)有什么了不起，我們的條件雖然沒(méi)有他們好，但只要努力一定能很快解決問(wèn)題，我們要爭(zhēng)口氣，不能讓他們搶在前面。”

1994年底，丁志芬課題組試制的三批VERO細(xì)胞純化乙腦疫苗順利通過(guò)中檢所檢定；1995年2月向衛(wèi)生部新藥審評(píng)辦公室申請(qǐng)開(kāi)展臨床研究。這是我國(guó)向新藥審評(píng)辦公室申請(qǐng)的第一個(gè)傳代細(xì)胞純化疫苗，也是世界上第一個(gè)用VERO細(xì)胞制備的純化乙腦疫苗，1996年獲中國(guó)生物制品總公司科技進(jìn)步一等獎(jiǎng)。1997年人體觀察完成，獲準(zhǔn)開(kāi)展新生物制品試生產(chǎn)，1998年底取得新藥證書(shū)。疫苗試生產(chǎn)后因臨床使用反應(yīng)良好先后被入選北京市火炬項(xiàng)目和國(guó)家火炬項(xiàng)目，其中的動(dòng)物細(xì)胞大量培養(yǎng)技術(shù)及反應(yīng)器研制獲“八五”科技攻關(guān)重大科技成果獎(jiǎng)，2000年VERO細(xì)胞疫苗被評(píng)為國(guó)家級(jí)新產(chǎn)品，丁志芬被評(píng)為全國(guó)優(yōu)秀留學(xué)回國(guó)人員。

VERO細(xì)胞純化乙腦疫苗在我國(guó)使用幾年后，上述那個(gè)外國(guó)研究所也試制出來(lái)了，但在臨床觀察時(shí)，沒(méi)有通過(guò)安全試驗(yàn)這一關(guān)，從此作罷了。

VERO傳代細(xì)胞乙腦疫苗的研制在我國(guó)開(kāi)了一個(gè)用傳代細(xì)胞研究疫苗的先河，繼丁志芬之后，僅北京所就先后開(kāi)展了VERO細(xì)胞狂犬病疫苗、脊灰滅活疫苗、手足口病疫苗的研究并已取得豐碩成果。因此，VERO細(xì)胞乙腦疫苗誕生的意義遠(yuǎn)遠(yuǎn)超出了乙腦疫苗本身，它帶動(dòng)出一個(gè)用傳代細(xì)胞研究疫苗的浪潮，如今每研究一種新的疫苗往往都會(huì)首先從VERO細(xì)胞開(kāi)始嘗試。

丁志芬一生致力于乙腦疫苗研究，退休前，為了進(jìn)一步提高疫苗質(zhì)量，2000年她帶著研究生田博開(kāi)始了VERO細(xì)胞乙腦疫苗的細(xì)胞基質(zhì)蛋白過(guò)敏原的研究及檢測(cè)探索，發(fā)表了3篇論文，引起了國(guó)內(nèi)對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)疫苗的細(xì)胞基質(zhì)蛋白過(guò)敏原的重視，現(xiàn)在不僅VERO細(xì)胞疫苗的基質(zhì)蛋白檢測(cè)被列入必檢項(xiàng)目，原代地鼠腎細(xì)胞基質(zhì)蛋白的檢測(cè)也被列入規(guī)程，對(duì)于減少副反應(yīng)起了重要作用。