書名: 簡明神經生物學實驗技術手冊作者名: 李云慶 呂國蔚本章字數: 841字更新時間: 2020-02-19 18:25:29
一、神經生理學實驗
(一)復合動作電位記錄
1.原理
神經干由許多直徑不同、興奮性不同和傳導速度不同的神經纖維組成。對神經干施加最大刺激而使神經干中全部神經纖維興奮時,可用粗電極記錄到由不同纖維的動作電位共同組成的復合動作電位。當刺激電極與記錄電極之間的距離足夠大時,可以分辨出一系列在時間上先后不同的波峰。
2.目的
(1)辨認刺激偽跡與生物信號。
(2)識別與區分復合動作電位波形。
(3)記錄與測量復合動作電位參數。
3.步驟
(1)麻醉:
選擇健康成年大鼠,4%戊巴比妥鈉(40 mg/kg體重)麻醉,待動物麻醉后固定。
(2)手術:
按常規手術方法進行頸部手術,暴露出氣管,行氣管插管,必要時進行人工呼吸。然后分離一側腓神經、坐骨神經,分別安放刺激電極和記錄電極。
(3)調整儀器
1)刺激器:
延遲1 ms;波寬0.3~0.5 ms;頻率2~5 Hz;強度根據需要調節。
2)誘發反應記錄儀:
靈敏度100~200 μV/cm;高頻衰減1 kHz;低頻衰減2 Hz;掃描速度20 ms/cm;疊加次數32;實驗中可隨時根據情況進行調整。
(4)實驗觀察
1)記錄復合動作電位:
由弱漸強調節刺激強度,觀察復合動作電位各波的變化。在最大刺激強度下,記錄復合動作電位波形。
“刺激強度”一般包括兩種含義:一是刺激參數(絕對強度尺度)本身;二是用生物學指標指示的刺激效應(相對強度尺度或生物標準)。在電生理實驗中,我們常用生物標準來表示刺激強度,即用刺激所引起的生物效應作為刺激強度的相對尺度,通常將引起剛可發現的(電)生理反應定為1 T,用以表示相對的生物閾值。更強的強度即以1 T的倍數表示。如果把外周神經干中的A類纖維動作電位A波中的Aα波的出現定為1 T,調節刺激強度,可以記錄并計算Aβ、Aγ和C波的T值。
2)測量復合動作電位中各波的參數
a.潛伏期:首先分辨清楚刺激偽跡與動作電位波形,然后根據示波器的時間基線計算出從刺激偽跡到該波起始點之間的時間,即為潛伏期。亦可計算出從刺激偽跡到該波峰頂之間的時間,稱峰-峰潛伏期。
b.振幅:自該波起始點到最高頂點之間的幅度,即振幅。
c.持續期:根據示波器上的時間基線,計算出從該波起始點至終止點之間的時間,即持續期。
4.結果示例
見圖1。