第三節　小鼠平衡功能實驗

轉棒實驗（rotarod test）用于測定肌肉力量、平衡協調能力和運動學習能力，是神經科學研究中常用的一種測試方法。具有感覺運動協調良好的實驗動物能很好地完成這項實驗。根據實驗設計的不同，可運用轉棒式疲勞儀（圖2-4、圖2-5）在神經系統變性疾病進行疲勞實驗、中樞神經系統抑制實驗以及用于篩選新藥可能的副作用以及動物發育過程中對動作協調性的影響。

該測試主要用于小鼠，它需要一個特殊的儀器使轉速在不同速度之間。初始試驗中，需訓練小鼠能在固定桿上保持平衡，然后保持在低速旋轉的桿上至少60s。一旦這種能力水平達到，桿被設置為在5min內加速旋轉。記錄小鼠掉落時經歷的時間和當時的轉速。運動學習也可以在隨后的加速試驗中進行評估。主要評定指標是某一轉速下小鼠的在棒時間。

1.實驗對象

C57BL/6小鼠。

2.實驗設備

轉棒式疲勞儀（購自濟南益延科技發展有限公司，型號YLS-4C）。

3.實驗步驟

（1）測試時間：每天9:00～17:00。可以選擇每天9:00～17:00的某一固定時間進行測試。如果條件允許，最好選擇傍晚開始，因為這更符合小鼠的作息規律，有利于實驗進行。

（2）測試環境：選擇安靜、固定的環境，周圍光線不可過強，可以只打開轉棒式疲勞儀較遠處的燈光，并且疲勞儀四周用紙等物體適當遮光。

（3）篩選：篩選時捏住小鼠尾尖，使其在轉棒上爬行，轉速調到10轉/分，爬行一段時間后逐漸放松鼠尾，使其不再依靠鼠尾平衡身體時可完全放手，挑選時對于跳躍和團身抱軸的鼠棄之不用。

（4）訓練：正式測試前，將儀器轉速調整為10轉/分，設定30min，假設小鼠在設定時間之前落地，則機器會報警提示，連續2天照此訓練小鼠。

（5）測試：將轉棒式疲勞儀的轉速調整為5轉/分，在轉棒儀轉動時將小鼠輕輕放上，最好是以與水平面45°角放上，小鼠朝向與棒的轉動方向相反，以使小鼠抓住棒向上爬。同一組內或兩組之間，兩個相反方向的小鼠數目最好均衡，以排除此因素帶來的影響；開啟儀器最初15s內，使轉速由5轉/分升到45轉/分，然后將速度降下來，固定在5轉/分。

（6）評定指標：小鼠落地時儀器會自動記錄其在棒時間，每只小鼠的在棒時間即為其評定指標。

轉棒式疲勞儀檢測的小鼠下落的潛伏期，見圖2-6。

4.注意事項

（1）進行轉棒實驗的小鼠比較容易激惹，會有受試小鼠從轉棒上跳下來的現象。因此，進行測定時要仔細觀察排除該現象。

（2）由于小鼠的應激反應，測試時小鼠往往會有小便或大便，因此，每測試完畢一只小鼠，要將轉棒用紗布蘸水將其清理干凈，以免下一只小鼠受氣味影響而不配合操作；所有小鼠都落地以后，點擊“停止”并清洗每一根轉棒。

（3）先試驗雄鼠再試驗雌鼠。

（宋　悅　潘曉東）