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第一節(jié) 紫外-可見(jiàn)分光光度法概述

許多物質(zhì)都具有顏色,如高錳酸鉀水溶液呈紫色、硫酸銅溶液呈藍(lán)色。當(dāng)有色物質(zhì)溶液的濃度發(fā)生變化時(shí),溶液顏色的深淺度也會(huì)隨之發(fā)生變化。溶液愈濃,顏色愈深。因此利用比較待測(cè)溶液本身的顏色或加入試劑后呈現(xiàn)的顏色的深淺來(lái)測(cè)定溶液中待測(cè)物質(zhì)的濃度的方法稱為比色分析法。以人的眼睛來(lái)檢測(cè)顏色深淺的方法稱為目視比色法,以光電轉(zhuǎn)換器件為檢測(cè)器來(lái)區(qū)別顏色深淺的方法稱為光電比色法。隨著近代測(cè)試儀器的發(fā)展,目前已普遍使用分光光度計(jì)進(jìn)行測(cè)試。

紫外-可見(jiàn)分光光度法是利用物質(zhì)對(duì)200~780nm光譜區(qū)域內(nèi)的電磁輻射具有選擇性吸收,對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的一種分析方法。

一、紫外-可見(jiàn)分光光度法特點(diǎn)

一般紫外-可見(jiàn)分光光度法具有以下特點(diǎn):

(1)儀器設(shè)備簡(jiǎn)單 儀器設(shè)備相對(duì)比較簡(jiǎn)單,操作簡(jiǎn)便。

(2)靈敏度高 適用于微量組分的測(cè)定,一般可測(cè)定10-6g級(jí)的物質(zhì),其摩爾吸光系數(shù)可達(dá)到104~105數(shù)量級(jí)。

(3)精密度和準(zhǔn)確度較高 濃度測(cè)量的相對(duì)誤差一般在1%~3%之內(nèi)。

(4)應(yīng)用廣泛 不僅用于無(wú)機(jī)化合物的分析,更重要的是用于有機(jī)化合物的鑒定及主要官能團(tuán)的結(jié)構(gòu)分析,也可對(duì)同分異構(gòu)體進(jìn)行鑒別。此外,還可用于配合物的組成和穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定。

二、紫外-可見(jiàn)分光光度法預(yù)備知識(shí)——光的認(rèn)識(shí)

1.光的基本性質(zhì)

光具有波粒二象性。即光具有波動(dòng)性和粒子性。光是一種波,因而它具有波長(zhǎng)(λ)和頻率(υ);光也是一種粒子,因而它具有能量(E)。它們之間的關(guān)系如式(2-1)所示。

E==h×(C/λ)  (2-1)

式中,E為能量;h為普朗克常數(shù)(6.626×10-34J·s);υ為頻率;C為光速,真空中約為3×1010cm/s;λ為波長(zhǎng)。

從表達(dá)式(2-1)中可知,不同波長(zhǎng)的光能量不同。波長(zhǎng)愈長(zhǎng),能量愈小,波長(zhǎng)愈短,能量愈大。

將各種電磁波(光)按其波長(zhǎng)或頻率大小順序排列畫(huà)成的圖表稱為電磁波譜,如表2-1所示。

表2-1 電磁波譜

2.光的種類

(1)單色光和復(fù)合光 不能分解的光稱為單色光,如紅光、紫光等。純單色光是很難獲得的,激光的單色性雖然很好,但也只能說(shuō)接近于單色光。含有多種波長(zhǎng)的光稱為復(fù)合光,例如日光、白熾燈光等。

(2)可見(jiàn)光和互補(bǔ)光 人的眼睛對(duì)不同波長(zhǎng)的光的感覺(jué)是不一樣的。凡波長(zhǎng)小于400nm的紫外光或波長(zhǎng)大于780nm的紅外光均不能被人的眼睛感覺(jué)出,所以這些波長(zhǎng)范圍的光是看不到的。凡是能被肉眼感覺(jué)到的光稱為可見(jiàn)光,其波長(zhǎng)范圍為400~780nm。

在可見(jiàn)光的范圍內(nèi),不同波長(zhǎng)的光刺激眼睛后會(huì)產(chǎn)生不同顏色的感覺(jué),但由于受到人的視覺(jué)分辨能力的限制,實(shí)際上是一個(gè)波段的光給人引起一種顏色的感覺(jué)。各種色光的近似波長(zhǎng)范圍如圖2-1所示。

圖2-1 各種光的波長(zhǎng)(單位:nm)

日常見(jiàn)到的日光、白熾燈光等白光就是由這些波長(zhǎng)不同的有色光混合而成的。這可以用一束白光通過(guò)棱鏡后色散為紅、橙、黃、綠、青、藍(lán)、紫七色光來(lái)證實(shí)。如果把適當(dāng)顏色的兩種光按一定強(qiáng)度比例混合,也可成為白光,這兩種顏色的光稱為互補(bǔ)光,如圖2-2所示。

圖2-2 互補(bǔ)光示意

圖2-2中,處于直線關(guān)系的兩種顏色的光即為互補(bǔ)光,如綠色光與紫紅色光互補(bǔ),藍(lán)色光與黃色光互補(bǔ)等,它們按一定強(qiáng)度比混合都可以得到白光,所以白光實(shí)際上是由一對(duì)對(duì)互補(bǔ)光按適當(dāng)強(qiáng)度比混合而成。

思考與練習(xí)2.1

一、單選題

1.人眼能感覺(jué)到的光稱為可見(jiàn)光,其波長(zhǎng)范圍是( )。

A.400~780nm

B.200~400nm

C.200~1000nm

D.400~600nm

2.硫酸銅溶液呈現(xiàn)藍(lán)色是由于它吸收白光中的( )所致。

A.藍(lán)色

B.綠色

C.黃色

D.青色

3.下列關(guān)于光的認(rèn)識(shí)敘述錯(cuò)誤的是( )。

A.不同波長(zhǎng)的可見(jiàn)光具有不同顏色

B.紫外光可分為近紫外光和遠(yuǎn)紫外光

C.紫外光的波長(zhǎng)在400~780nm

D.光具有波粒二象性

二、簡(jiǎn)答題

1.簡(jiǎn)述紫外-可見(jiàn)分光光度法的特點(diǎn)。

2.紫外-可見(jiàn)分光光度法的測(cè)定依據(jù)是什么?

學(xué)習(xí)心得

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操作技能

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