第二篇　皮膚性病學(xué)基本操作技能

第三章　皮膚性病臨床檢驗(yàn)檢查技術(shù)

第一節(jié)　病理檢查

一、常規(guī)組織病理檢查

（一）適應(yīng)證

為了解疾病的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)歸、治療方法的選擇等，幾乎各種皮膚病均可行組織病理檢查。就診斷目的而言，皮膚組織病理對(duì)腫瘤、某些皮膚變性（如皮膚淀粉樣變性）、某些病毒性皮膚病（如傳染性軟疣）等具有診斷價(jià)值，即一級(jí)診斷。對(duì)許多皮膚病需結(jié)合臨床特點(diǎn)方可診斷，即二級(jí)診斷，如符合扁平苔蘚、符合天皰瘡、符合尋常狼瘡等。對(duì)一些臨床鑒別困難、病理特點(diǎn)又不明顯者，則用三級(jí)診斷，如銀屑病樣皮炎、海綿水腫性皮炎等。若一些皮損的臨床及病理改變完全無規(guī)律可循時(shí)，則只進(jìn)行描述而不作出診斷，為四級(jí)診斷。

（二）禁忌證

患有嚴(yán)重出血性疾病的患者應(yīng)避免皮膚病理檢查；嚴(yán)重瘢痕體質(zhì)者（尤其是特殊部位）應(yīng)慎重取材。

（三）步驟

1.皮損選擇

在選取皮膚組織活檢時(shí)，一般應(yīng)選擇充分發(fā)育的損害，因?yàn)樵缙诓∽兂榉翘禺愋裕砥诓∽兇蠖嗵幱诨謴?fù)或變性、壞死階段。皰疹性皮膚病及含有病原體的損害最好選新鮮皮損，避免繼發(fā)性損害。環(huán)狀損害應(yīng)選擇活動(dòng)邊緣部分。結(jié)節(jié)性損害切取標(biāo)本時(shí)應(yīng)達(dá)到足夠深度。此外，取材時(shí)應(yīng)包括一小部分正常組織，以便與病變組織對(duì)照。

2.取材方法

手術(shù)切取法適用于各種大小要求的標(biāo)本，最為常用。切取時(shí)應(yīng)注意切緣銳利整齊，切口方向盡量與皮紋一致，兩端對(duì)齊，足夠深、足夠大，避免重切，夾持時(shí)盡量位于組織兩端，以避免夾壞組織影響觀察。環(huán)鉆只適用于較小損害，或病變限于淺表處，或手術(shù)切取有困難者。削切法很少采用，可用于脂溢性角化病等淺表皮損。

3.標(biāo)本處理

切下的組織應(yīng)立即放入固定液中。常用固定液為10%甲醛，肥大細(xì)胞增生癥、痛風(fēng)等需用95%乙醇固定。若需留免疫病理標(biāo)本，應(yīng)將組織置于4℃冷生理鹽水紗布中盡快送包埋處理。若需留電鏡標(biāo)本，應(yīng)立即將標(biāo)本用刀片分割，將標(biāo)本移至滴有4℃電鏡固定液的蠟塊或玻璃板上，以眼科有齒鑷夾持，用剃須刀片分割成約1mm×1mm×1mm大小，挑選2～5塊放入4℃電鏡固定液中送檢。若需留細(xì)菌或真菌培養(yǎng)標(biāo)本，應(yīng)嚴(yán)格無菌操作，優(yōu)先留取培養(yǎng)標(biāo)本后再處理其他標(biāo)本。

（四）注意事項(xiàng)

1.活檢術(shù)后避免接觸水，盡量減少出汗。

2.如有出血或感染，應(yīng)給予緊急處理，或到醫(yī)院就診。

二、免疫病理檢查

（一）適應(yīng)證

大皰性皮膚病、結(jié)締組織病、血管炎等免疫性皮膚病，某些病原體檢測(cè)及腫瘤的鑒別診斷。

（二）禁忌證

嚴(yán)重出血性疾病應(yīng)避免皮膚取材和直接免疫熒光檢查。

（三）步驟

1.標(biāo)本取材

同常規(guī)組織病理檢查。直接免疫熒光檢查，需將皮膚標(biāo)本用濕潤(rùn)的生理鹽水紗布包裹，4℃下盡快送檢。多數(shù)免疫酶標(biāo)法可用普通病理方法制備的石蠟包埋的組織塊為檢驗(yàn)材料。

2.直接免疫熒光法（direct immunofluorescence，DIF）

主要用于檢測(cè)病變組織中存在的抗體或補(bǔ)體。將冷凍切片組織固定于玻片上，滴加熒光標(biāo)記的抗人免疫球蛋白抗體或抗C3抗體等，經(jīng)孵育、清洗等處理后，置于熒光顯微鏡下觀察。若組織中有人免疫球蛋白或C3沉積，則熒光抗體與之結(jié)合呈現(xiàn)熒光。

3.間接免疫熒光法（indirect immunofluorescence，IIF）

主要用于檢測(cè)血清中存在循環(huán)的自身抗體，并可做抗體滴度分析。底物取自正常人皮膚或動(dòng)物組織（如鼠肝切片），將患者血清滴于底物上，再滴加熒光標(biāo)記的抗人免疫球蛋白抗體等，熒光顯微鏡下觀察。若血清中存在循環(huán)的特異抗體，熒光標(biāo)記的抗人免疫球蛋白抗體與結(jié)合到底物上的抗體結(jié)合，呈現(xiàn)熒光。

4.免疫酶標(biāo)記法

有多種不同的檢測(cè)系統(tǒng)和方法。機(jī)制與間接免疫熒光法類同，但顯示系統(tǒng)為可催化成色反應(yīng)的辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等。主要標(biāo)記細(xì)胞的某種特異性成分，用于腫瘤的鑒別診斷。

（四）注意事項(xiàng)

DIF取材注意事項(xiàng)同皮膚組織病理檢查。