學(xué)習(xí)活動(dòng)2 植物組織培養(yǎng)實(shí)訓(xùn)室的設(shè)備配備

【學(xué)習(xí)目標(biāo)】 1．能按照實(shí)際情況配備植物組織培養(yǎng)實(shí)訓(xùn)室的設(shè)備。

2．熟識(shí)植物組織培養(yǎng)實(shí)訓(xùn)室的常規(guī)設(shè)備及工具。

3．能正確使用植物組織培養(yǎng)實(shí)訓(xùn)室的各種設(shè)備及工具。

【學(xué)習(xí)準(zhǔn)備】 植物組織培養(yǎng)實(shí)訓(xùn)室常用設(shè)備、常用工具。

【學(xué)習(xí)過程】

問題

綠苑生物科技有限公司計(jì)劃拓展科研生產(chǎn)領(lǐng)域，需建立植物組織培養(yǎng)實(shí)訓(xùn)室，能滿足實(shí)驗(yàn)研究、小規(guī)模生產(chǎn)及員工培訓(xùn)的需要。專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)該如何為實(shí)訓(xùn)室配備設(shè)備？

基本知識(shí)

一、植物組織培養(yǎng)實(shí)訓(xùn)室設(shè)備配備的原則

1．根據(jù)實(shí)訓(xùn)室的建設(shè)規(guī)模配備。

2．根據(jù)實(shí)訓(xùn)室的功能定位配備。

3．根據(jù)建設(shè)單位的資金實(shí)力配備。

4．根據(jù)建設(shè)單位的技術(shù)研發(fā)力量配備。

二、植物組織培養(yǎng)實(shí)訓(xùn)室常用設(shè)備

（一）洗滌設(shè)備

1．洗滌池：用于各種器具、玻璃器皿、植物材料的清洗。

2．洗瓶機(jī)：主要用于玻璃器皿的清洗。

3．沖瓶機(jī)：主要用于玻璃器皿的沖洗。

（二）制水設(shè)備

1．蒸餾水器：用以制備蒸餾水，供植物組織培養(yǎng)用。

以HS·ZⅡ型電熱蒸餾水器為例，其安裝及操作方法如下。

（1）先將冷凝器安裝在蒸發(fā)鍋上，注意將密封墊圈墊好，扣好壓扣。

（2）用硅橡膠管接通以下水路：

①水源至冷凝器進(jìn)水口。

②冷凝器出水彎管對(duì)準(zhǔn)回水漏斗。

③漏斗泄水管至下水槽或貯水箱。

④蒸餾水出口至盛水容器。

圖2-2-1蒸餾水器

（3）關(guān)閉蒸餾水器放水龍頭，開啟自來水龍頭，使自來水經(jīng)冷凝器流入回水漏斗，并注入蒸發(fā)鍋內(nèi)，直至水位上升到水位鏡處，暫關(guān)閉水源。

（4）開啟電源開始加熱，當(dāng)從水位鏡看到水開始沸騰時(shí)，慢慢打開水源，水流由小到大逐漸調(diào)整，開始有蒸餾水流出，一般以冷凝器回水溫度在75℃以上為宜。若冷凝水流太大，會(huì)溢出回水漏斗；若冷凝水流太小，熱蒸汽來不及冷凝會(huì)沖起冷凝器攔水帽。

（5）為確保蒸餾水質(zhì)量，第一次使用應(yīng)經(jīng)過6 h的預(yù)蒸餾，以后每次使用也需30 min的預(yù)蒸餾。

（6）蒸餾水制取結(jié)束時(shí)，先關(guān)閉電源，再關(guān)閉水源。

（7）使用完畢，打開蒸餾水器放水龍頭，將蒸餾水器內(nèi)的剩水排干凈，保持干燥清潔。

注意事項(xiàng)：

（1）蒸餾水器必須接好地線。

（2）水源水質(zhì)必須符合生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。

（3）在蒸餾水器制水過程中，水源不得中斷，以防電熱管被燒壞。

（4）蒸餾水接水膠管的管口不得浸入容器內(nèi)的蒸餾水中。

（5）先加水，后通電。

（6）制水過程中人不要離開。

2．超純水機(jī)：用以制備超純凈水，供植物組織培養(yǎng)研究用。

（三）化學(xué)試劑貯藏設(shè)備

1．冰箱

供貯放母液和在常溫下易變性的試劑、細(xì)胞組織、植物材料；也可制取冰塊，在長(zhǎng)途采集植物材料時(shí)用于低溫保存。

2．冷藏箱

供貯放母液和在常溫下易變性的試劑、細(xì)胞組織、植物材料。

圖2-2-2超純水機(jī)

圖2-2-3冷藏箱

（四）稱量設(shè)備

用于稱量化學(xué)試劑，可放置于藥品貯存室或?qū)ｉT的稱量室內(nèi)。

1．托盤天平、分析天平

2．電子天平

（五）培養(yǎng)基配制設(shè)備

1．電磁爐

用于培養(yǎng)液制備時(shí)物質(zhì)的加熱溶解。

2．磁力攪拌器

用于溶液的均勻攪拌。

3．營(yíng)養(yǎng)液灌裝機(jī)

用于營(yíng)養(yǎng)液的快速定量分裝。

4．酸度計(jì)

用于營(yíng)養(yǎng)液酸堿度的測(cè)定。

5．恒溫水槽

用于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的溶解。

（六）滅菌設(shè)備

1．高壓滅菌鍋

圖2-2-4電子天平

圖2-2-5磁力攪拌器

用于培養(yǎng)基、玻璃器皿、器械用具的滅菌及無菌水的制取，置于滅菌室內(nèi)。高壓滅菌鍋有手提式、立式、臥式等類型。

圖2-2-6恒溫水槽

圖2-2-7手提式高壓滅菌鍋

圖2-2-8立式高壓滅菌鍋

圖2-2-9臥式高壓滅菌鍋

（1）手提式Y(jié)X-280D壓力蒸汽滅菌器的使用方法。

①加水。向容器內(nèi)加入適量清潔水，保證水面比電熱管高3~5 cm。有制備蒸餾水條件的可加入蒸餾水。

②放入滅菌物品。將需要滅菌的物品放入滅菌桶內(nèi)，物品不要擠壓，應(yīng)留有一定空隙，以利于蒸汽滲透，保證滅菌質(zhì)量。

③加蓋密封。將滅菌桶放入容器內(nèi)，然后把容器蓋上的軟管插入滅菌桶內(nèi)半圓槽內(nèi)，將容器蓋與容器上的耳槽對(duì)正，并用扳手將6對(duì)蝶形螺栓對(duì)角線逐對(duì)擰緊，使蓋與容器密合。

④加熱滅菌。

a．將電源插頭插入電源插座，將放氣閥小手柄扳起，以排出容器內(nèi)的冷空氣。

b．開啟預(yù)熱開關(guān)，預(yù)熱指示燈亮，等到有較急的蒸汽從放氣閥噴出時(shí)將放氣閥小手柄扳下，隨著加熱的繼續(xù)進(jìn)行，壓力表的指針開始上升。

c．當(dāng)壓力表指針達(dá)到滅菌所需的壓力位置時(shí)，將壓力控制旋鈕調(diào)節(jié)到滅菌所需的壓力位置。

d．將定時(shí)器旋鈕順時(shí)針旋至超過所需滅菌時(shí)間約10 min，然后再回旋至滅菌所需的時(shí)間位置。

e．關(guān)閉預(yù)熱開關(guān)，開啟定時(shí)開關(guān)，滅菌器進(jìn)入恒溫恒壓狀態(tài)，其間加熱指示燈亮、滅交替顯示。

f．當(dāng)達(dá)到設(shè)定滅菌時(shí)間時(shí)，加熱電源自動(dòng)關(guān)閉，加熱指示燈滅，并發(fā)出聲響以提示，此時(shí)關(guān)閉定時(shí)開關(guān)，滅菌結(jié)束。

⑤冷卻。滅菌終止后先斷開電源，然后用扳手慢慢扳起小手柄排汽，一定要慢，待壓力表指針回到0位后再開啟容器蓋。

（2）WS系列臥式壓力蒸汽滅菌器的安裝及使用方法。WS系列臥式壓力蒸汽滅菌器是利用飽和蒸汽對(duì)物品進(jìn)行滅菌的設(shè)備，結(jié)構(gòu)形式為臥式，加熱方式為電加熱及蒸汽加熱，由滅菌室、夾套、外殼、門、蒸汽發(fā)生器、管路系統(tǒng)、控制系統(tǒng)、指示系統(tǒng)和電源系統(tǒng)等組成。

①安裝。

a．滅菌器在安裝時(shí)四周應(yīng)留有余地，以便操作和維修，滅菌器門打開后的尺寸為200 cm×93 cm×182 cm。

b．滅菌器的進(jìn)、出水管應(yīng)分別與自來水給水管、下水排水管連接，便于日常操作。

c．排氣管應(yīng)接至室外，以免霧氣彌漫于室內(nèi)，影響工作。

②使用方法

a．上水：打開水源閥。

b．上電：將電源開關(guān)推上，電源燈、進(jìn)水燈亮起，開始自動(dòng)進(jìn)水，至高水位后進(jìn)水燈熄滅，蜂鳴器響起（若需關(guān)閉蜂鳴器，可順時(shí)針旋轉(zhuǎn)計(jì)時(shí)器）。

c．?dāng)[放滅菌物品：將需滅菌的物品放置于滅菌室，物品不能擠壓，以利于蒸汽滲透，保證滅菌效果。

d．密閉：將門關(guān)上，順時(shí)針方向扳動(dòng)鎖緊手柄至中方位，并使撐檔進(jìn)入門圈內(nèi)，然后順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)手輪轉(zhuǎn)盤，使門和墊圈密合，當(dāng)聽到聲響時(shí)，說明門已密合，此時(shí)門指示燈亮起。

e．設(shè)置滅菌溫度和時(shí)間：根據(jù)滅菌物品進(jìn)行選擇。

f．啟動(dòng)：按啟動(dòng)鍵，此時(shí)啟動(dòng)燈亮、門燈亮、加熱燈亮，滅菌器自動(dòng)啟動(dòng)。

g．計(jì)時(shí)：當(dāng)滅菌室溫度達(dá)到所設(shè)置的溫度要求時(shí)，滅菌指示燈亮起，計(jì)時(shí)器開始自動(dòng)計(jì)時(shí)。

滅菌過程中各指示燈顯示如下：電源指示燈亮——門指示燈亮——進(jìn)水指示燈熄——啟動(dòng)指示燈亮——加熱指示燈亮——滅菌指示燈熄（加熱指示燈熄時(shí)，滅菌指示燈亮）

h．結(jié)束：當(dāng)達(dá)到滅菌時(shí)間時(shí)，即計(jì)時(shí)器歸零，加熱、滅菌指示燈熄，蜂鳴器響起，滅菌器自動(dòng)泄壓，等內(nèi)層壓力為0時(shí)，逆時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)手輪轉(zhuǎn)盤，再逆時(shí)針方向扳動(dòng)鎖緊手柄，使撐檔移出門圈，將門開啟。

溶液等物品在滅菌結(jié)束時(shí)，為了防止滅菌器自動(dòng)泄壓使滅菌室壓力突然降低，引起瓶?jī)?nèi)液體劇烈沸騰，可在計(jì)時(shí)器結(jié)束前手動(dòng)關(guān)閉電源開關(guān)，使溫度和壓力自然降低。但對(duì)培養(yǎng)基而言，可能會(huì)使高溫時(shí)間過長(zhǎng)，影響瓊脂的凝固性和培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)，因此，可在關(guān)閉電源后，慢慢地手動(dòng)開啟滅菌器后部的緊急閥，使熱蒸汽慢慢散出。

i．冷卻取物：待滅菌物品稍冷卻后，將其取出并轉(zhuǎn)移至接種室備用。

2．紫外線消毒車

紫外線消毒車是裝有紫外線燈及滅菌定時(shí)器的可移動(dòng)裝置，根據(jù)紫外線照射滅菌需要，靈活使用。

3．恒溫干燥箱

恒溫干燥箱用于干凈玻璃器皿的干燥滅菌，可以用80℃~100℃的溫度，也可以用160℃~180℃的溫度，進(jìn)行1~3 h的高溫干燥滅菌。

圖2-2-10紫外線消毒車

圖2-2-11恒溫干燥箱

（七）接種室設(shè)備

1．超凈工作臺(tái)

用于植物組織培養(yǎng)材料的接種。

2．器械滅菌器

用于接種工具的消毒滅菌。

3．醫(yī)用小平車

用于培養(yǎng)瓶的轉(zhuǎn)移推送。

4．生物安全柜

操作具有感染性的實(shí)驗(yàn)材料時(shí)，用來保護(hù)操作者、實(shí)訓(xùn)室環(huán)境以及實(shí)驗(yàn)材料的生物安全設(shè)備。

5．潔凈傳遞窗

安裝于緩沖室至接種室之間的隔墻上，用于接種期間向接種室傳遞物品。

6．風(fēng)淋室

安裝于緩沖室的入口處，起到氣閘的作用，在接種期間啟用。

圖2-2-12超凈工作臺(tái)

圖2-2-13器械滅菌器

圖2-2-14醫(yī)用小平車

圖2-2-15生物安全柜

圖2-2-16潔凈傳遞窗

圖2-2-17風(fēng)淋室

（八）培養(yǎng)設(shè)備

1．培養(yǎng)架

用于放置培養(yǎng)瓶。

2．空調(diào)

用于控制培養(yǎng)室的溫度。培養(yǎng)室的溫度一般要求常年保持（25±2）℃。

圖2-2-18培養(yǎng)架

圖2-2-19空調(diào)

3．加濕器

在植物材料培養(yǎng)期間，向室內(nèi)霧化加濕，減緩培養(yǎng)基干縮。

4．智能環(huán)境控制系統(tǒng)

用于培養(yǎng)室及煉苗室光、溫、水、氣條件的自動(dòng)控制。

圖2-2-20加濕器

圖2-2-21振蕩培養(yǎng)箱

5．培養(yǎng)箱

用于植物原生質(zhì)體和酶制劑的保溫或植物的暗培養(yǎng)，有振蕩培養(yǎng)箱、光照培養(yǎng)箱、恒溫培養(yǎng)箱等類型。振蕩培養(yǎng)箱在液體培養(yǎng)時(shí)可改善通氣狀況。

6．電子溫濕度計(jì)

用于測(cè)定培養(yǎng)室內(nèi)的溫度和濕度。

圖2-2-22光照培養(yǎng)箱

圖2-2-23恒溫培養(yǎng)箱

圖2-2-24電子溫濕度計(jì)

（九）馴化、移栽設(shè)備

包括智能溫室、移栽苗床等設(shè)施設(shè)備。

（十）觀察設(shè)備

1．顯微鏡

2．解剖鏡

用于胚胎培養(yǎng)、莖尖培養(yǎng)時(shí)剝?nèi)⊥庵搀w。

圖2-2-25智能溫室