離子色譜法測定白酒中氰化物的方法研究

劉廣福^*，谷巖

（遼寧省食品檢驗檢測院，沈陽10015）

白酒作為中國特有的一種蒸餾酒，有著5000多年的悠久歷史，歷經幾千年的發展已成為我國民族的瑰寶，體現著中國傳統的深厚文化內涵和豐富的偉大歷史^[1]。經過長期的發展，我國白酒企業規模日益提升，但在產業高增長的同時，白酒質量問題日益顯現。據報道，2014年浙江抽查的460批次白酒中發現3.9%氰化物超標；而在此之前，河南省食藥監局剛剛通報，河南省大河酒業有限公司生產的產品沱牌酒，檢出氰化物超標兩倍多。屢被曝光的“氰化物超標”問題令老百姓對白酒采購望而卻步。食品安全國家標準GB2757—2012中對氰化物的限量值為8mg/L^[2]（以HCN計算，按照100%酒精度折算）。

氰化物是指帶有氰基（CN^?）的化合物，俗稱山柰或山埃。企業生產的白酒中的氰化物一般來自生產原料，如用野生植物根莖、木薯等直接釀酒，在釀酒過程中會產生氫氰酸，導致氰化物含量超標；或是一些勾兌的低檔酒，使用了氰化物含量超標的木薯食用酒精造成的。氰化物作為“毒藥之王”，氰化物容易引起中毒，輕者嘔吐、流涎、氣促、腹瀉，重者呼吸困難、昏迷、全身抽搐，甚至死亡^[3]。目前，國家唯一指定的氰化物檢測方法為GB/T5009.48的分光光度法^[4]，該法普及率高、所需儀器簡單，但在實際操作中存在許多問題：樣品處理過程繁瑣，操作復雜，費時，很多樣品在試驗過程中出現渾濁現象，從而導致結果無法測定，方法靈敏度較低等^[5-6]。針對上述問題，本文采用離子色譜法測定白酒中氰化物含量，本法操作簡便、快速、結果準確可靠、實驗過程不用有毒試劑，減少了二次污染，豐富了白酒中氰化物的檢測方法^[7-9]。本研究對白酒中氰化物的檢測方法進行了方法學考察，結果表明該方法準確、可靠，為白酒質量監管工作提供了檢測技術依據。

1　試驗部分

1.1　儀器與設備

離子色譜儀，型號：ICS-5000⁺（帶電化學檢測器），公司：美國熱電公司；氮氣吹掃儀，型號：TTL-DC，公司：北京同泰聯科技發展有限公司；超純水處理系統，型號：MILLI-Q-POD，公司：美國MILLIPORE公司。

1.2　材料與試劑

氰根標準品（50.0μg/ml）：中國計量科學研究院；12種不同品牌白酒：市售；超純水（電導率為18.2MΩ·cm）；氫氧化鈉（CAS：1310-73-2）：Fluka。

1.3　試驗方法

1.3.1　樣品前處理方法

準確量取白酒樣品1.0ml于10ml比色管中，于45℃氮吹10min（除去乙醇及酯類），將樣品完全移入容量瓶（100ml）中，并用高純水定，經0.22μm尼龍濾膜過濾后，直接進入離子色譜儀分析，測定氰化物含量。

1.3.2　色譜條件

色譜柱：Dinonex IonPac^TM AS11-HC；保護柱：Dinonex IonPac^TM AG11-HC；檢測器：脈沖安培檢測器（Ag/AgCl參比電極，Ag工作電極）；流動相：（12mmol/L）NaOH等度洗脫；流速：1.0ml/min；柱溫：30℃；進樣量：25μl^[7]。

1.3.3　標準曲線和檢出限

采用外標法定量，將50.0μg/ml的氰根標準品溶液稀釋成濃度（μg/L）為1.0、5.0、10.0、50.0、100.0、500.0的標準系列溶液，檢測結果以濃度（μg/L）為橫坐標、峰面積（A）為縱坐標，進行標準曲線繪制，檢出限取3倍信噪比時所對應的氰根濃度^[8]。

1.3.4　精密度和重現性

取5.0μg/L的氰根離子標準品溶液，連續測定6次，計算其保留時間標準偏差。取同批次樣品，平行試驗制備6份加標樣品，進行檢測，計算其峰面積重復性（RSD）。

1.3.5　回收率試驗

取3份白酒樣品，分別添加0.5μg、1.0μg、5.0μg的氰根標準品，進行氰根的加標回收測定，通過計算求出平均回收率。

1.3.6　樣品含量測定

將市場購買的不同品牌白酒樣品按 1.3.1 方法處理，進行檢測，計算出白酒中氰化物的含量。

2　結果討論

2.1　檢測器及淋洗液條件的選擇

電化學檢測器利用氰根在銀電極表面的反應電流變化實現檢測，具有較好選擇性和極高靈敏度。通過實驗可發現，當施加的電極電位在?0.15V與?0.05V之間時，氰根靈敏度處于平臺穩定區域，因此方法選定氰根離子的檢測電位為?0.10V。由于試驗通常在強堿性條件下進行，因此本實驗選用氫氧根體系陰離子色譜柱。通過實驗可知，在最常見的IonPacAS11-HC高容量陰離子色譜柱上，當淋洗液濃度為10～15mmol/L時，常見共存離子如硫離子、氯離子、硫酸、亞硫酸等均不干擾氰根的測定。實驗中選擇濃度為12mmol/L氫氧化鈉等度淋洗，單次進樣分析時間可以控制在7min內完成。

2.2　白酒中乙醇濃度的影響

白酒中乙醇含量極高，通常為 30%～70%，這一特點嚴重影響氰根出峰時間和響應。對氰根濃度為50μg/L進行研究，結果顯示，乙醇濃度為0～70%時，其保留時間均無明顯差別，但其峰高響應則有較大差異。當乙醇濃度小于1%時，響應變化小于0.1%，影響基本可以忽略。當乙醇濃度到2%時，氰化物峰高響應降低約2%。而濃度進一步增加到10%時峰高響應則降低達5%，影響其測定的準確性。因此采用百倍樣品稀釋處理，此時進樣樣品中乙醇含量均能小于1%，結果較為準確。

2.3　線性關系考察

通過氰根標準品系列溶液分析，用質量濃度（c）和峰面積（A）進行線性方程回歸，其相關結果見表1。氰根在濃度為1～500μg/L時具有良好的線性關系，其中相關系數為0. 9992，檢出限為0.5μg/L。

2.4　精密度、重復性和加樣回收率

經測定，氰根的保留時間標準偏差為0.18%，取同一空白樣品，制成6份加標樣品，進行檢測，重復性試驗RSD為0. 67%。經測定，氰根的平均加標回收率為98.5%（RSD為0.36%），回收率結果見表2。

2.5　白酒中氰化物的含量

分別對市場上購買的不同品牌白酒樣品進行測定，其氰化物含量均未檢出，結果表明，本次檢測的12種不同品牌白酒中氰化物含量，其結果均符合國家標準要求。

3　結論

本文建立了一種測定白酒中氰化物方法：取白酒樣品1.0ml于10ml比色管中，于45℃氮吹10min（除去乙醇及酯類），將樣品完全移入容量瓶（100ml）中，并用高純水定，經0.22μm尼龍濾膜過濾后，直接進入離子色譜儀分析，測定氰化物含量。

該方法操作簡便、快速、結果準確可靠、實驗過程中不使用有毒試劑，避免了二次污染。結果表明，使用本方法測定白酒中氰化物的含量，其平均回收率高于98%，有較高的精密度和準確度，與國標GB/T5009.48規定的分光光度法相比，本法操作更簡單，實用性更強，檢測結果更準確可靠，更適于檢驗機構進行白酒中氰化物的批量檢測工作。

參考文獻

[1] 程勁松, 李春揚. 食品安全質量檢測學報, 2014, 5(7): 2248-2262.

[2] GB2767—2012. 食品安全國家標準蒸餾酒及其配制酒[S]. 2012.

[3] 胡明燕, 車明秀, 劉睿, 等. 釀酒科技, 2014, 10: 105-107.

[4] GB/T 5009.48—2003. 蒸餾酒及配制酒衛生標準的分析方法[S]. 2003.

[5] 王慧, 張靜, 武瑾瑜, 等. 釀酒科技, 2013, 9: 59-60.

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[7] 尤素群, 鐘志京, 劉秀華, 等. 四川大學學報(自然科學版), 2006, 43(6): 1352-1356.

[8] 王碩, 劉廣福, 孫蕊, 等. 軍事醫學科學院院刊, 2006, 30(3): 288-291.

[9] 王明國, 李社紅, 肖唐付, 等. 軍事醫學科學院院刊, 2006, 30(3): 288-291.

^*通信作者：劉廣福，男，工程師，食品分析與檢測，E-mail：gfliu_neu@126.com