丁酸氯維地平原料藥殘留溶劑的測定

袁慧雅，徐恩宇，高利娜，劉俊亭^*

（中國醫科大學法醫毒物分析教研室，沈陽 110122）

丁酸氯維地平（Clevidipine Butyrate）的化學名為4-(2,3-二氯苯基)-1,4-二氫-2,6-二甲基-3,5-吡啶二甲酸甲基(1-丁酰氧基)甲酯，為白色結晶粉末，是一種新型超短效二氫吡啶類鈣離子拮抗劑^[1]。易溶于甲醇、乙醇、乙醚等極性有機溶劑，難溶于水。丁酸氯維地平注射乳劑于2008年在美國上市^[2]，國內藥品尚在研發階段，其殘留溶劑測定方法未見文獻報道。本實驗建立了頂空氣相色譜法測定其合成工藝中使用的乙醇、異丙醇、乙酸乙酯等有機溶劑殘留量。

1　儀器與試劑

Agilent 7890A氣相色譜儀（美國Agilent公司），色譜柱為DB-624（30m×530μm×3μm，Agilent）石英毛細管柱；BT 25S分析天平（賽多利斯公司）。

所用試劑均為色譜純，其中無水乙醇、異丙醇購自天津康科德化學試劑廠；乙酸乙酯購自山東禹王實業有限公司化工分公司；丁酸氯維地平原料藥（某藥廠提供，批號：151101）。

2　方法和結果

2.1　溶液配制

2.1.1　對照品儲備液

精密稱取乙醇2.5g、異丙醇2.5g、乙酸乙酯2.5g，置同一50ml量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。

2.1.2　對照品溶液

精密量取對照品儲備液1ml，置50ml量瓶中，加二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.1.3　供試品溶液

取丁酸氯維地平原料藥0.4g，精密稱定，置20ml頂空瓶中，加入2ml二甲基亞砜溶解，壓蓋密封，作為供試品溶液。

2.2　色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：DB-624（30m×530μm×3μm，Agilent）石英毛細管柱；檢測器：氫火焰離子化檢測器（FID）；柱溫：程序升溫，初始溫度50℃（保持10min），以40℃/min速率升至200℃（保持5min）；進樣口溫度：200℃；檢測器溫度：250℃；載氣：氮氣，流速為2ml/min；頂空進樣量：1ml；分流比：5 : 1；頂空平衡溫度：100℃；頂空平衡時間：30min。

按上述色譜條件，精密量取對照品溶液2ml，置20ml頂空瓶中，進樣分析記錄色譜圖，乙醇、異丙醇、乙酸乙酯之間分離度應不小于1.5，理論板數不低于5000。

2.3　專屬性試驗

精密量取空白二甲基亞砜溶劑、對照品溶液、供試品溶液各2ml，分別置20ml頂空瓶中，按殘留溶劑檢查色譜條件進樣，記錄色譜圖1～圖3。結果表明各成分之間分離度均符合要求，丁酸氯維地平及空白溶劑對殘留溶劑的檢查無干擾，本方法專屬性良好。

2.4　檢測限和定量限

將對照品溶液用二甲基亞砜逐級稀釋，分別頂空進樣，記錄色譜圖。按信噪比為10計算，乙醇、異丙醇、乙酸乙酯的定量限分別為0.80μg/ml、2.00μg/ml、1.20μg/ml。按信噪比為3計算，3種溶劑檢測限分別為0.25μg/ml、0.65μg/ml、0.40μg/ml。

2.5　線性和范圍

分別精密量取對照品儲備液0.5ml、0.8ml、1.0ml、1.2ml和1.5ml于50ml量瓶中，用二甲基亞砜稀釋至刻度，搖勻，即得對照品系列標準溶液。分別精密量取上述系列標準溶液2ml，按殘留溶劑檢查色譜條件進樣。以質量濃度（c，μg/ml）為橫坐標，以峰面積（A）為縱坐標進行線性回歸，結果見表1，各溶劑在相應的濃度范圍內線性關系均良好。

2.6　回收率試驗

取丁酸氯維地平原料藥（批號：151101）0.4g，精密稱定，置20ml頂空瓶中，分別精密加入對照品儲備液配制成濃度為800μg/ml、1000μg/ml、1200μg/ml的溶液，每個濃度平行制備3份，壓蓋密封，按殘留溶劑檢查色譜條件進樣分析，乙醇、異丙醇、乙酸乙酯的平均回收率分別為97.1%、97.0%、86.8%。

3　討論

3.1　溶劑的選擇

原料藥殘留溶劑測定常采用N, N-二甲基甲酰胺（DMF）或二甲基亞砜（DMSO）等“萬能溶劑”，因其對于不同種類的殘留溶劑均有良好的溶解性。因DMF在藥物合成過程中有所使用，故本實驗采用二甲基亞砜作為溶劑避免實驗誤差。

3.2　有機溶劑種類和限度的確定

待測有機溶劑種類的確定主要根據藥物合成工藝和《中國藥典》2015年版Ⅳ部通則0861的限度要求。藥典規定乙醇、異丙醇、乙酸乙酯均不得過0.5%，故該原料藥應符合以上標準。

參考文獻

[1] Li L, Bi K S, Hu X. Chinese J New Drugs, 2010, 19(12): 1003-1006.

^*通信作者：劉俊亭，男，教授，博士生導師，研究方向法醫毒物分析，E-mail: liujunting8@163.com