技能實訓1.1 薄層色譜練習
【實驗目的】
掌握薄層色譜板的制備方法和薄層色譜操作技術。
【實驗原理】
硅膠薄層屬于吸附薄層色譜,利用硅膠對不同化合物吸附能力的差異,進行分離。
【實驗儀器和試劑】
1.儀器:載玻片,燒杯,點樣毛細管,色譜缸,圓形標本缸,吹風機,玻璃板10cm×20cm,研缽。
2.試劑:硅膠G,羧甲基纖維素鈉,甲基橙0.1%乙醇溶液,正丁醇,95%乙醇,蒸餾水。
【實驗方法與步驟】
1.薄層板制備
取玻璃板1塊,清洗干凈。稱取硅膠G5g,加15mL 0.6%CMC-Na溶液,倒入研缽中攪拌均勻,傾倒在玻璃板上,輕輕振蕩,均勻鋪開,放置陰干后,放入烘箱110℃烘30min,取出后置干燥箱中備用。
2.點樣
取鋪好的薄層板一塊,底部1cm處畫線,標出點樣點位置,用點樣毛細管取1管0.1%甲基橙乙醇溶液,少量多次點樣。
3.展開劑配置
正丁醇∶乙醇∶水=10∶1∶1體積比配置12mL。
4.展開
將展開劑倒入色譜缸當中,蓋上蓋子飽和15min,將點好樣的薄層板放入展開,溶劑展開至薄層板頂端后取出,用鉛筆描出溶劑前沿,用吹風機吹干。
5.計算Rf值。
【實驗結果與分析】
1. Rf記錄。
2.硅膠薄層色譜中化合物極性與Rf值之間的關系。