第二部分 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容

實(shí)驗(yàn)一 茯苓多糖、豬苓多糖和淀粉的水解和鑒定

（一）茯苓多糖和豬苓多糖的水解和鑒定

【原理】

茯苓多糖、豬苓多糖，分別是中藥茯苓和豬苓的主要成分。茯苓多糖是含有β-1,3糖苷和β-1,6糖苷鍵的葡聚糖。豬苓多糖是水溶性多聚糖。它們經(jīng)濃硫酸脫水產(chǎn)生糠醛或糠醛衍生物，它們?cè)跐鉄o機(jī)酸作用下，能與α-萘酚生成紫紅色縮合物（Molish反應(yīng)）。

茯苓多糖和豬苓多糖都是無還原性多糖，當(dāng)它們用酸水解后，則生成還原性單糖。利用班氏試劑與其作用，可分別生成氧化亞銅磚紅色沉淀，以反映其水解。

【操作】

（1）分別取2%茯苓懸濁液和2%豬苓懸濁液1mL置于小試管中，加莫氏（Molish）試劑3滴，混勻，將試管傾斜，沿管壁逐滴加入濃硫酸15滴，慢慢直立試管，觀察兩層處有否紫紅色環(huán)出現(xiàn)。

（2）分別取2%茯苓懸濁液2mL置試管內(nèi)，加濃鹽酸10滴，置沸水浴中10分鐘，然后加20%NaOH中和之（用pH試紙檢測(cè)），此即為兩種不同的水解液。

（3）取試管4支，編號(hào)，按表2-1-1加入試劑。

混勻，置沸水浴中3～5分鐘，觀察其變化并解釋之。

【試劑】

（1）2%茯苓懸濁液：稱取1g茯苓粉，加水調(diào)勻，傾入沸水，邊加邊攪，總水量為100mL，煎煮至50mL。

（2）2%豬苓懸濁液：制備方法同茯苓懸濁液。

（3）莫氏（Molish）試劑：稱取α-萘酚5g溶于95%酒精中，并稀釋到100mL，需新鮮配制。

（4）濃硫酸。

（5）濃鹽酸。

（6）20%NaOH溶液。

（7）pH試紙。

（8）班氏試劑：取硫酸銅（CuSO4·5H2O）17.3g溶于100mL水中，另以檸檬酸鈉173g，無水碳酸鈉100g溶于700mL水中。將上述兩溶液合并，用水稀釋至1000mL。

（二）淀粉的水解和鑒定

【原理】

淀粉是多糖，由多個(gè)葡萄糖分子聚合而成，它遇碘呈藍(lán)色（在中性或酸性環(huán)境中）。淀粉在酸或酶的作用下，水解成不同程度的寡糖，最終水解為葡萄糖（或麥芽糖）。后者具有還原性，可使堿性硫酸銅還原生成磚紅色或棕黃色的氧化亞銅沉淀。通過單糖的還原作用可判斷多糖的水解。其反應(yīng)過程如下：

淀粉 →糊精 →麥芽糖 →葡萄糖

【操作】

取1%淀粉液10mL置于小燒杯內(nèi)，加入濃鹽酸8滴，放在石棉網(wǎng)上加熱，每隔2分鐘，用滴管取出1小滴放在白瓷板上，加碘液1滴，觀察其顏色，直到無藍(lán)色為止。然后取下燒杯，加入20%NaOH中和，加入鹽酸（用pH試紙檢測(cè)）。再取試管2支，編號(hào)，按表2-1-2加入試劑。

置沸水浴中3分鐘，觀察顏色變化并解釋之。

【附注】

氧化亞銅沉淀由于其沉淀速度、顆粒大小不同而有顏色的差別，顆粒大的為紅色，顆粒小的為黃色。

【試劑】

（1）1%淀粉液：稱取淀粉（AR）1g置于燒杯內(nèi)，加水100mL，邊加熱邊攪拌，呈透明溶液為止。

（2）碘試劑：稱取碘化鉀20g及碘10g溶于100mL水中。使用時(shí)再稀釋10倍。

（3）班氏試劑：同前。

（4）濃鹽酸。

（5）20%NaOH溶液。

（6）pH試紙。