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三、實驗內容

(一)蟾蜍胸骨劍突軟骨細胞液泡系活體染色及觀察

1.原理

在動物細胞內,凡是由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系,包括內質網、高爾基復合體、溶酶體、過氧化物酶體、轉運泡、吞噬泡等。軟骨細胞內含有較多的粗面內質網和發達的高爾基復合體,能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等,因而液泡系發達。中性紅是液泡系的專一性活體染色劑,在細胞處于生活狀態時,只將液泡系染成紅色,細胞質和細胞核不被染色,中性紅染色可能與液泡系中的蛋白質有關。

2.方法

取1只蟾蜍,破壞腦和脊髓,剪開胸腔,取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片,置于載玻片上,滴加1/3000中性紅染液,染色10~15min,用吸水紙吸去染液,加1滴Ringer液,蓋上蓋玻片,吸去多余Ringer液,鏡下觀察。

3.結果

顯微鏡下觀察,可見軟骨細胞為橢圓形,細胞核周圍有許多染成玫瑰紅色、大小不一的小泡,即為軟骨細胞液泡系(圖3-1)。

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圖3-1 蟾蜍胸骨劍突軟骨細胞中液泡系的顯示

(二)大白鼠脛骺軟骨細胞電鏡照片的觀察

動物細胞液泡很小,即使是活體染色也只能看出是1個小點,為了進一步看清液泡的結構,我們有必要觀察軟骨細胞的電鏡照片。

大白鼠脛骺骨細胞電鏡照片,細胞核與核仁很清楚,細胞質中有豐富的粗面內質網,液泡系發達,液泡由單層膜包圍,細胞周邊有液泡釋放。(圖3-2、圖3-3、圖3-4)

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圖3-2 電鏡下的粗面內質網

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圖3-3 電鏡下的滑面內質網

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圖3-4 電鏡下的溶酶體

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