1.2 放射免疫技術

放射免疫技術最早源于1959年3位美國科學家Roger Guillemin、Andrew V. Schally和Rosalyn Yalow利用放射線物質檢測胰島素的偶然實驗發現，他們將放射性核素可探測的靈敏度、精確性與抗原抗體反應的特異性相結合，從而創建了這類免疫測定技術。因為這個重大的發現和創新，他們共同獲得了1977年的諾貝爾生理學或醫學獎。從嚴格定義角度來講，3位科學家當年所創立的方法叫作放射免疫分析法（Radioimmunoassay, RIA），是以放射性核素標記的抗原與反應體系中未標記抗原競爭結合特異性抗體為基本原理來測定待測樣品中抗原量的一種方法，是一種放射性競爭結合分析。1968年，Miles和Hales在此基礎上開發出了用同位素標記的抗體直接檢測抗原物質的非競爭性免疫放射分析法（Immunoradiometric Assay, IRMA），將放射免疫技術的靈敏度在RIA的基礎上又提高了10～100倍，且擴展了檢測范圍，增強了反應的特異性。

總體來說，放射免疫技術具有靈敏度高、特異性強、操作簡便、樣品用量少等優點，目前廣泛應用于生物醫學、臨床診斷、農業科學、生態學、環境科學等多學科、多領域研究中，對各種微量或超微量（10-9～10-15g/mL）元素、激素、小分子藥物及腫瘤標記物等幾乎所有生物活性物質的定量分析。但由于放射線輻射和污染等缺點，限制了放射免疫技術的使用范圍。

放射免疫技術常用的放射性物質有125I、131I、3H、14C、35S、32P等，各種同位素均有其各自優缺點，實驗室往往根據自身需要及條件做相應的選擇，如3H半衰期長、能量低、易于防護、不易影響標記物質的化學性質，但標記條件要求高，需專門機構方可完成等。

下面以放射免疫分析法測試人血清中甲胎蛋白（AFP）為例，詳細介紹RIA的實驗過程。