第三章 藥用植物學實驗

實驗一 顯微鏡的構造與使用及臨時標本片的制作

【實驗目的】

1．熟悉顯微鏡的構造與使用及其注意事項。

2．熟練地正確制作臨時標本片。

【實驗試劑】

純化水，液體石蠟。

【實驗材料】

桉葉，薄荷莖及葉。

【方法與步驟】

一、顯微鏡的構造

顯微鏡的樣式較多，但它的基本構造是相同的，可分為機械裝置與光學系統兩部分。

（一）機械裝置

1．鏡座：是顯微鏡的基座，用來支持鏡體，常呈馬蹄形。

2．鏡柱：是連接于鏡座上的金屬短柱，可支持鏡臂與載物臺。

3．鏡臂：呈弓形，是用手握取的部分，與鏡柱相連，既支持鏡筒，又支持載物臺。

4．載物臺：位于顯微鏡的中部，用來安放標本片，中心有個通光孔，臺上的標本片推動器能將固定后的標本片向前后、左右移動，便于鏡檢。

5．鏡筒：是垂直的金屬圓筒，與鏡臂連接固定后，其上裝有目鏡，下連轉換器。

6．轉換器：可左右轉動的球面金屬器，其下裝有不同倍數的物鏡。

7．調節器：位于鏡臂兩側，有粗、微兩種，用以調節物鏡和標本之間的距離，使物像清晰。一般低倍鏡用粗調節器，高倍鏡用微調節器。

（二）光學系統

1．目鏡：安裝在鏡筒上端，其內可放目鏡測微尺和指針。一般它的放大倍數為5×、10×、15×等。

2．物鏡：安裝在轉換器下面，有物鏡和油鏡，低倍鏡為5×或10×，高倍鏡為40×或60×，油鏡為90×。

3．聚光器：由幾個透鏡組成，用來集中光線，位于載物臺的下方，有的是虹彩圈。

二、顯微鏡的使用

顯微鏡是一種精密的光學儀器，必須學會正確的操作方法，既有利于保護儀器，又能充分發揮顯微鏡的性能，得到良好的觀察效果。

1．取、放顯微鏡時，必須用右手握住鏡臂，左手托住鏡座，小心輕放。

2．放置顯微鏡時，應注意將鏡座放在距實驗臺邊緣6cm左右的位置，稍偏實驗者左側，右側放實驗指導和實驗本等。

3．使用時向內（逆時針方向）旋轉粗調節器提升鏡筒，然后旋轉轉換器，使低倍鏡與鏡筒成一直線。打開光源，通過目鏡可以看到白亮的圓形視野。

4．移動標本片，將欲觀察的部分對準中央孔，從右側面觀看物鏡與玻片之間的距離，慢慢往外（順時針方向）轉動粗調節器，使物鏡與玻片相距約5mm為止。切勿使鏡頭與玻片接觸，以避免損壞鏡頭和壓破玻片。

5．觀察目鏡，并慢慢向內（逆時針方向）旋轉粗調節器，至視野內出現清晰的物像為止。如所觀察部分不在視野中心，則慢慢移動載玻片，使之居于正中。

6．看到物像后，再轉動微調節器，直到看到最清楚的物像為止。

7．高倍物鏡的使用：

（1）在低倍鏡找到物像后，將欲放大做仔細觀察的部分移至視野中央。

（2）從右側面注視，小心轉動轉換器，將高倍物鏡對準玻片上欲觀察的部分。

（3）調節微調節器至看到清楚的物像為止。此時切勿使用粗調節器，否則會損壞鏡頭和壓破標本片。

（4）如果視野太暗或太亮，則應調節光柵，使光線強度適中。

8．實驗完畢，取下玻片，清潔顯微鏡，使物鏡離開中央孔，向外轉動粗調節器使鏡筒下降，一手握鏡臂，一手托鏡座，然后放入鏡箱內。

三、顯微鏡的保護及使用注意事項

（1）顯微鏡應放在干燥的地方，使用時避免強烈日光照射。

（2）拿取及搬動顯微鏡時，應一手握鏡臂，一手托鏡座，使鏡身直立，切勿傾斜搖擺，以免碰損或使目鏡滑落。

（3）顯微鏡取出后，應先檢查有無缺損。使用前用布擦干凈，鏡頭有污穢時用擦鏡紙擦拭，絕不能用手擦。

（4）使用時，鏡身應放在面前實驗臺適中位置，以利于觀察。

（5）做顯微化學反應時，必須將制片由載物臺上取下再滴加試劑，然后蓋上蓋玻片，并用吸水紙吸凈蓋玻片外的多余試劑，以避免腐蝕鏡頭和載物臺。

（6）加熱處理的制片，必須放冷后并加蓋玻片才能觀察。

（7）實驗完畢后，必須將顯微鏡全部擦凈。

四、常用臨時標本片的制作

1．蓋玻片、載玻片的清潔法：取一塊綢布，蓋于左手的拇指與食指之間，右手的拇指和食指持玻片1/3處拖擦，不得往返，直到將玻片對光視其表面無任何塵埃及指紋。再顛倒另一端用同樣方法拖擦干凈。

檢查蓋玻片、載玻片是否清潔，可在載玻片上滴1滴純化水，水呈球形即可。否則應再水洗及拖擦。每次實驗完后，所用過的蓋玻片、載玻片必須水洗與拖擦干凈，以備下次實驗使用。

2．徒手切片：操作簡便，節省時間，只需一刀片就可切成薄片，能看見材料的天然色澤。取一段長1cm～2cm的薄荷莖，以左手的拇指和食指夾住材料，中指頂住材料的底部，左臂貼身，左手固定不動，將材料上端露出食指2mm～3mm，不宜過長。用右手的拇指與食指挾持刀片的兩側，使刀片成水平方向（與材料橫切面平行），移動右臂，使刀口向內自左向右拉削，切勿來回拉切。切時可先將材料切面或刀刃潤濕，切下的薄片用毛筆刷下并放入有純化水的玻璃器皿中備用。刀片用后立即擦干水分并涂上液體石蠟，備用。

用手指難以夾住的薄的或細小的材料，如葉片、幼根及種子等，可取一段通草，在中間縱切一縫，然后夾入材料，切法同前。

觀察葉的表面觀、氣孔類型等時，可將要觀察的葉放在左手的食指上，拇指和中指壓住葉片兩端，右手持鑷子，用內側的尖刺破葉片，然后夾住材料慢慢地向外撕取（用力要均勻）。撕下一層薄膜，立即放到有純化水的載玻片上。若有卷疊，必須用解剖針弄平。再用鑷子夾住蓋玻片覆蓋，用濾紙屑吸去余液，才可置于顯微鏡下觀察。

3．裝片：在潔凈的載玻片上滴一滴純化水，選已切好的薄荷莖薄片，用鑷子放入試液中；檢查無折疊現象，方可用鑷子夾住蓋玻片的一端，另一端接觸試液逐漸蓋上；用濾紙屑吸去余液后，置于顯微鏡下觀察。蓋片時，注意不要產生氣泡。

【實驗報告】

完成實驗報告。

（李濤）