第四節　標記抗體技術

一、概念

抗原與抗體能特異性結合，但抗體、抗原分子小，在含量低時形成的抗原抗體復合物是不可見的。有一些物質即使在超微量時也能通過特殊的方法將其檢測出來，如果將這些物質標記在抗體分子上，則可以通過檢測標記分子來顯示抗原抗體復合物的存在，此種根據抗原抗體結合的特異性和標記分子的敏感性建立的技術，稱為標記抗體技術。高敏感性的標記分子主要有熒光素、酶、放射性同位素三種，由此建立免疫熒光抗體技術、免疫酶標記技術和放射免疫分析，其特異性和敏感性遠遠超過常規血清學方法，已廣泛應用于病原微生物鑒定、動物疫病的診斷與血清流行病學檢測與調查。

二、免疫熒光抗體技術

免疫熒光抗體技術是指用熒光素對抗體或抗原進行標記，然后用熒光顯微鏡觀察熒光以分析示蹤相應的抗原或抗體的方法，是將抗原抗體反應的特異性、熒光檢測的高敏感性以及顯微鏡技術的精確性三者相結合的一種免疫檢測技術。

（一）熒光抗體染色方法

（二）免疫熒光抗體技術的使用

三、免疫酶標記技術

根據抗原抗體反應的特異性和酶催化反應的高敏感性而建立起來的免疫檢測技術。酶是一種有機催化劑，催化反應過程中酶能反復作用，微量的酶即可導致大量的催化過程。常用的有辣根過氧化酶（HRP）、堿性磷酸酶、葡萄糖氧化酶等，其中以辣根過氧化物酶應用最廣。免疫酶標記技術可用以在細胞或亞細胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在微克、納克水平上測定它們的量，既特異又敏感，是目前應用最為廣泛的免疫檢測方法之一。

常用的免疫酶標記技術

四、放射免疫分析

放射免疫分析（RIA）是將放射性同位素測量的高度敏感性和抗原抗體反應的高度特異性結合起來而建立的一種免疫分析技術。

RIA具有特異性強、靈敏度高、準確性和精密度好等優點，是目前其他分析方法所無法比擬的而且操作簡便，便于標準化，其靈敏度可達納克（ng）至皮克（pg）級水平，比一般分析方法提高了1000～1000000倍。