書名: 血站技術手冊作者名: 許建榮 李聚林 江朝富本章字數: 2491字更新時間: 2020-01-03 20:46:09
第五節 去白細胞血液制備
在血液制備時去除白細胞能有效阻止絕大多數白細胞在輸血時進入受血者體內,可顯著降低FNHTR和HLA同種免疫的發生率,顯著減少輸血CMV及相關病毒的傳播,從而顯著降低輸血風險。
去除血液成分中的白細胞有多種方法。主要產品有去白細胞全血、去白細胞紅細胞和去細胞血小板。根據《血站技術操作規程(2012版)》的要求,應當使用白細胞過濾技術在采血后2天內(采血次日為第1天)完成白細胞過濾。
一、去白細胞全血制備
在三聯或四聯塑料血袋管路上配置過濾器,根據白細胞過濾器生產廠家說明書的要求進行過濾操作,在血液成分制備時將白細胞濾除。
(一)聯袋濾器式(過濾法)去白細胞全血制備的原理
血液通過連接好的白細胞過濾器,依靠重力作用自然過濾白細胞。現在的濾器利用濾過和吸附技術能濾除血液中99. 99%的白細胞。此方法不打開原血袋的封閉系統,無菌、無熱原、安全、有效、是目前采供血機構常用的去除血液中白細胞的制備技術。
(二)所需材料和設備要求
采集在一次性去白細胞濾器聯袋的全血,應當在采血后2天內過濾。預先開啟恒溫過濾柜、熱合器。
(三)去白細胞程序
1.接收原料全血,檢查一次性去白細胞過濾器聯袋濾器完好,血袋無破漏,在有效期內;掃描獻血碼錄入信息。
2.將全血輕輕搖勻后垂直倒掛在經過預冷[溫度(4±2)℃]的恒溫過濾柜上,關閉旁路夾子,折斷母袋上的阻塞件,血液在自身重力作用下自然過濾,調節流速(80~120滴/分),以避免紅細胞溶血;血液自動經白細胞濾器向下流入轉移血袋中。
3.過濾完畢,將轉移血袋中的空氣排除。
4.熱合 按《熱合器操作規程》熱合轉移血袋充滿血液的導管血樣辮三段(第一段距轉移血袋最少20cm,其余兩段各長15~20cm),或將采血時已熱合的原血袋三段導管血樣辮轉移到轉移血袋上用松緊帶捆綁牢固。
5.若過濾全血過程中,白細胞濾器堵塞,則開放旁路夾子,讓血液從旁路流入轉移血袋,血液按未去白細胞處理。
6.如果在進行白細胞過濾操作前,血液已經處于保存溫度(4±2)℃,需要在室溫進行過濾時,室溫應≤26℃,而且應當盡快放回至既定保存溫度的環境中,從取出到放回的時間應<3小時。
7.按《醫療廢物管理程序》處理醫療廢物。
8.信息錄入。
9.血液交接。
二、去白細胞紅細胞制備
血液成分中白細胞的去除方法較多,其效果各異。目前去除紅細胞制品中白細胞的方法有過濾法、離心去白膜法、冰凍融化法、洗滌法等。
(一)聯袋濾器式(過濾法)去白紅細胞制備
1.原理 血液通過連接好的白細胞過濾器,依靠重力作用自然過濾,濾除血液中的白細胞,是目前采供血機構常用的去除紅細胞中白細胞的制備技術。
2.所需材料和設備 采集在一次性去白細胞濾器聯袋的全血,應當在采血后48小時內過濾。恒溫過濾柜、封管熱合器。
3.準備工作 各種儀器處于正常狀態。一次性去白細胞過濾器聯袋濾器完好,血袋無破漏,在有效期內。
4.將全血輕輕搖勻后垂直倒掛在經過預冷[溫度(4±2)℃]的恒溫過濾柜上,關閉旁路夾子,折斷母袋上的阻塞件,血液在自身重力作用下自然過濾,調節流速(80~120滴/分),以避免紅細胞溶血;血液自動經白細胞濾器向下流入轉移袋中。
5.過濾完畢,將轉移袋中的空氣排除,按《熱合器操作規程》熱合;按《醫療廢物管理程序》處理污物。
6.將配血導管血樣辮轉移到轉移袋上用松緊帶捆綁牢固。
7.按本節《懸浮紅細胞制備》操作即獲得去白紅細胞。
(二)其他去白細胞紅細胞的制備方法
1.離心去白膜法
依據紅細胞與白細胞比重不同而分離、去除白細胞,是簡單、經濟易于操作的制備少白細胞的方法。
在全封閉的多聯塑料血袋內通過二次離心去除全血中的白細胞,制成少白細胞紅細胞。具體做法是:第一次重離心分離出紅細胞和血漿,含白細胞和血小板的白膜層經再次輕離心,分離出血小板,剩余的則為白細胞,棄去。該法可去除紅細胞制劑中65%~85%的白細胞,紅細胞回收率83%~92%。
2.冰凍融化法
將紅細胞從全血中分離出來,加入甘油作為冷凍保護劑,然后置于低溫下冷凍保存。需要使用時復溫、融化并通過洗滌的方法去除甘油。在反復洗滌過程中可去除絕大多數白細胞,白細胞去除率可達90%~98%(具體操作詳見本章第二節紅細胞制備:冰凍紅細胞制備及解凍)。目前該法主要用于制備稀有血型的紅細胞。
3.洗滌法
用無菌生理鹽水將紅細胞洗滌3~6次(常規洗滌3次),最后用生理鹽水懸浮紅細胞,制成的洗滌紅細胞用于有臨床適應證的患者;由于反復洗滌不僅去除了98%以上的血漿蛋白,也去除了80%以上的白細胞(具體操作方法詳見本章第二節紅細胞制備:洗滌紅細胞制備)。
三、去白細胞血小板制備
血小板輸注無效的主要原因是患者體內產生了HLA抗體。HLA抗體的產生很少由血小板本身引起,多數是由濃縮血小板中污染的白細胞所致,輸注去除白細胞的血小板,是減少血小板輸注無效的輸血治療方法。
(一)白細胞濾器過濾法
專用于濾除血小板中白細胞的白細胞濾器具有操作簡便、白細胞濾除率高、血小板回收率高等優點,是一種比較理想的去除血小板中白細胞的方法。
1.將一次性白細胞濾器與血小板袋無菌接合,輕輕搖動血小板袋使其混勻,垂直倒掛在(22±2)℃的恒溫過濾柜上使過濾器自然下垂,關閉旁路夾子,打開過濾器上方止流夾,血小板在自身重力作用下自然過濾,調節流速使血小板在15~20分鐘全部流入轉移袋中。
2.關閉夾子,取下血袋,熱合斷開。
3.錄入信息,成品交庫。
(二)離心法去除濃縮血小板中的白細胞
1.單一單位離心法
(1)用四聯袋以PRP法制備的濃縮血小板(2U全血制備1袋濃縮血小板)收集于第3袋中,攜同第4(空)袋,放于振蕩器上保存,待其完全解聚。
(2)于(22±2)℃以離心力450g離心10分鐘,沉淀血小板中污染的白細胞和紅細胞。
(3)將第3袋內上清血小板懸液傾入第4袋內,熱合封閉袋間的塑料管,少白細胞的血小板位于第4袋內。
2.多個單位濃縮血小板混合離心法(Schiffer)
采用特制的下端有一凸出2ml容量的小袋的轉移袋,將4袋解聚后的血小板轉移入特制的轉移袋中。以390g的離心力離心10分鐘,分出上層懸液即為少白細胞血小板。
(三)血細胞分離機采集采血小板
目前的血細胞分離機如Trima、Amicus等采用了渦旋減少白細胞的方法去除白細胞。有的血細胞分離機(如MCS +)也于最近在血小板收集管路安裝了白細胞過濾器,獲得去白細胞血小板。