創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型建立以后，需要對(duì)其行為學(xué)進(jìn)行檢測(cè)以確定模型的正確性。由于心理應(yīng)激能夠引起動(dòng)物的生活習(xí)性改變、警覺水平過高、狂躁或抑郁性表現(xiàn)、免疫及耐受力下降、學(xué)習(xí)和記憶力受損、逃避行為欠缺等多種行為或生理性改變，因此觀測(cè)方向?yàn)閯?chuàng)傷后應(yīng)激障礙動(dòng)物模型的情感行為學(xué)、空間學(xué)習(xí)記憶力、焦慮或抑郁狀態(tài)等。由于不同的觀測(cè)環(huán)境條件，可能對(duì)動(dòng)物模型的反應(yīng)有影響，因此對(duì)模型檢測(cè)通常在專門的環(huán)境下進(jìn)行，室溫恒定，保持通風(fēng)與安靜，阻斷室外光線，室內(nèi)通過人造光源獲得照度恒定的漫反射光源，避免檢測(cè)設(shè)備儀器被直接照射。實(shí)驗(yàn)中閑雜人等盡量少出現(xiàn)，實(shí)驗(yàn)員與設(shè)備保持距離，避免出現(xiàn)在大鼠視野，整個(gè)過程通過紅外攝像機(jī)記錄大鼠活動(dòng)。針對(duì)不同的方面需進(jìn)行不同行為學(xué)測(cè)試，主要有以下幾類：

此類行為實(shí)驗(yàn)包括僵立行為檢查、拒俘反應(yīng)、強(qiáng)迫性游泳實(shí)驗(yàn)（Forced Swimming）、尾懸掛實(shí)驗(yàn)（Tail Suspension）、獲得性無助實(shí)驗(yàn)（Learned Helplessness）等。

將經(jīng)電擊訓(xùn)練過的大鼠放入反射箱，適應(yīng)3分鐘允許自由探索。然后，只予以聲音刺激而無電擊，其他條件同模型制作時(shí)，觀察3分鐘內(nèi)大鼠僵立時(shí)間，僵立時(shí)間之和占總時(shí)間的百分比即為僵立時(shí)間百分比。

僵立行為是一種普遍見于嚙齒類的防御行為，表現(xiàn)為刻板式的蹲伏姿勢(shì)，可以有一定程度的搖擺，大鼠外觀除呼吸運(yùn)動(dòng)以外其余的肌肉運(yùn)動(dòng)均消失，同時(shí)表現(xiàn)出全身情緒喚起的其他表現(xiàn)，如全身毛發(fā)豎立、背部拱起，是大鼠恐懼表達(dá)的行為方式。創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型通常重新置入電擊箱中呈明顯僵立行為，在不同的時(shí)間點(diǎn)僵立時(shí)間百分比均明顯高于對(duì)照組。本檢測(cè)可充分反映出創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙動(dòng)物模型當(dāng)暴露于與應(yīng)激原類似場(chǎng)景時(shí)，再度體驗(yàn)到痛苦，警覺性明顯增高的心理特征。

在特定的時(shí)間對(duì)大鼠的活動(dòng)性、精神狀態(tài)進(jìn)行觀察，并通過對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物以從未接觸過的手套抓捕，根據(jù)其反應(yīng)而對(duì)拒俘反射進(jìn)行評(píng)分。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)為：0即溫順，易抓捕；1即尖叫或躲避；2即尖叫并躲避；3即逃脫；4即尖叫與逃脫；5即試圖撕咬手套；6即主動(dòng)跳起攻擊。所得分?jǐn)?shù)可用于評(píng)價(jià)動(dòng)物恐懼與沖突素質(zhì)特征的改變。

最為基礎(chǔ)的行為觀察方法，創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型大鼠表現(xiàn)出情緒不穩(wěn)，容易激怒，過度警覺等情緒特征，得分通常高于對(duì)照組。

可分別以大鼠或小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，原理類似。

將體重180~220g的雄性SD大鼠單個(gè)的放入垂直放置的有機(jī)玻璃圓筒中（高40cm、直徑18cm，水深15cm，水溫25℃）強(qiáng)迫游泳。預(yù)試15分鐘后在30℃室溫下烤干，放回籠中。24小時(shí)后將大鼠再放入圓筒中實(shí)驗(yàn)，測(cè)定各大鼠在5分鐘內(nèi)保持漂浮不動(dòng)的時(shí)間。

將小鼠放置于水深10cm的玻璃器皿（高20cm，直徑14cm）中，水溫保持25℃。觀察6分鐘，統(tǒng)計(jì)小鼠在后4分鐘內(nèi)的累積不動(dòng)時(shí)間。

動(dòng)物最初在水中拼命游動(dòng)、掙扎、試圖逃脫，隨之感到逃脫是不可能的，便不再掙扎的游動(dòng)，僅將頭部露出水面，肢體漂浮，維持一種不動(dòng)狀態(tài)，將此狀態(tài)稱為“行為絕望”。動(dòng)物不動(dòng)行為的判定標(biāo)準(zhǔn)為大鼠或小鼠微卷軀體，但保持垂直姿勢(shì)，鼻孔露出水面。模型組動(dòng)物保持漂浮不動(dòng)的時(shí)間長(zhǎng)于對(duì)照組。張中啟研究認(rèn)為國(guó)內(nèi)昆明種小鼠和Wistar大鼠適合作為這種模型的動(dòng)物，但此模型能否成為研究抑郁癥的有價(jià)值動(dòng)物模型，也有爭(zhēng)議。有人認(rèn)為動(dòng)物強(qiáng)迫游泳表現(xiàn)的不動(dòng)狀態(tài)，可能是對(duì)應(yīng)激反應(yīng)的一種適應(yīng)，或者是一種疲勞現(xiàn)象，并非是絕望行為。

將小鼠尾端2cm的部位貼在一根水平木棍上，使動(dòng)物成倒掛狀態(tài)，其頭部離臺(tái)面約5cm，用板隔開相鄰動(dòng)物的視線，觀察小鼠在6分鐘內(nèi)累積不動(dòng)的時(shí)間，如圖8-2。

Steru等1985年建立的一種行為學(xué)檢測(cè)方法，通過小鼠的“絕望行為”，主要檢測(cè)模型動(dòng)物的抑郁情況。創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型組的不動(dòng)時(shí)間長(zhǎng)于對(duì)照組。

使用60cm×21cm×30cm的穿梭箱，由銅管構(gòu)成其底面，管間隔1cm，穿梭箱被1塊帶有7cm×7cm小門的接骨板隔成2個(gè)相同的箱子，將大鼠單只放入穿梭箱的一端適應(yīng)環(huán)境5分鐘，然后進(jìn)行30次回避訓(xùn)練，訓(xùn)練間隔30秒。每次訓(xùn)練的最初3秒出現(xiàn)一個(gè)光信號(hào)，允許大鼠在此期間到達(dá)另一端的箱內(nèi)回避電擊；如果此期間無回避行為發(fā)生，則光信號(hào)繼續(xù)持續(xù)3秒，同時(shí)給予3秒0.8mA的足底電擊；若仍無逃避行為發(fā)生，則電擊和光信號(hào)立即停止，并記作1次逃避失敗。在第3、4、5天上午均進(jìn)行1次回避訓(xùn)練，記錄每只大鼠的逃避失敗次數(shù)。

第5天記錄逃避失敗次數(shù)高于20次的大鼠為獲得性無助大鼠，逃避失敗次數(shù)低于8次為非獲得性無助大鼠，逃避失敗次數(shù)8~20次的大鼠淘汰。創(chuàng)傷后應(yīng)激障礙模型組超過50%的大鼠表現(xiàn)為習(xí)得性無助，有抑郁表現(xiàn)，較對(duì)照組的逃避失敗次數(shù)明顯增加。

主要包括曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)（Open Field）、高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)（Elevated Maze）及新穎物體實(shí)驗(yàn)（Novel Object）等。曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)主要反映動(dòng)物的主動(dòng)行為、探究行為以及抑郁或警覺等情緒反應(yīng)。高架十字迷宮使動(dòng)物同時(shí)產(chǎn)生了探究的沖動(dòng)與恐懼，造成了“探究-回避”的沖突行為，能較好地反映動(dòng)物的焦慮情緒。新穎物體實(shí)驗(yàn)主要反映了動(dòng)物對(duì)外界事物的好奇行為以及對(duì)周圍環(huán)境變化的敏感性。

實(shí)驗(yàn)設(shè)備為1只直徑80cm、高30cm的圓形敞箱，敞箱底部中央有直徑分別為35cm和50cm的內(nèi)、外兩個(gè)圓圈，內(nèi)圈所包含的區(qū)域?yàn)橹醒雲(yún)^(qū)。實(shí)驗(yàn)在弱光照明，65dB白噪聲條件下進(jìn)行。將大鼠放置于中央?yún)^(qū)，觀察10分鐘內(nèi)大鼠的活動(dòng)總次數(shù)，進(jìn)入曠場(chǎng)中央的次數(shù)和在曠場(chǎng)中央?yún)^(qū)停留的時(shí)間。每次實(shí)驗(yàn)完成后，在進(jìn)行下一只檢測(cè)前將大鼠移除，并用酒精擦拭曠場(chǎng)，清除糞便、尿液乃至氣味的影響，如圖8-3。

實(shí)驗(yàn)設(shè)備為一只36cm×36cm×36cm的透明有機(jī)玻璃方箱，頂部敞開，箱的左側(cè)、右側(cè)、后側(cè)和底部均為黑色，前側(cè)面無色透明以便觀察。箱中央倒置懸掛1個(gè)水瓶，瓶嘴離地面10cm，箱上方距離地面60cm處安置一盞25W的白熾燈。實(shí)驗(yàn)前3天大鼠限制飲水，每天僅15點(diǎn)~16點(diǎn)給予飲水1小時(shí)，同時(shí)需每天撫摸大鼠1分鐘以減少非特異性應(yīng)激對(duì)實(shí)驗(yàn)的影響。實(shí)驗(yàn)時(shí)將大鼠置于曠場(chǎng)中央，觀察大鼠開始飲水的潛伏期、飲水時(shí)間、靠近水瓶的次數(shù)和站立次數(shù)等指標(biāo)，觀察持續(xù)時(shí)間為10分鐘，如圖8-4。每只大鼠實(shí)驗(yàn)后，均需要徹底清潔實(shí)驗(yàn)箱，避免嗅覺暗示影響下一只實(shí)驗(yàn)鼠。

動(dòng)物進(jìn)入敞箱后，由于對(duì)新鮮環(huán)境具有恐懼心理，因此主要在曠場(chǎng)的周邊區(qū)域活動(dòng)。但動(dòng)物的探索特性又促進(jìn)其產(chǎn)生在中央?yún)^(qū)域運(yùn)動(dòng)、飲水等活動(dòng)的動(dòng)機(jī)，因此形成沖突狀態(tài)。處于焦慮狀態(tài)的大鼠在不改變活動(dòng)計(jì)數(shù)的劑量下明顯增加進(jìn)入敞箱中央?yún)^(qū)域的次數(shù)以及在中央?yún)^(qū)域的逗留時(shí)間，或增加在中央?yún)^(qū)域飲水的時(shí)間。曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)設(shè)備簡(jiǎn)單，操作容易，在行為學(xué)研究中普遍適用，用以評(píng)價(jià)動(dòng)物的活動(dòng)特性等綜合行為。

實(shí)驗(yàn)裝置由兩條50cm×10cm的相對(duì)開放臂和兩條50cm×10cm×40cm的相對(duì)閉合臂及10cm×10cm中央?yún)^(qū)連接而成，距離地面50cm，閉合臂由40cm高涂黑木板圍成。測(cè)量時(shí)室內(nèi)暗光，將大鼠置于高架十字迷宮的中央?yún)^(qū)域，并讓其頭部正對(duì)其中一個(gè)開放臂，釋放后觀察記錄以下指標(biāo)：①進(jìn)入開放臂的次數(shù)（OE）：進(jìn)入到任一開放臂中，以4爪均進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)，中途任一爪從臂中完全退出即為該次進(jìn)入活動(dòng)結(jié)束。②進(jìn)入開放臂的時(shí)間（OT）：從進(jìn)入到退出開放臂，在臂中持續(xù)的總時(shí)間。③進(jìn)入封閉臂的次數(shù)（CE）：進(jìn)入到任一封閉臂中，以4爪均進(jìn)入臂內(nèi)為準(zhǔn)，中途任一爪從臂中完全退出即為該次進(jìn)入活動(dòng)結(jié)束。④進(jìn)入封閉臂的時(shí)間（CT）：從進(jìn)入到退出封閉臂，在臂中持續(xù)的總時(shí)間。如圖8-5。根據(jù)各項(xiàng)指標(biāo)分別計(jì)算出：代表大鼠的活動(dòng)性的進(jìn)入開放與封閉臂的總次數(shù)（OE+CE），進(jìn)入OE的比例和進(jìn)入OT的比例。實(shí)驗(yàn)中每只大鼠僅能檢測(cè)1次，每次5分鐘。每次實(shí)驗(yàn)完成后，在進(jìn)行下一只檢測(cè)前將大鼠移除，并用酒精擦拭曠場(chǎng)，清除糞便、尿液乃至氣味的影響。

高架十字迷宮利用動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的探究特性和對(duì)高懸敞開臂的恐懼形成矛盾沖突行為來考察動(dòng)物的焦慮狀態(tài)。高架十字迷宮具有一對(duì)開臂和一對(duì)閉臂，大鼠由于嗜暗性會(huì)傾向于在閉臂中活動(dòng)，但出于好奇心和探究性又會(huì)在開臂中活動(dòng)，在面對(duì)新奇刺激時(shí)，動(dòng)物同時(shí)產(chǎn)生探究的沖動(dòng)與恐懼，這就造成了探究與回避的沖突行為，從而產(chǎn)生焦慮心理。焦慮狀態(tài)的大鼠明顯縮短進(jìn)入開臂的次數(shù)與時(shí)間。高架十字迷宮被廣泛應(yīng)用于新藥開發(fā)篩選評(píng)價(jià)、藥理學(xué)、毒理學(xué)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、神經(jīng)生物學(xué)、動(dòng)物心理學(xué)及行為生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科的科學(xué)研究和計(jì)算機(jī)輔助教學(xué)等領(lǐng)域，是開展行為學(xué)研究尤其是焦慮抑郁研究的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。

首先將大鼠在安靜的房間內(nèi)單籠喂養(yǎng)，每籠同時(shí)放置2個(gè)水瓶。第0~24小時(shí)，兩瓶均裝有1%蔗糖水；第24~48小時(shí)，一個(gè)瓶裝1%蔗糖水，一個(gè)瓶裝純水。適應(yīng)過后，對(duì)大鼠進(jìn)行23小時(shí)的禁食禁水，然后進(jìn)行糖水消耗實(shí)驗(yàn)。給予每只大鼠事先定量好的兩瓶水：一瓶1%蔗糖水，一瓶純水。60分鐘后，取走兩瓶并稱重。計(jì)算動(dòng)物的總液體消耗量、糖水消耗量、純水消耗量、糖水偏愛（糖水偏愛=糖水消耗量/總液體消耗量）和均衡體質(zhì)量因素后的比例（均衡體質(zhì)量后比例=糖水消耗量體/質(zhì)量）。

糖水能帶給實(shí)驗(yàn)大鼠愉悅特征。焦慮狀態(tài)的大鼠糖水消耗率明顯降低。可作為模型動(dòng)物情緒狀況的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

明暗箱穿梭實(shí)驗(yàn)可分別采用大鼠和小鼠進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，其原理相似。

實(shí)驗(yàn)設(shè)備為45cm×27cm×27cm的明暗箱，分為明箱和暗箱2個(gè)部分。暗箱占總體積1/3，頂部有蓋；明箱占2/3，頂部敞開，亮光照明。兩箱之間的隔板底部有一個(gè)7.5cm×7.5cm的洞供大鼠通過。明暗箱與動(dòng)物活動(dòng)計(jì)數(shù)儀相連，可同時(shí)記錄大鼠的運(yùn)動(dòng)活性。將大鼠放置于明箱中央，背對(duì)洞口，記錄10分鐘內(nèi)動(dòng)物穿箱次數(shù)以及分別在明箱和暗箱中的停留時(shí)間，如圖8-6。

在一只40cm×40cm×12cm的有機(jī)玻璃箱中央安裝1個(gè)20cm×20cm×12cm的透明有機(jī)玻璃小敞箱，在敞箱的2個(gè)對(duì)角分別連有1個(gè)10cm×10cm×12cm的暗箱，暗箱的兩側(cè)各連有一個(gè)L形的跑道，暗箱與L形跑道有1個(gè)3.5cm×3.5cm的洞口相通。裝置上方裝有攝像系統(tǒng)并連接視頻分析系統(tǒng)。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠背對(duì)暗箱洞口放置，記錄10分鐘內(nèi)觀察到的小鼠的穿箱次數(shù)和在明箱中的滯留時(shí)間。

此實(shí)驗(yàn)根據(jù)大鼠或小鼠喜歡在暗箱中活動(dòng)，但動(dòng)物的探究天性又促使其試圖探索明箱而設(shè)計(jì)的。但明箱中的光亮刺激可抑制動(dòng)物在明箱中的探索活動(dòng)。焦慮狀態(tài)的小鼠在暗箱中的站立、滯留時(shí)間和運(yùn)動(dòng)活性增加，穿箱次數(shù)增加，在明箱中的對(duì)應(yīng)指標(biāo)較少，穿箱次數(shù)減少。此模型簡(jiǎn)單易行，對(duì)動(dòng)物施加無痛性刺激，但所需時(shí)間漫長(zhǎng)，另外由于動(dòng)物上午和下午的活動(dòng)性差異較大，需要在下午進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)。

選擇體重18~22g的雄性小鼠。實(shí)驗(yàn)裝置為1個(gè)有機(jī)玻璃箱，長(zhǎng)45cm、寬10cm、一端高12.5cm、另一端高25cm，箱內(nèi)有5級(jí)寬10cm、高2.5cm的樓梯。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠置于箱的底部，使其背對(duì)樓梯，記錄3分鐘內(nèi)小鼠的站立次數(shù)和爬梯數(shù)（以四肢都爬上樓梯為準(zhǔn)）。實(shí)驗(yàn)環(huán)境保持安靜，光線恒定。

此方法簡(jiǎn)單易行，結(jié)果可靠，可大規(guī)模觀察。為了簡(jiǎn)化觀察，不需考慮動(dòng)物上樓梯的級(jí)數(shù)。每只動(dòng)物實(shí)驗(yàn)后需清潔實(shí)驗(yàn)箱，以排除嗅覺暗示對(duì)下一只動(dòng)物的干擾。爬梯實(shí)驗(yàn)主要用于探討動(dòng)物探索性行為或活動(dòng)性，動(dòng)物的爬梯行為作為評(píng)價(jià)動(dòng)物探索行為或活動(dòng)性的指標(biāo)，而直立則作為動(dòng)物焦慮狀態(tài)的參數(shù)。因此可同時(shí)評(píng)價(jià)焦慮狀態(tài)的動(dòng)物的兩種狀態(tài)。

選擇體重18~22g的雄性大鼠。實(shí)驗(yàn)設(shè)備為1只25cm×18cm×16cm的長(zhǎng)方形箱，箱的底部有4塊8cm×11cm的相同金屬板，各塊板之間均有4mm寬的間隙，它們均與電刺激器相連，處于對(duì)角線的2塊板同電極。當(dāng)小鼠每次跨越上下或左右金屬板時(shí)受到1次電擊，電流強(qiáng)度為0.2~0.8mA。將小鼠置于板上，讓其探究15秒后打開電刺激器。當(dāng)小鼠受到電刺激時(shí)產(chǎn)生明顯的逃避反應(yīng)，通常穿過2~3塊板才會(huì)停下，如此記為1次。記錄10分鐘內(nèi)每分鐘的電擊數(shù)。如圖8-7。

四板法以被動(dòng)回避為基礎(chǔ)，小鼠渴望探究，但又因害怕足底電擊而使探究活動(dòng)受到限制。非焦慮狀態(tài)的小鼠受到電擊的次數(shù)明顯更多。此方法操作簡(jiǎn)單，不需要訓(xùn)練動(dòng)物，因此可廣泛使用。

前2天大鼠進(jìn)行適應(yīng)，其中第1天動(dòng)物曠場(chǎng)活動(dòng)量的測(cè)定也同時(shí)作為大鼠對(duì)該環(huán)境的適應(yīng)過程。大鼠第1天和第2天在測(cè)定裝置中各停留、適應(yīng)15分鐘，兩天共30分鐘。第3~4天，連續(xù)2天測(cè)量大鼠的新穎尋求行為。測(cè)試時(shí)提前在曠場(chǎng)中心置入7cm×7cm×7cm的新穎物體，第3天和第4天的新穎物體分別為橡膠塊與鐵籠。考慮到大鼠避光趨暗和在曠場(chǎng)中避免停留在曠場(chǎng)中心的生物本性，依據(jù)大鼠平均身長(zhǎng)，設(shè)定以曠場(chǎng)中心為圓心，10cm為半徑的區(qū)域?yàn)椤靶路f尋求區(qū)域’，記錄動(dòng)物在新穎尋求區(qū)域停留的時(shí)間，作為新穎尋求行為的量化指標(biāo)，測(cè)試時(shí)間共15分鐘，測(cè)定時(shí)給予白噪聲掩蔽。根據(jù)大鼠在15分鐘新穎尋求測(cè)試中停留在新穎尋求區(qū)域的時(shí)間，運(yùn)動(dòng)軌跡和新穎尋求行為進(jìn)行分析。

此實(shí)驗(yàn)根據(jù)大鼠喜歡在暗處活動(dòng)，但其探究天性又促使其試圖探索新穎事物而設(shè)計(jì)的。焦慮狀態(tài)的小鼠在新穎尋求區(qū)域的滯留時(shí)間明顯縮短。此模型簡(jiǎn)單易行，對(duì)動(dòng)物施加無痛性刺激，另外由于動(dòng)物上午和下午的活動(dòng)性差異較大，需要在下午進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)。

有較多的研究資料證實(shí)，應(yīng)激因素作用于機(jī)體時(shí)，通過多種通路引起神經(jīng)遞質(zhì)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)以及突觸可塑性等方面的改變，從而顯著影響了機(jī)體的學(xué)習(xí)和記憶能力，因此，對(duì)記憶力和學(xué)習(xí)能力的評(píng)估也是評(píng)價(jià)心理應(yīng)激水平的重要方法。目前常用的有跳臺(tái)法（Step Down）、Morris水迷宮（Morris water maze）、輻射狀水迷宮（radial armmaze）等。

實(shí)驗(yàn)裝置為一長(zhǎng)方形黑色塑料板制成的反射箱，分割為5個(gè)小間，每個(gè)小間的大小為12cm×12cm×20cm（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為小鼠）或23cm×25cm×40cm（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大鼠）。反射箱底面鋪以銅柵，間距為1cm，可以通電，電壓強(qiáng)度由一變壓器控制。每間內(nèi)有1個(gè)可自由移動(dòng)的橡膠平臺(tái)，高4.5cm、直徑4.5cm（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為小鼠）或高為5cm，直徑為8cm（實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為大鼠）。一般平臺(tái)置于左后角或者右后角，如圖8-8。將動(dòng)物放入反應(yīng)箱內(nèi)適應(yīng)環(huán)境3分鐘，然后立即通以36V交流電。動(dòng)物受到電擊，其正常反應(yīng)是跳回平臺(tái)以躲避傷害性刺激。多數(shù)動(dòng)物可能再次或多次跳至銅柵上，受到電擊后又迅速跳回平臺(tái)。如此訓(xùn)練5分鐘，并記錄每只動(dòng)物受到電擊的次數(shù)亦稱錯(cuò)誤次數(shù)，以此作為學(xué)習(xí)成績(jī)。24小時(shí)后重做測(cè)驗(yàn)，此即記憶保持測(cè)驗(yàn)，將動(dòng)物放在平臺(tái)上，然后予以通電，記錄受到電擊的動(dòng)物數(shù)，動(dòng)物第一次跳下平臺(tái)的潛伏期和5分鐘內(nèi)在銅柵上所呆的累積錯(cuò)誤總次數(shù)。

跳臺(tái)模型屬于回避性條件反射實(shí)驗(yàn)，本法簡(jiǎn)單易行，一次可同時(shí)測(cè)試多只動(dòng)物，既可觀察影響因素對(duì)記憶過程的影響，也可觀察對(duì)學(xué)習(xí)的影響，敏感性較高。不足之處在動(dòng)物的回避性反應(yīng)差異較大，需對(duì)動(dòng)物提前進(jìn)行預(yù)選以減少差異性。

此法是利用鼠類的嗜暗習(xí)性而設(shè)計(jì)的，常用動(dòng)物為小鼠。實(shí)驗(yàn)設(shè)備包括明、暗兩室。明室大小為11cm×3.2cm，其上方約20cm處有1盞白熾燈照明；暗室大小為17cm×3.2cm，兩室之間隔板底部有1個(gè)直徑為3cm的圓洞。兩室底部均為銅柵，暗室的銅柵可以通電，電壓強(qiáng)度由一變壓器調(diào)控，通常采用40V電壓。暗箱與一計(jì)時(shí)、計(jì)數(shù)器相連，可自動(dòng)記錄動(dòng)物由明室進(jìn)入暗室的潛伏期和進(jìn)入暗室的次數(shù)。實(shí)驗(yàn)時(shí)將小鼠背朝洞口放入明室，同時(shí)啟動(dòng)計(jì)時(shí)、計(jì)數(shù)器，動(dòng)物穿過洞口進(jìn)入暗室即受到電擊，此時(shí)間為動(dòng)物首次進(jìn)入暗室遭到電擊所需時(shí)間，即潛伏期；取出動(dòng)物，24小時(shí)后再次測(cè)試，記錄動(dòng)物進(jìn)入暗室的潛伏期，5分鐘內(nèi)的電擊次數(shù)和受電擊的動(dòng)物數(shù)。

本模型屬于回避性條件反射實(shí)驗(yàn)。方法簡(jiǎn)便易行，以潛伏期為指標(biāo)，準(zhǔn)確度較高，對(duì)記憶過程特別是記憶再現(xiàn)有較高的敏感性。

設(shè)計(jì)特制的水迷宮主要由一圓柱形水池和一可移動(dòng)位置的站臺(tái)組成。水池高70cm，直徑80cm，站臺(tái)直徑8cm，水池上空通過一個(gè)數(shù)字?jǐn)z像機(jī)與計(jì)算機(jī)相連接。預(yù)先在水池中注入清水，水深15cm，加入炭素墨水使池水變?yōu)椴煌该鞯暮谏九_(tái)表面為黑色，使小鼠不能看到，水面高出站臺(tái)表面0.5cm。水溫控制在22℃±0.5℃，在水池上標(biāo)定相同一點(diǎn)作為每次實(shí)驗(yàn)小鼠的入水點(diǎn)。站臺(tái)置于離入水點(diǎn)較遠(yuǎn)的象限中間，實(shí)驗(yàn)過程保持站臺(tái)位置不變，如圖8-9。

實(shí)驗(yàn)前1天無平臺(tái)，讓大鼠自由游泳5分鐘適應(yīng)環(huán)境，不需要記錄。正式實(shí)驗(yàn)開始時(shí)將平臺(tái)固定在水面下1.5cm處，實(shí)驗(yàn)室中的人員和設(shè)備保持固定不變，以作為大鼠空間記憶的參照物。將大鼠面朝池壁輕輕放入水中，入水點(diǎn)位于非平臺(tái)區(qū)域的隨機(jī)位點(diǎn)。檢測(cè)時(shí)間為60秒，讓大鼠找到并爬上水中的隱藏平臺(tái)。將大鼠自入水到找到平臺(tái)并四肢爬上平臺(tái)所花的時(shí)間作為逃避潛伏期，并讓其在平臺(tái)上停留30秒。如果入水后在限定時(shí)間內(nèi)為能找到并爬上平臺(tái)，則記錄總時(shí)間為60秒，同時(shí)人為將大鼠放置于平臺(tái)30秒，然后取出讓其休息30秒，再進(jìn)行下一輪實(shí)驗(yàn)。每天每只大鼠進(jìn)行4次實(shí)驗(yàn)，連續(xù)進(jìn)行4天。通過試驗(yàn)評(píng)價(jià)大鼠空間記憶的獲得能力。在實(shí)驗(yàn)中，可將每天第一次實(shí)驗(yàn)的軌跡進(jìn)行組間對(duì)比，以避免短時(shí)記憶的影響。

定位航行實(shí)驗(yàn)結(jié)束24小時(shí)后，拆除平臺(tái)后選擇隨機(jī)位點(diǎn)將大鼠放入水中，正常動(dòng)物會(huì)在原平臺(tái)位置不斷尋找，記錄大鼠60秒內(nèi)穿過原平臺(tái)所在位點(diǎn)的次數(shù)，在原平臺(tái)區(qū)域的游程及時(shí)間占總游程和總時(shí)間的比率，以此評(píng)價(jià)小鼠的空間記憶能力。

Morris水迷宮通過觀察記錄動(dòng)物入水后搜索目標(biāo)所需時(shí)間、采用的策略和它們的運(yùn)動(dòng)軌跡，有助于分析和推斷動(dòng)物的學(xué)習(xí)、記憶、空間定向以及認(rèn)知功能等能力，現(xiàn)在較為廣泛采用。

影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素很多，其中以實(shí)驗(yàn)環(huán)境比較重要。由于動(dòng)物往往會(huì)利用實(shí)驗(yàn)室內(nèi)固定的環(huán)境作為搜索目標(biāo)時(shí)的參照物，因此實(shí)驗(yàn)室的設(shè)備儀器、工作臺(tái)、門窗等陳設(shè)的位置和實(shí)驗(yàn)操作者所站位置在整個(gè)實(shí)驗(yàn)中都需要固定，避免影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。另外由于Morris水迷宮的水容量大，所以動(dòng)物的排泄物和分泌的外激素不會(huì)影響其他動(dòng)物的成績(jī)，優(yōu)于其他的動(dòng)物行為實(shí)驗(yàn)方法。此方法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確可靠，適用于各種因素引起的記憶障礙模型，使得模型動(dòng)物潛伏期延長(zhǎng)，撤臺(tái)實(shí)驗(yàn)時(shí)穿過原平臺(tái)位置的次數(shù)明顯減少，并伴有定向障礙和運(yùn)動(dòng)軌跡混亂。

經(jīng)典的Morris水迷宮的逃生平臺(tái)位置在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中固定不變，這使得海馬工作記憶加工過程得以簡(jiǎn)化，所以對(duì)聰明小鼠的輕度學(xué)習(xí)記憶能力損害的檢測(cè)就顯得不靈敏。Arendash等首次使用了六臂輻射狀水迷宮，即由六臂輻射狀旱迷宮衍生的水版本，對(duì)轉(zhuǎn)基因鼠的空間學(xué)習(xí)記憶能力進(jìn)行研究。該程序主要利用贏則停策略，即一旦小鼠發(fā)現(xiàn)逃生平臺(tái)，則可停留在平臺(tái)上，實(shí)驗(yàn)即結(jié)束。

水是嚙齒類動(dòng)物非常厭惡的刺激或環(huán)境。鼠在水池中就會(huì)急于尋找逃路。它們的習(xí)性為在水池四周尋找出口逃避，但深而光滑的垂直池壁阻礙了這種企圖。實(shí)驗(yàn)中設(shè)置的水下平臺(tái)可提供鼠棲身的場(chǎng)所。但在巨大的水面上，強(qiáng)迫游泳的動(dòng)物不能看見平臺(tái)。它們?nèi)粢焖僬业狡脚_(tái)而避免淹沒就必須利用環(huán)境中的線索進(jìn)行定位。從而檢測(cè)了小鼠記住環(huán)境中的線索及其與平臺(tái)位置關(guān)系而對(duì)平臺(tái)進(jìn)行定位的能力，可反映小鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力。

此模型的優(yōu)點(diǎn)在于①對(duì)檢測(cè)輕度學(xué)習(xí)記憶能力下降的敏感性比Morris迷宮強(qiáng)。這主要是因?yàn)榱圯椛錉钏詫m中采用了在一天的實(shí)驗(yàn)中平臺(tái)位置恒定不變，而在每天的實(shí)驗(yàn)中改變平臺(tái)位置來觀察動(dòng)物的工作記憶。因此小鼠在實(shí)驗(yàn)中必須掌握這個(gè)規(guī)律來解決問題。②既可判斷參考記憶，又可判斷工作記憶。③避免了在Morris水迷宮中的趨觸性行為，即靠池邊游泳的傾向。④避免了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物需被剝奪食物和水的不足。⑤避免了氣味對(duì)動(dòng)物行為的影響。⑥避免了在Morris水迷宮中那樣游泳能力對(duì)成績(jī)產(chǎn)生的顯著影響。⑦避免了電擊。⑧不需復(fù)雜的裝備，容易開展工作。

但它也有不足：①年老體弱鼠有時(shí)較難完成任務(wù)。②個(gè)體間的成績(jī)差異巨大。③可能不是所有鼠株都能完成任務(wù)。④也受視覺障礙的限制。⑤實(shí)驗(yàn)過程中需同時(shí)觀察記錄大量復(fù)雜的數(shù)據(jù)。

實(shí)驗(yàn)設(shè)備由PVC板制作，內(nèi)、外壁貼黑色膠紙。共3個(gè)臂，各個(gè)臂之間夾角120°，每一臂尺寸30cm×8cm×15cm，在中央處各有一個(gè)可移動(dòng)的隔板，在迷宮各個(gè)臂內(nèi)貼上不同幾何圖形，作為視覺標(biāo)記。Y迷宮的3個(gè)臂被隨機(jī)設(shè)為：新異臂（novel arm）、起始臂（start arm）和其他臂（other arm）。其中新異臂在實(shí)驗(yàn)的第1個(gè)階段即訓(xùn)練期時(shí)用隔板擋住，在第2個(gè)階段即測(cè)試期時(shí)打開；起始臂為小鼠進(jìn)入迷宮時(shí)所在的臂。整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中起始臂和其他臂都是一直打開，動(dòng)物可以自由出入。迷宮內(nèi)鋪墊木屑，每次訓(xùn)練或測(cè)試結(jié)束后，混勻各個(gè)臂里的鋸末，以防動(dòng)物殘留氣味干擾。迷宮上方1.5m處安置攝像鏡頭，全過程錄像。Y迷宮實(shí)驗(yàn)包含兩個(gè)階段，間隔1小時(shí)。第一個(gè)階段為訓(xùn)練期，新異臂被隔板擋住，小鼠由起始臂放入，在起始臂和其他臂中自由活動(dòng)10分鐘，訓(xùn)練結(jié)束后，小鼠被放回飼養(yǎng)籠。1小時(shí)后進(jìn)行第2個(gè)階段實(shí)驗(yàn)。第2個(gè)階段為檢測(cè)期，抽開新異臂隔板，小鼠由起始臂放入，在3個(gè)臂中自由活動(dòng)5分鐘。錄像記錄5分鐘內(nèi)每只小鼠在各個(gè)臂停留的時(shí)間和穿梭次數(shù)。在某些實(shí)驗(yàn)中還可通過食物誘惑或者電擊脅迫增強(qiáng)小鼠的活動(dòng)性。實(shí)驗(yàn)中，隨機(jī)安排不同動(dòng)物對(duì)應(yīng)的Y迷宮的起始臂、新異臂和其他臂，但對(duì)于同一只小鼠，在迷宮實(shí)驗(yàn)的兩個(gè)階段，三個(gè)臂是固定的。由于小鼠對(duì)該迷宮測(cè)試的記憶時(shí)間最長(zhǎng)不超過數(shù)小時(shí)，所以該迷宮測(cè)試可以在同一只小鼠上反復(fù)進(jìn)行，但兩次實(shí)驗(yàn)需間隔至少1周，并改變?nèi)齻€(gè)臂的搭配。

Y迷宮主要應(yīng)用于動(dòng)物的辨別性學(xué)習(xí)，工作記憶及參考記憶的測(cè)試。根據(jù)分析動(dòng)物進(jìn)入各臂的次數(shù)、時(shí)間、路線等參數(shù)可以反映出實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的空間記憶能力。相對(duì)而言，Y迷宮簡(jiǎn)便、可行，有一定的實(shí)用性，現(xiàn)常用于學(xué)習(xí)記憶功能評(píng)價(jià)。Y迷宮這類迷宮任務(wù)能夠檢測(cè)小鼠的海馬和前額葉腦區(qū)相關(guān)的空間參考記憶和空間工作記憶。通過Y迷宮研究小鼠的空間識(shí)別記憶能力，相對(duì)于被動(dòng)回避等實(shí)驗(yàn)，其優(yōu)勢(shì)在于這種迷宮利用了嚙齒類動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境天然探究的自然習(xí)性，不需要?jiǎng)游飳W(xué)習(xí)任何規(guī)則來趨利避害，能夠有效地反映出動(dòng)物對(duì)新異環(huán)境的識(shí)別記憶能力。

實(shí)驗(yàn)設(shè)備由2根46cm×10cm×10cm的選擇臂（goal arms）和一個(gè)與之垂直的71cm×10cm×10cm的起始臂（approach alley）組成。起始臂內(nèi)置1個(gè)16cm×16cm的起始箱，并有閘門與起始臂的另一部分相聯(lián)。選擇臂的末端各有1個(gè)食物杯，用來放食物為增加小鼠尋覓食物的動(dòng)力，在測(cè)試前3天對(duì)小鼠食量進(jìn)行限制，禁食6小時(shí)，使其體重下降至正常獲取食物時(shí)的80%~90%。實(shí)驗(yàn)前2天，撫摸小鼠并將其放入T迷宮適應(yīng)10分鐘，在迷宮兩臂碗里放入食物，待小鼠取食完畢后將其取出。實(shí)驗(yàn)在安靜的房間內(nèi)進(jìn)行，環(huán)境條件保持穩(wěn)定。在測(cè)試時(shí)，第一步先將迷宮的一個(gè)臂擋住，只允許動(dòng)物到達(dá)T迷宮的另一個(gè)臂，在此動(dòng)物得到食物，取食完畢，立即取出，用酒精清洗去除氣味；在第二步，將T迷宮的兩臂都開放，但只有原來被擋住的臂內(nèi)有食物，小鼠只有選擇進(jìn)入與第一步方向相反的臂才能得到食物，記為1次正確，如小鼠重新進(jìn)入第一步實(shí)驗(yàn)時(shí)去過的臂記作1次錯(cuò)誤。如此兩步為一組，兩步實(shí)驗(yàn)間隔15秒。每只小鼠每天進(jìn)行10或15組實(shí)驗(yàn)，記錄其正確選擇次數(shù)，共測(cè)3天。

最初人們證明大鼠能辨別T迷宮兩臂顏色的變化，他們發(fā)現(xiàn)，將雄性大鼠置于T迷宮的起始臂15~30分鐘，讓其能看見、但不能進(jìn)入黑白兩臂。然后，改變其中一個(gè)臂的顏色，使兩臂同為黑色或白色。讓大鼠自由選擇，結(jié)果顯示，大鼠總是選擇改變了顏色的那個(gè)臂（新異臂）。這一過程要依靠動(dòng)物的記憶來完成。由此發(fā)展而成的T迷宮實(shí)驗(yàn)成為目前用于評(píng)價(jià)空間記憶的最常用的動(dòng)物模型之一。現(xiàn)在的T迷宮使用的是食物而不是臂的顏色作為動(dòng)物探究的動(dòng)力。通常用這一模型來研究動(dòng)物的空間工作記憶（spatial working memory），即測(cè)定動(dòng)物只在當(dāng)前操作期間有用的信息。經(jīng)改進(jìn)后的T形迷宮也可用來評(píng)價(jià)參考記憶（reference memory），即記錄在這一實(shí)驗(yàn)中任何一天、任何一次的測(cè)試都有用的信息。

大鼠和小鼠具有良好的空間辨別功能，能很快學(xué)會(huì)并準(zhǔn)確操作迷宮。因此，T迷宮被廣泛用于測(cè)試動(dòng)物的空間記憶能力。①T迷宮用于研究不同腦區(qū)對(duì)空間記憶的影響。它對(duì)某些腦結(jié)構(gòu)，尤其是海馬的毀損作用敏感。此外，許多藥物或毒素都可增強(qiáng)或削弱動(dòng)物在T迷宮的空間記憶。實(shí)驗(yàn)所用的動(dòng)物除大鼠和小鼠外，還包括豬、羊、烏龜和鴿子等。②動(dòng)物選擇的準(zhǔn)確性與兩次選擇之間的間隔及每一訓(xùn)練間期內(nèi)的選擇訓(xùn)練次數(shù)等有關(guān)。正常動(dòng)物經(jīng)短時(shí)間的間隔，其選擇準(zhǔn)確性非常高。而經(jīng)過極長(zhǎng)時(shí)間的間隔，例如超過1小時(shí)，其選擇接近隨機(jī)性操作。強(qiáng)迫選擇訓(xùn)練后。如只給一次目標(biāo)臂選擇，準(zhǔn)確性通常很高。但是，如給予多次選擇，則選擇次數(shù)越多，準(zhǔn)確性越差。③嚙齒類動(dòng)物有單向偏愛的特性。這種單向偏愛與動(dòng)物種屬和品系有關(guān)。例如，C57BL/6J小鼠、ICR小鼠和Purdue-Wistar大鼠更偏愛左側(cè)，而Spague-Dawley大鼠和Wistar大鼠更偏愛右側(cè)。研究表明，超過2/3的雄性Spague-Dawley大鼠偏愛右側(cè)，而偏愛左側(cè)的不到1/5。這種單向偏愛可影響對(duì)動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶的評(píng)價(jià)。④起始臂的閘門是T迷宮的重要特征。它既可用于在兩次選擇之間將動(dòng)物限制在起始箱內(nèi)一定的時(shí)間，也可防止動(dòng)物在兩次選擇訓(xùn)練之間探究迷宮。因此，兩次選擇訓(xùn)練之間應(yīng)將動(dòng)物迅速放回起始臂內(nèi)的起始箱。⑤當(dāng)動(dòng)物對(duì)迷宮或?qū)嶒?yàn)者的應(yīng)激恐懼超過其對(duì)探究和覓食的渴望程度時(shí)，動(dòng)物對(duì)迷宮的探究減少，甚至待在迷宮某處不動(dòng)而不去探究迷宮。這種恐懼表現(xiàn)為動(dòng)物在迷宮內(nèi)排便和排尿；當(dāng)抓它時(shí)，動(dòng)物還會(huì)發(fā)出尖叫聲。因此，足夠的應(yīng)激適應(yīng)是必要的。

此外，還有其他的行為學(xué)測(cè)試方式，例如①負(fù)重游泳：在小鼠尾部負(fù)荷3g鐵絲，將其放入28℃水中。觀察小鼠從游泳至沉入水中3秒未浮出的時(shí)間為潛伏期。②爬桿：在15cm×5cm×40cm反射箱內(nèi)，安置木桿和電柵底板，動(dòng)物在電柵底板受到電擊一定時(shí)間內(nèi)爬桿為逃避反應(yīng)，給予條件刺激未受到電擊前即行爬桿為主動(dòng)回避反應(yīng)。訓(xùn)練一天后測(cè)試，如圖8-10。③群居模型敝箱：將相互不熟悉大鼠放入敝箱，以其彼此間嗅，爬上或下鉆，理毛，性探究，跟隨或圍繞轉(zhuǎn)等正常的群居接觸行為減少作為評(píng)價(jià)焦慮指標(biāo)。這些實(shí)驗(yàn)在其設(shè)計(jì)思路與上述各方法基本類似。