實訓14 甘草的鑒定

【實訓目標】熟練掌握甘草的性狀、顯微與理化鑒別方法；學會依據(jù)國家藥品標準，綜合鑒定甘草的真?zhèn)蝺?yōu)劣；學會書寫檢驗報告書。

【實訓準備】

1．實訓材料 甘草為豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch. 、脹果甘草Glycyrrhiza inflata Bat．或光果甘草Glycyrrhiza glabra L．的干燥根及根莖。甘草藥材、甘草粉末、甘草永久制片、甘草對照藥材、甘草酸單銨鹽對照品、甘草苷對照品、甘草酸銨對照品。

2．實訓器具 顯微鏡、回流提取裝置、紫外分析儀、點樣器、硅膠G薄層板、展開缸、電吹風、紫外光燈、高效液相色譜儀、分析天平、標準藥篩篩、具塞錐形瓶、超聲處理器等。

3．實訓試劑 稀甘油、水合氯醛試液、乙醚、甲醇、正丁醇、1%氫氧化鈉溶液、乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、蒸餾水、10%硫酸乙醇溶液、十八烷基硅烷鍵合硅膠、乙腈、0.05%磷酸溶液、70%乙醇等。

【實訓內容及步驟】

1．性狀鑒別

（1）甘草：呈圓柱形，長25～100cm，直徑0.6～3.5cm。外皮松緊不一，紅棕色或灰棕色，有明顯的縱皺紋、溝紋及稀疏的細根痕，皮孔橫長，兩端切面中央稍下陷；根莖表面有芽痕。質堅實，斷面略顯纖維性，黃白色，粉性，具明顯的形成層環(huán)紋及放射狀紋理，有裂隙；根莖斷面中央有髓。氣微，味甜而特殊。

（2）脹果甘草：根及根莖木質粗壯，有的分枝，表面灰棕色或灰褐色，外皮粗糙。質堅硬，木纖維多，粉性小。根莖不定芽多而粗大。

（3）光果甘草：根及根莖質地較堅實，有的分枝，表面灰棕色，外皮不粗糙。皮孔細小而不明顯。

2．顯微鑒別

（1）甘草橫切面：木栓層為數(shù)列棕色細胞。栓內層較窄。韌皮部射線寬廣，多彎曲，常現(xiàn)裂隙；纖維多成束，非木化或微木化，周圍薄壁細胞常含草酸鈣方晶；篩管群常因壓縮而變形。束內形成層明顯。木質部射線寬3～5列細胞；導管較多，直徑約至160μm；木纖維成束，周圍薄壁細胞亦含草酸鈣方晶。根中心無髓；根莖中心有髓。

（2）甘草粉末：淡棕黃色。①纖維及晶纖維：纖維成束，直徑8～14μm，壁厚，微木化，周圍薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維；草酸鈣方晶多見。②導管：具緣紋孔導管較大，直徑至160μm，稀有網紋導管。③木栓細胞：多角形或長方形，紅棕色，微木化。④淀粉粒：多為單粒，卵圓形或橢圓形，臍點點狀。⑤棕色塊狀物：形狀不一。

3．理化鑒別

（1）薄層色譜：①供試品溶液的制備：取本品粉末1g，加乙醚40ml，加熱回流1小時，濾過，棄去醚液，藥渣加甲醇30ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗滌3次，棄去水液，正丁醇液蒸干，殘渣加甲醇5ml使溶解，即得。②對照藥材溶液的制備：取甘草對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。③對照品溶液的制備：取甘草酸單銨鹽對照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，即得。④薄層色譜試驗：吸取上述三種溶液各1～2μl，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15∶1∶1∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈（365nm）下檢視。⑤結果判斷：供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，應顯相同顏色的熒光斑點；在與對照品色譜相應的位置上，應顯相同的橙黃色熒光斑點。

（2）檢查：①水分（以烘干法測定）不得過12.0%。②總灰分不得過7.0%。③酸不溶性灰分不得過2.0%。④有機氯農藥殘留量：六六六（總BHC）不得過千萬分之二，滴滴涕（總DDT）不得過千萬分之二，五氯硝基苯（PCNB）不得過千萬分之一。⑤重金屬及有害元素：按鉛、鎘、砷、汞、銅測定法測定，鉛不得過百萬分之五，鎘不得過千萬分之三，砷不得過百萬分之二，汞不得過千萬分之二，銅不得過百萬分之二十。

（3）含量測定：按高效液相色譜法測定。①色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙腈為流動相A，以0.05%磷酸溶液為流動相B，按表2-2中的規(guī)定進行梯度洗脫；檢測波長為237nm。理論板數(shù)按甘草苷峰計算應均不低于5000。②對照品溶液的制備：取甘草苷對照品、甘草酸銨對照品適量，精密稱定，加70%乙醇制成每1ml含甘草苷20μg、甘草酸銨0.2mg的溶液，即得。③供試品溶液的制備：取本品粉末（過三號篩）0.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%乙醇溶液100ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz）30分鐘，取出，放冷，再稱定重量，用70%乙醇溶液補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。④測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。⑤結果判斷：本品按干燥品計算，含甘草苷（C21H22O9）不得少于0.50%，甘草酸（C42H62O16）不得少于2.0%。

【實訓提示】甘草含有甘草甜素，為甘草酸的鉀、鈣鹽，甘草酸水解得二分子葡萄糖醛酸和一分子甘草次酸。另含黃酮類化合物、生物堿類、無機元素等。

【實訓報告與考核】

1．繪甘草根橫切面簡圖及粉末特征圖；記錄理化鑒定結果。

2．將綜合鑒定結果與藥品標準相比較，判斷供試品是否符合規(guī)定。

3．書寫藥品檢驗報告書。