第二節(jié)　藥物含量測(cè)定方法

《中國(guó)藥典》正文品種的含量測(cè)定或定量檢查項(xiàng)以所收載的用于藥物含量、溶出或釋放量測(cè)定的定量分析方法主要包括：容量分析法、光譜分析法和色譜分析法。

一、容量分析法

容量分析法（也稱滴定法），是將已知濃度的滴定液（標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液）由滴定管滴加到被測(cè)藥物的溶液中，直至滴定液與被測(cè)藥物反應(yīng)完全（通過(guò)適當(dāng)方法指示），然后根據(jù)滴定液的濃度和被消耗的體積，按化學(xué)式計(jì)量關(guān)系計(jì)算出被測(cè)藥物的含量。

當(dāng)?shù)味ㄒ号c被測(cè)藥物完全作用時(shí)，反應(yīng)達(dá)到化學(xué)計(jì)量點(diǎn)，在進(jìn)行容量分析時(shí)，當(dāng)反應(yīng)達(dá)到化學(xué)計(jì)量點(diǎn)時(shí)應(yīng)停止滴定，并準(zhǔn)確獲取滴定液被消耗的體積。在滴定反應(yīng)過(guò)程中常常借助指示劑的顏色或電子設(shè)備的電流或電壓變化來(lái)判斷化學(xué)計(jì)量點(diǎn)。

酸堿滴定法是容量分析中最基本的、應(yīng)用最廣泛的定量分析方法之一。在藥品含量測(cè)定方法中可以用于酸性、堿性以及能與酸堿直接或間接反應(yīng)的藥物。

（1）直接滴定法　用滴定液直接滴定被測(cè)物質(zhì)溶液的方式，是最基本、最常用的滴定方式。如阿司匹林原料藥、苯巴比妥原料藥的含量測(cè)定。

【例1-1】　阿司匹林原料藥的含量測(cè)定

取本品約0.4015g，精密稱定，加中性乙醇（對(duì)酚酞指示液顯中性）20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉滴定液（0.1021mol/L）滴定，終點(diǎn)時(shí)消耗22.78ml。求阿司匹林的百分含量。已知每1ml氫氧化鈉滴定液（0.1mol/L）相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4。

式中　V——?dú)溲趸c滴定液消耗的體積，mL；

T——滴定度（18.02mg/ml）；

F——滴定液濃度校正系數(shù)；

m——供試品取樣質(zhì)量，單位g。

阿司匹林的百分含量

（2）間接滴定法　本法是先加入定量過(guò)量的滴定液A，使其與被測(cè)藥物定量反應(yīng)，待反應(yīng)完全后，再用另一滴定液B回滴定反應(yīng)后剩余的滴定液A。在計(jì)算百分含量時(shí)，需考慮滴定過(guò)程中是否進(jìn)行空白試驗(yàn)校正。如司可巴比妥鈉、維生素C的含量測(cè)定。

【例1-2】　司可巴比妥鈉的含量測(cè)定

精密稱取司可巴比妥鈉0.1053g，置250ml碘瓶中，加水10ml，振搖使溶解，精密加溴滴定液（0.05mol/L）25ml，再加鹽酸5ml，立即密塞并振搖1min，在暗處?kù)o置15min后，注意微開(kāi)瓶塞，加碘化鉀試液10ml，立即密塞，搖勻后，用硫代硫酸鈉滴定液（0.1mol/L）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml滴定液（0.05mol/L）相當(dāng)于13.01mg的司可巴比妥鈉（C12H17N2NaO3）。已知樣品消耗硫代硫酸鈉滴定液（0.1003mol/L）17.10ml，空白消耗硫代硫酸鈉滴定液（0.1003mol/L）25.12ml。

式中　V0——空白試驗(yàn)回滴定所消耗硫代硫酸鈉滴定液的體積，ml；

V——供試品回滴定所消耗硫代硫酸鈉滴定液的體積，ml；

T——滴定度（13.01mg/ml）；

F——滴定液濃度校正系數(shù)；

m——供試品取樣質(zhì)量，g。

二、光譜分析法

光譜分析法是通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的吸光度或發(fā)光強(qiáng)度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法?！吨袊?guó)藥典》收載的光譜分析法有：紫外-可見(jiàn)分光光度法、紅外分光光度法、原子吸收分光光度法等，本節(jié)主要介紹紫外-可見(jiàn)分光光度法。

物質(zhì)在光吸收過(guò)程中，基于分子中電子能級(jí)的躍遷而產(chǎn)生的光譜，稱為紫外-可見(jiàn)吸收光譜，利用紫外-可見(jiàn)吸收光譜進(jìn)行定性和定量分析的方法稱為紫外-可見(jiàn)分光光度法。

1.基本原理

當(dāng)一束平行單色光垂直通過(guò)溶液時(shí)，溶液對(duì)光的吸收程度與溶液濃度和液層厚度的乘積成正比。這就是分光光度法定量分析的基礎(chǔ)，即朗伯-比耳定律。其關(guān)系式如下：

式中　A——吸光度；

T——透光率，％；

L——液層厚度，cm；

E——吸收系數(shù)，常用的是百分吸收系數(shù)（），其物理意義為當(dāng)溶液濃度為1％（g/ml），液層厚度為1cm時(shí)的吸光度值；

c——100ml溶液中所含被測(cè)物質(zhì)的量（按干燥品或無(wú)水物計(jì)算），g。

2.儀器的基本結(jié)構(gòu)

各種型號(hào)的紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)，就其基本結(jié)構(gòu)來(lái)說(shuō)，都是由五個(gè)基本部分組成，即光源、單色器、吸收池、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)記錄處理系統(tǒng)。示意如圖1-1所示。

（1）光源　光源的作用是提供激發(fā)能，使待測(cè)分子產(chǎn)生光吸收。分光光度計(jì)中紫外光區(qū)常用氫燈、氘燈，可見(jiàn)光區(qū)常用鎢燈、碘鎢燈。

（2）單色器　單色器是能從復(fù)合光中分出波長(zhǎng)可調(diào)的單色光的光學(xué)裝置，其性能直接影響入射光的單色性從而影響到測(cè)定的靈敏度、選擇性及準(zhǔn)確性等。單色器由入射狹縫、準(zhǔn)光器、色散原件、聚焦元件和出射狹縫等幾個(gè)部分組成。示意圖見(jiàn)圖1-2。

（3）吸收池　吸收池是用于盛放液態(tài)樣品的器皿，是光與物質(zhì)發(fā)生作用的場(chǎng)所，因此，要求吸收池能允許入射光束通過(guò)。吸收池分為玻璃池和石英池兩種，玻璃池只能用于可見(jiàn)光區(qū)，石英池可用于可見(jiàn)光區(qū)及紫外光區(qū)。

（4）檢測(cè)器　檢測(cè)器是用于檢測(cè)單色光通過(guò)溶液后透射光的強(qiáng)度，并把這種光信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)的裝置。檢測(cè)器有光電池、光電管和光電倍增管。光電倍增管的結(jié)構(gòu)示意圖見(jiàn)圖1-3。

（5）數(shù)據(jù)記錄處理系統(tǒng)　信號(hào)處理和顯示系統(tǒng)給出透光率T（％）或者吸光度A的數(shù)值。

3.在含量測(cè)定中的應(yīng)用

（1）對(duì)照品比較法　分別配制供試品溶液和對(duì)照品溶液，對(duì)照品溶液中所含被測(cè)成分的量應(yīng)為供試品溶液中被測(cè)成分規(guī)定量的100％±10％，所用溶劑也應(yīng)完全一致，在規(guī)定的波長(zhǎng)測(cè)定供試品溶液和對(duì)照品溶液的吸光度后，按下式計(jì)算供試品中被測(cè)溶液的濃度：

式中　cX——供試品溶液濃度；

cR——對(duì)照品溶液濃度；

AX——供試品溶液的吸光度；

AR——對(duì)照品溶液的吸光度。

【例1-3】　奧沙西泮的含量測(cè)定

精密稱定奧沙西泮0.0157g，置200ml量瓶中，加乙醇150ml，于溫水浴中加熱，振搖使奧沙西泮溶解，放冷，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置100ml量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，在229nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度為0.484；另精密稱取奧沙西泮對(duì)照品0.0149g，同法操作，在229nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度為0.466；藥典規(guī)定本品按干燥品計(jì)算，含C15H11ClN2O2應(yīng)為98.0％～102.0％。問(wèn)該供試品含量是否合格？

98.6％>98％，所以供試品合格。

（2）吸收系數(shù)法　配制供試品溶液，在規(guī)定的波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度，再以該品種在規(guī)定條件下的吸收系數(shù)計(jì)算含量。

【例1-4】　維生素B12的水溶液在361nm處的值是207，盛于1cm吸收池中，測(cè)得溶液的吸光度為0.414，則溶液濃度是多少？

4.注意事項(xiàng)

①空白溶液與供試品溶液必須澄清，不得有渾濁。如有渾濁，應(yīng)預(yù)先過(guò)濾，并棄去初濾液。

②測(cè)定時(shí)，除另有規(guī)定外，應(yīng)以配制供試品溶液的同瓶溶劑為空白對(duì)照，采用1cm的石英吸收池。

③在測(cè)定時(shí)或改測(cè)其他檢品時(shí)，應(yīng)用待測(cè)溶液沖洗吸收池3～4次，用干凈綢布或擦鏡紙擦凈吸收池的透光面至不留斑痕（切忌把透光面磨損），放入樣品室每次方向應(yīng)一致。

④取吸收池時(shí)，應(yīng)拿毛玻璃兩面，切忌用手拿捏透光面，以免粘上油污。使用完后及時(shí)用測(cè)定溶劑沖凈，再用純化水沖凈，用干凈綢布或擦鏡紙擦干，晾干后，放入吸收池盒中，防塵保存。若吸收池內(nèi)外壁沾污，用脫脂棉纏在細(xì)玻璃棒上蘸上乙醇，輕輕擦拭，再用純化水沖凈。

⑤務(wù)必注意經(jīng)常保持硅膠的干燥，目的是保護(hù)光學(xué)元件和光電放大器系統(tǒng)不致受潮損壞而影響儀器的正常工作。

⑥儀器經(jīng)過(guò)搬動(dòng)請(qǐng)及時(shí)檢查并糾正波長(zhǎng)精度，并應(yīng)經(jīng)常校準(zhǔn)波長(zhǎng)精度。

三、色譜分析法

色譜分離法是根據(jù)混合物中各組分的分配系數(shù)不同，或被吸附劑吸附能力的不同，將各組分從混合物中分離后選擇性地對(duì)待測(cè)組分進(jìn)行分析的方法。按照流動(dòng)相的不同可以分為液相色譜和氣相色譜。

（一）高效液相色譜法

高效液相色譜法是采用高壓輸液泵將規(guī)定的流動(dòng)相泵入裝有填充劑的色譜柱將待測(cè)組分進(jìn)行分離測(cè)定的色譜方法。注入的供試品，由流動(dòng)相帶入色譜柱內(nèi)，各組分在色譜柱內(nèi)被分離，并依次進(jìn)入檢測(cè)器，由記錄儀或數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜信號(hào)。

1.基本概念

（1）色譜峰　從被測(cè)組分開(kāi)始進(jìn)入檢測(cè)器至完全流出檢測(cè)器所形成的峰形部分稱色譜峰（見(jiàn)圖1-4）。

（2）峰高（h）　色譜峰頂?shù)交€的垂直距離。

（3）峰寬（W）　從色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)上的切線與基線交點(diǎn)之間的距離。

（4）半高峰寬（W1/2）　色譜峰高一半處的寬度。

（5）峰面積（A）　由色譜峰與基線之間所圍成的面積稱為峰面積。

（6）保留時(shí)間（tR）　試樣從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰極大值時(shí)的時(shí)間。

（7）色譜流出曲線的意義　依據(jù)色譜峰數(shù)可以判斷出樣品中單組分的最少個(gè)數(shù)；依據(jù)色譜保留值進(jìn)行定性分析；依據(jù)色譜峰高或面積進(jìn)行定量分析；依據(jù)色譜保留值或區(qū)域?qū)挾瓤梢栽u(píng)價(jià)色譜柱的分離效能；依據(jù)色譜峰間距可以評(píng)價(jià)固定相或流動(dòng)相選擇是否合適。

2.基本原理

待分離物質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配時(shí)，在固定相中溶解度較小的組分，在色譜柱中向前遷移速率較快；在固定相中溶解度較大的組分，在色譜柱中向前遷移速率較慢，從而達(dá)到分離的目的。

3.儀器的基本結(jié)構(gòu)

高效液相色譜儀主要由輸液泵系統(tǒng)、進(jìn)樣器系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、記錄器顯示器及數(shù)據(jù)處理器等組成，見(jiàn)圖1-5。

4.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

色譜系統(tǒng)的適用性試驗(yàn)通常包括理論板數(shù)、分離度、靈敏度、拖尾因子和重復(fù)性五個(gè)參數(shù)。按各品種正文項(xiàng)下要求對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行適用性試驗(yàn)，即用規(guī)定的對(duì)照品溶液或系統(tǒng)適用性試驗(yàn)溶液在規(guī)定的色譜系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)，必要時(shí)，可對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整，以符合要求。

（1）色譜柱的理論板數(shù)（n）　用于評(píng)價(jià)色譜柱的分離效能。由于不同物質(zhì)在同一色譜柱上的色譜行為不同，采用理論板數(shù)作為衡量色譜柱效能的指標(biāo)時(shí)，應(yīng)指明測(cè)定物質(zhì)，一般為待測(cè)物質(zhì)或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的理論板數(shù)。

n=16（tR/W）2　?。?-6）

或　　n=5.54（tR/W1/2）2　　（1-7）

式中　tR——保留時(shí)間；

W——峰寬；

W1/2——半高峰寬。

tR、W、W1/2的單位可用時(shí)間或長(zhǎng)度計(jì)（下同），但應(yīng)取相同單位。

（2）分離度（R）　用于評(píng)價(jià)待測(cè)物質(zhì)與被分離物質(zhì)之間的分離程度，是衡量色譜系統(tǒng)分離效能的關(guān)鍵指標(biāo)。除另有規(guī)定外，待測(cè)物質(zhì)色譜峰與相鄰色譜峰之間的分離度應(yīng)大于1.5。分離度的計(jì)算公式為：

式中　tR2——相鄰兩峰中后一峰的保留時(shí)間；

tR1——相鄰兩峰中前一峰的保留時(shí)間；

W1，W2——相鄰兩峰的峰寬。

意義：R值越大，表明兩組分的分離程度越高；R=1.0時(shí)，分離程度可達(dá)98％；R<1.0時(shí)兩峰有部分重疊；R=1.5時(shí)，分離程度達(dá)到99.7％；所以，通常用R=1.5作為相鄰兩色譜峰完全分離的指標(biāo)。

（3）重復(fù)性　用于評(píng)價(jià)色譜系統(tǒng)連續(xù)進(jìn)樣時(shí)響應(yīng)值的重復(fù)性能。采用外標(biāo)法時(shí)，通常取各品種項(xiàng)下的對(duì)照品溶液，連續(xù)進(jìn)樣5次，除另有規(guī)定外，其峰面積測(cè)量值的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0％；采用內(nèi)標(biāo)法時(shí)，通常配制相當(dāng)于80％、100％和120％的對(duì)照品溶液，加入規(guī)定量的內(nèi)標(biāo)溶液，配成3種不同濃度的溶液，分別至少進(jìn)樣2次，計(jì)算平均校正因子，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0％。

（4）拖尾因子（T）　用于評(píng)價(jià)色譜峰的對(duì)稱性。除另有規(guī)定外，T應(yīng)在0.95～1.05之間。

式中　W0.05h——0.05峰高處的峰寬；

d——峰極大至峰前沿之間的距離。

5.測(cè)定方法

（1）內(nèi)標(biāo)法　按品種正文項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱（量）取對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，各精密量取適量，混合配成校正因子測(cè)定用的對(duì)照溶液。取一定量進(jìn)樣，記錄色譜圖。測(cè)量對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰髙，按下式計(jì)算校正因子：

式中　As——內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積；

Ar——對(duì)照品的峰面積；

cs——內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度，mg/ml；

cr——對(duì)照品的濃度，mg/ml。

再取各品種項(xiàng)下含有內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)量供試品中待測(cè)成分和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積或峰高，按下式計(jì)算含量：

式中　Ax——供試品的峰面積；

cx——供試品的濃度，mg/ml；

——內(nèi)標(biāo)物的峰面積；

——內(nèi)標(biāo)物的濃度，mg/ml；

f——校正因子。

采用內(nèi)標(biāo)法，可避免因供試品前處理及進(jìn)樣體積誤差對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。

（2）外標(biāo)法　按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，精密稱（量）取對(duì)照品和供試品，配制成溶液，分別精密取一定量，進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)量對(duì)照品溶液和供試品溶液中待測(cè)物質(zhì)的峰面積（或峰高），按下式計(jì)算含量：

式中，各符號(hào)意義同上。

由于微量注射器不易精確控制進(jìn)樣量，當(dāng)采用外標(biāo)法測(cè)定時(shí)，以手動(dòng)進(jìn)樣器定量環(huán)或自動(dòng)進(jìn)樣器進(jìn)樣為宜。

（3）面積歸一化法　按各品種項(xiàng)下的規(guī)定，配制供試品溶液，取一定量進(jìn)樣，記錄色譜圖。測(cè)量各峰的面積和色譜圖上除溶劑峰以外的總色譜峰面積，計(jì)算各峰面積占總峰面積的百分率。通過(guò)下列公式計(jì)算各組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)：

式中　Ai——各組分的峰面積；

fi——各組分的峰高校正因子。

（二）氣相色譜法

1.基本原理

氣相色譜法是采用氣體為流動(dòng)相（載氣）流經(jīng)裝有填充劑的色譜柱進(jìn)行分離測(cè)定的色譜方法。供試品汽化后，被載氣帶入色譜柱進(jìn)行分離，各組分先后進(jìn)入檢測(cè)器，用數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)記錄色譜信號(hào)。分配系數(shù)小的組分先流出，分配系數(shù)大的組分后流出。

2.儀器的基本結(jié)構(gòu)

氣相色譜儀，由載氣源、進(jìn)樣器、色譜柱、柱溫箱、檢測(cè)器和數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等組成，見(jiàn)圖1-6。

（1）載氣源　氣相色譜法的流動(dòng)相為氣體，稱為載氣，氦、氮和氫可用作載氣，可由高壓鋼瓶或高純度氣體發(fā)生器提供，經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)臏p壓裝置，以一定的流速經(jīng)過(guò)進(jìn)樣器和色譜柱；根據(jù)供試品的性質(zhì)和檢測(cè)器種類選擇載氣，除另有規(guī)定外，常用載氣為氮?dú)狻?/p>

（2）進(jìn)樣部分　進(jìn)樣方式一般可采用溶液直接進(jìn)樣、自動(dòng)進(jìn)樣或頂空進(jìn)樣。溶液直接進(jìn)樣采用微量注射器、進(jìn)樣閥或有分流裝置的汽化室進(jìn)樣；采用溶液直接進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣時(shí)，進(jìn)樣口溫度應(yīng)高于柱溫30～50℃；進(jìn)樣量一般不超過(guò)數(shù)微升；柱徑越細(xì)，進(jìn)樣量應(yīng)越少，采用毛細(xì)管柱時(shí)，一般應(yīng)分流以免過(guò)載。

頂空進(jìn)樣適用于固體和液體供試品中揮發(fā)性組分的分離和測(cè)定。將固態(tài)或液態(tài)的供試品制成供試液后，置于密閉小瓶中，在恒溫控制的加熱室中加熱至供試品中揮發(fā)性組分在液態(tài)和氣態(tài)達(dá)到平衡后，由進(jìn)樣器自動(dòng)吸取一定體積的頂空氣注入色譜柱中。

（3）色譜柱　色譜柱為填充柱或毛細(xì)管柱。填充柱的材質(zhì)為不銹鋼或玻璃，內(nèi)徑為2～4mm，柱長(zhǎng)為2～4m，內(nèi)裝吸附劑、高分子多孔小球或涂漬固定液的載體，粒徑為0.18～0.25mm、0.15～0.18mm或0.125～0.15mm。常用載體為經(jīng)酸洗并硅烷化處理的硅藻土或高分子多孔小球，常用固定液有甲基聚硅氧烷、聚乙二醇等。毛細(xì)管柱的材質(zhì)為玻璃或石英，內(nèi)壁或載體經(jīng)涂漬或交聯(lián)固定液，內(nèi)徑一般為0.25mm、0.32mm或0.53mm，柱長(zhǎng)5～60m，固定液膜厚0.1～5.0μm，常用的固定液有甲基聚硅氧烷、不同比例組成的苯基甲基聚硅氧烷、聚乙二醇等。

新填充柱和毛細(xì)管柱在使用前需老化處理，以除去殘留溶劑及易流失的物質(zhì)，色譜柱如長(zhǎng)期未用，使用前應(yīng)老化處理，使基線穩(wěn)定。

（4）柱溫箱　由于柱溫箱溫度的波動(dòng)會(huì)影響色譜分析結(jié)果的重現(xiàn)性，因此柱溫箱控溫精度應(yīng)在±1℃，且溫度波動(dòng)小于每小時(shí)0.1℃。溫度控制系統(tǒng)分為恒溫和程序升溫兩種。

（5）檢測(cè)器　適合氣相色譜法的檢測(cè)器有火焰離子化檢測(cè)器（FID）、熱導(dǎo)檢測(cè)器（TCD）、氮磷檢測(cè)器（NPD）、火焰光度檢測(cè)器（FPD）、電子捕獲檢測(cè)器（ECD）、質(zhì)譜檢測(cè)器（MS）等。火焰離子化檢測(cè)器對(duì)碳?xì)浠衔镯憫?yīng)良好，適合檢測(cè)大多數(shù)的藥物；氮磷檢測(cè)器對(duì)含氮、磷元素的化合物靈敏度高；火焰光度檢測(cè)器對(duì)含磷、硫元素的化合物靈敏度高；電子捕獲檢測(cè)器適于含鹵素的化合物；質(zhì)譜檢測(cè)器還能給出供試品某個(gè)成分相應(yīng)的結(jié)構(gòu)信息，可用于結(jié)構(gòu)確證。除另有規(guī)定外，一般用火焰離子化檢測(cè)器，用氫氣作為燃?xì)猓諝庾鳛橹細(xì)?。在使用火焰離子化檢測(cè)器時(shí)，檢測(cè)器溫度一般應(yīng)高于柱溫，并不得低于150℃，以免水汽凝結(jié)，通常為250～350℃。

（6）數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)　可分為記錄儀、積分儀以及計(jì)算機(jī)工作站等。各品種項(xiàng)下規(guī)定的色譜條件，除檢測(cè)器種類、固定液品種及特殊指定的色譜柱材料不得改變外，其余如色譜柱內(nèi)徑、長(zhǎng)度、載體牌號(hào)、粒度、固定液涂布濃度、載氣流速、柱溫、進(jìn)樣量、檢測(cè)器的靈敏度等，均可適當(dāng)改變，以適應(yīng)具體品種并符合系統(tǒng)適用性試驗(yàn)的要求。一般色譜圖約于30min內(nèi)記錄完畢。

3.系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

同高效液相色譜法。

4.測(cè)定方法

內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法、面積歸一化法均同高效液相色譜法。還可以采用標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法，具體操作如下。

精密稱（量）取某個(gè)雜質(zhì)或待測(cè)成分對(duì)照品適量，配制成適當(dāng)濃度的對(duì)照品溶液，取一定量，精密加入到供試品溶液中，根據(jù)外標(biāo)法或內(nèi)標(biāo)法測(cè)定雜質(zhì)或主成分含量，再扣除加入的對(duì)照品溶液含量，即得供試品溶液中某個(gè)雜質(zhì)和主成分含量。也可按下述公式進(jìn)行計(jì)算，加入對(duì)照品溶液前后校正因子應(yīng)相同，即：

則待測(cè)組分的濃度cx可通過(guò)如下公式進(jìn)行計(jì)算：

式中　cx——供試品中組分x的濃度；

Ax——供試品中組分x的色譜峰面積；

Δcx——所加入的已知濃度的待測(cè)組分對(duì)照品的濃度；

Ais——加入對(duì)照品后組分x的色譜峰面積。

由于氣相色譜法的進(jìn)樣量一般僅數(shù)微升，為減小進(jìn)樣誤差，尤其當(dāng)采用手工進(jìn)樣時(shí)，由于留針時(shí)間和室溫等對(duì)進(jìn)樣量也有影響，故以采用內(nèi)標(biāo)法定量為宜；當(dāng)采用自動(dòng)進(jìn)樣器時(shí)，由于進(jìn)樣重復(fù)性的提高，在保證分析誤差的前提下，也可采用外標(biāo)法定量。當(dāng)采用頂空進(jìn)樣時(shí)，由于供試品和對(duì)照品處于不完全相同的基質(zhì)中，故可采用標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法，以消除基質(zhì)效應(yīng)的影響；當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)溶液加入法與其他定量方法結(jié)果不一致時(shí)，應(yīng)以標(biāo)準(zhǔn)加入法結(jié)果為準(zhǔn)。